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第41卷第2期 王 娟，吴 涛，何 斌，等. circ_0001246调节miRNA30a对骨肉瘤化疗敏感性影响的机制研究［J］.
2021年2月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（02）：198-202 ·201 ·

10 4 10 4 10 4
Quad % Gated Quad % Gated Quad % Gated
10 3 UL 0.63 10 3 UL 0.70 10 3 UL 0.53
UR 2.01 UR 2.21 UR 3.09
7⁃AAD 10 7⁃AAD 10 7⁃AAD 10
h 2 LL 94.20 2 LL 93.87 2 LL 93.39
6 LR 3.16 LR 3.21 LR 2.99
10 1 10 1 10 1
10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
Annexin V APC Annexin V APC Annexin V APC
10 4 10 4 10 4
Quad % Gated Quad % Gated Quad % Gated
10 3 UL 0.37 10 3 UL 0.35 10 3 UL 0.48
UR 5.06 UR 7.36 UR 8.94
h 10 2 LL 91.17 10 2 LL 89.88 10 2 LL 87.32
12 7⁃AAD LR 3.40 7⁃AAD LR 2.41 7⁃AAD LR 3.26
10 1 10 1 10 1
10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
Annexin V APC Annexin V APC Annexin V APC
10 4 10 4 10 4
Quad % Gated Quad % Gated Quad % Gated
10 3 UL 0.44 10 3 UL 0.51 10 3 UL 0.80
UR 11.40 UR 12.20 UR 16.18
h 2 LL 83.24 10 2 LL 83.01 7⁃AAD 10 2 LL 70.98
24 7⁃AAD 10 LR 4.92 7⁃AAD LR 4.28 LR 12.04
10 1 10 1 10 1

10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
Annexin V APC Annexin V APC Annexin V APC
Blank+VP16 NC+VP16 miRNA⁃30a VP16
图2 转染circ_0001246 siRNA后12 h、24 h骨肉瘤细胞（MG63）对化疗药物依托泊苷的敏感性明显增高
Figure 2 The sensitivity of osteosarcoma cell（MG63）to the chemotherapy drug etoposide was significantly increased at 12
h and 24 h after transfected with circ_0001246⁃siRNA

A B
circRNA：miRNA ATXN10_hsa_circ_0001246：hsa⁃miR⁃30a⁃5p miRNA 30a⁃5p组
Target Location chr22：46098609⁃46098629［+］ 20 P < 0.05 对照组
18
miRNA⁃target 16
荧光素酶活性 10
miRNA 3′⁃gaAGGTCAGCTCCTACAAATGt⁃5′ 14
∶ 12
ncRNA 5′⁃t cTTCAAT⁃GATTTTGTTTACa⁃3′ 8
4 6
2
0
Empty plasmid WT mut
A：携带预测miRNA30a结合位点的circ_0001246的线性序列；B：共转染骨肉瘤细胞（MG63）后观察miRNA30a过表达的细胞与对照组相
比，荧光素酶活性显著下降。
图3 Circ_0001246可以通过直接碱基配对吸附miRNA30a
Figure 3 Circ_0001246 can adsorb miRNA30a by direct base pairing
从而调控miRNA 靶基因的表达水平，与很多疾病的 0001246 是一种促肿瘤基因，并且我们验证了 circ_
发生发展密切相关 ［14-15］ 。有相关文献报道，circRNA 0001246 可以促进骨肉瘤的增殖转移，参与了骨肉
［8］
还可以调控选择性拼接和基因转录、作为生物标志 瘤的发生发展 。
物发挥调控作用 ［16］ 。根据基因预测数据库 ［17-18］ ，我 本研究中，通过 siRNA 抑制 circ_0001246 在骨
们筛选了与骨肉瘤细胞和组织相关的 circRNA，发 肉瘤细胞中的表达，检测circ_0001246和miRNA30a
现 在 基 因 ATXN10 转 录 编 码 区 过 程 中 产 生 的 在骨肉瘤细胞中的表达，发现 miRNA30a 的表达与
hsa_circ_0001246 表 达 明 显 上 调 ，而 在 骨 肉 瘤 中 circ_0001246 呈显著负相关，这一结果表明 circ_

miRNA30a 表 达 下 调 。 这 一 发 现 证 明 了 circ_ 0001246 在骨肉瘤中的作用可能是通过 miRNA30a