Page 46 - 南京医科大学学报自然科学版

第40卷第6期41卷第3期
第
·352 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2020年6月年3月
2021

肝癌细胞过表达miR⁃202能抑制细胞增殖
A 30 ** 2.4 HepG2细胞转染miR⁃202 mimics后，CCK8实验
血清miR⁃202相对表达量 20 检测细胞存活率，结果发现，转染 miR⁃202 mimics
25

后，癌细胞存活率下降，24 h、48 h、72 h 的细胞存活
15
10
率分别为（81.16±13.33）%、（68.73±8.67）%、（53.14±
0 5 6.67）%（图4）。
健康志愿者 HCC患者 2.5 荧光素酶报告基因实验证实 GPC3 是 miR⁃202
B 35 * 的靶基因
血清miR⁃202相对表达量 25 GPC3转染HepG2细胞，测定Luciferase活性，结果发
Luciferase 报告基因质粒 pGL3⁃Control 和 pGL3⁃
30
20
现，pGL3⁃Control 组转染 miCtrl 和 miR⁃202 mimics
15
后，Luciferase 活性无明显变化；pGL3⁃GPC3 组转染
10
显，miR⁃202 mimics 明显下调 Luciferase 活性（图
0 5 miCtrl 和 miR⁃202 mimics 后，Luciferase 活性差异明
GPC3阳性者 GPC3阴性者
5）。带有突变序列的pGL3⁃mGPC3组转染miCtrl 和
A：HCC 患者和健康志愿者血清 miR⁃202 的比较；B：GPC3 阳性
miR⁃202 mimics后，Luciferase活性无明显变化。
*
**
者和 GPC3 阴性者血清 miR⁃202 的比较。两组比较，P < 0.01，P <
0.001。 讨 论
图 2 HCC 患者血清中循环 miR⁃202 的含量及其与 GPC3 3
的关系 GPC3 在调控细胞生长和分化方面起重要作
Figure 2 Serum circulating miR⁃202 content and its rela⁃ 用，与 HCC 的发生、发展密切相关。已有很多研究
tionship with GPC3 in HCC patients
表明，GPC3在HCC中特异性高表达，并赋予HCC细

A B C
miCtrl miR⁃202 mimics
30 * 120 **
GPC3 —70 kDa （ % ） 100
miR⁃202相对表达量 20 GPC3蛋白相对表达量 80
25
GAPDH
—40 kDa
15
60
10
40
0 5 20 0
miCtrl miR⁃202 mimics miCtrl miR⁃202 mimics
A：HepG2细胞转染miR⁃202 mimics后，细胞miR⁃202的表达情况；B：Western blot检测HepG2细胞转染miR⁃202 mimics后GPC3表达情况；
C：两组GPC3蛋白表达的定量分析。两组比较，P < 0.01，P < 0.001。
**
*
图3 HepG2细胞过表达miR⁃202对GPC3表达的影响
Figure 3 Effects of miR⁃202 overexpression on GPC3 expression in HepG2 cells
140
胞高度的侵袭转移潜能，提示 GPC3 在调控 HCC 细
（ % ） 100 胞生长分化和恶性进展方面起重要作用 ［4-5］ 。因此，
120
细胞存活率 80 * GPC3已用于肝癌的诊断和治疗，是具有高灵敏性、高
60
特异性和治疗高效性的生物靶点。
40
20 miCtrl
miR⁃202 mimics 在诊断方面，GPC3 对肝癌诊断具有较好的灵
0
0 24 48 72 敏度和特异度。一项 Meta 分析显示，GPC3 单一指
时间（h） 标用于 HCC 诊断的灵敏度可达 59.2%（95% CI：
两组比较，P < 0.001。
*
图4 过表达miR⁃202抑制HepG2细胞增殖 55.0%~63.0%），高于AFP单一指标诊断HCC的灵敏
Figure 4 Overexpressed miR⁃202 inhibited proliferation 度 51.9%（95% CI：47.0%~56.0%）；两者诊断的特异
of HepG2 cells 度分别为 84.8%（95%CI：82.0%~87.3%）和 94.0%