Page 47 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第3期 周肖英，林 彬，侯云华，等. miR⁃202及其靶基因Glypican⁃3在肝癌中的表达及其临床意义［J］.
2021年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（03）：349-354 ·353 ·

A B
3′ aagGGUACGGGAUAUGGAGa 5′ hsa⁃miR⁃202
∶ ∶ ∶ （ % ） 1 000
96：5′ uugUUAUCCUGUAUACCUCc 5′ GPC3 800 miCtrl
Luciferase相对活性 600 *
miR⁃202 mimics
400
200
0
pGL3⁃Control pGL3⁃GPC3 pGL3⁃mGPC3

A：miR⁃202可以与GPC3基因结合；B：各组转染miR⁃202 mimics后Luciferase活性变化。两组比较，P < 0.001（n=3）。
*
图5 荧光素酶报告基因实验结果
Figure 5 Results of luciferase reporter gene assay

（95% CI：92.1%~95.6%），AFP诊断特异度略高。因 达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、临床分期无
此，GPC3和AFP诊断性OR（DOR）分别为18.0（95% 关，但与细胞组织学分化类型以及微血管侵犯高度
CI：5.4~60.4）和 23.4（95% CI：10.3~53.2），而联合两 相关，提示GPC3高表达是肝癌恶性生物学的表征，
个标志物（SROC）的曲线下面积（AUC）为0.81（95% 可能预示预后不良。本研究检测了 HCC 患者血清
CI：0.77~0.84），提示 GPC3 对 HCC 的诊断可与 AFP 中循环 miR⁃202 含量，发现 HCC 患者普遍为 miR⁃
媲美，且可与 AFP 协同用于肝癌的早期诊断，大幅 202低水平状态，且高表达GPC3的患者具有更低水
提高肝癌诊断的正确率 ［6- 7］ 。在治疗方面，由于 平的循环 miR⁃202，提示两者存在一定的相互调控
GPC3 在 HCC 中表达的特异性很高，在正常肝组织 关系。在肝癌 HepG2 细胞中上调 miR⁃202 表达，
中几乎不表达，因此理所当然成为肝癌靶向治疗的 GPC3表达随之下调，且癌细胞增殖活性受到抑制，
理想分子靶标，而研究较多的就是 GPC3 全长抗体 证实 GPC3 是 miR⁃202 调控的靶基因。为进一步验
治疗策略 。针对 GPC3 研发的人鼠嵌合型抗体 证 GPC3 和 miR⁃202 之间的关系，本研究进行了 Lu⁃
［8］
GC33，在体内能介导抗体依赖细胞介导的细胞毒作 ciferase 报告基因实验，证实 miR⁃202 可直接负调控
用和补体依赖的细胞毒性，明显抑制 GPC3 阳性的 GPC3的表达。本研究阐明了GPC3受miR⁃202的直
肝癌细胞 HepG2 和 Huh⁃7 的小鼠移植瘤的生长，而 接调控，为设计肝癌靶向治疗策略提供了参考依
对GPC3阴性的肝癌细胞移植瘤则无效 。近来，人 据，靶向GPC3的治疗策略如能辅助提高miR⁃202的
［9］
们又研发了靶向 GPC3 的嵌合抗原受体 T 细胞免疫 功能，将可能产生协同抗肝癌的效果。
疗法（chimeric antigen receptor T⁃cell immunotherapy， ［参考文献］
CAR⁃T），为晚期 HCC 患者带来了希望 ［10］ 。目前国
［1］ GUO M，ZHANG H，ZHENG J，et al. Glypican⁃3：a new
内已有多个GPC3的CAR⁃T细胞进入临床试验 ［11-12］ 。
target for diagnosis and treatment of hepatocellular carci⁃
基于上述 GC33 单抗的 scFv 融合了 CD28、CD137 和
noma［J］. J Cancer，2020，11（8）：2008-2021
CD3ζ的第3代CAR⁃T，已证明具有诱导IFN⁃γ和IL⁃2 ［2］ MYTHREYE K，BLOBE G C. Proteoglycan signaling co⁃
产生的功能，能抑制 GPC3 阳性的 HCC 裸鼠移植瘤 receptors：roles in cell adhesion，migration and invasion
的生长 。 ［J］. Cell Signal，2009，21（11）：1548-1558
［13］
虽然人们对GPC3在肝癌中的作用和意义已经 ［3］ KAMIMURA K，MAEDA N.Heparan sulfate proteogly⁃
有了充分了解，但其分子调控机制还有很多未明之 cans in Drosophila neuromuscular development［J］.Bio⁃
处。现已发现，GPC3 可影响多种信号途径来促进 chim Biophys Acta Gen Subj，2017，1861（10）：2442-
2446
肝癌发展 ［14］ 。GPC3能够与Wnt结合形成复合物，激
［4］ ZHU J，WANG Y，YANG P et al. GPC3⁃targeted and cur⁃
活经典的Wnt/β⁃Catenin信号分子通路，实现刺激肝
cumin⁃loaded phospholipid microbubbles for sono⁃photo⁃
癌生长的目的 ［15］ 。GPC3 还可激活 ERK 信号途径，
dynamic therapy in liver cancer cells［J］. Colloids Surf B
诱导肝癌细胞发生上皮间质转化，而促进肝癌细胞 Biointerfaces，2020，197：111358
的生长、侵袭、迁移 ［16］ 。本研究对临床126例HCC标 ［5］ LIU X，GAO F，JIANG L，et al. 32A9，a novel human anti⁃
本进行检测，发现GPC3的总阳性率为77.78%，其表 body for designing an immunotoxin and CAR ⁃ T cells