Page 30 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第4期
·500 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年4月

暴露组显著降低了 RGC⁃5 细胞的增殖能力；与 lv⁃ 露后视网膜神经节细胞的功能。
NC+PCB组相比，NTN1过表达减轻了PCB1254的毒性
3 讨 论
作用，提高了 RGC⁃5 细胞的增殖能力，差异有统计
学意义（图3D）。本研究进一步利用Western blot 方 随着社会经济和现代医学的发展，受环境因
法检测了各组 ERK 信号通路蛋白的表达，结果显 素、遗传因素等影响的儿童先天性遗传性眼病等的
示，lv⁃NTN1+PCB 组较 lv⁃NC+PCB 组 p⁃ERK 表达升 发生率逐步增高。视网膜功能异常与儿童眼病的
高，而总ERK水平不变，差异有统计学意义（图3E）， 发生发展密切相关。任何异常的视觉环境（包括环
提示 NTN1 可能通过 ERK 磷酸化水平调节 PCBs 暴 境污染）都可能影响视觉系统的正常发育，导致视

A B lv⁃NTN1
500 10 **
*** blank lv⁃NC MOI=1 MOI=10 MOI=100 8 **
NTN1 mRNA 相对表达量 400 *** β⁃actin 75 kDa NTN1/β⁃actin 6 4 *
***
300
NTN1
200
42 kDa
100
0 2 0
blank lv⁃NC MOI=1 MOI=100 blank lv⁃NC MOI=1 MOI=100
MOI=10
MOI=10
lv⁃NTN1 lv⁃NTN1
C blank G2⁃M
600 600 PCB1254
S
G0⁃G1：22.9%
500 500 120 G0⁃G1
S：33.8% 400 G0⁃G1：20.9% 100 ** ***
400
S：29.9%
G2⁃M：43.3%
细胞数 300 细胞数 300 G2⁃M：49.2% （ % ）
200 200 细胞比例 80 ** **
60
100 100 40
0 0 20 **
0 22 64 96 120 160 192 224 256 0 22 64 96 120 160 192 224 256 0
DNA含量 DNA含量 blank lv⁃NC+PCB1254
PCB1254
600 lv⁃NC+PCB1254 600 lv⁃NTN1+PCB1254 lv⁃NTN1+PCB1254
500 G0⁃G1：20.3% 500 G0⁃G1：19.0%
S：31.3%
细胞数 400 G2⁃M：48.5% 细胞数 400 S：26.5%
G2⁃M：54.5%
300
300
200
200
100 100
0 0
0 22 64 96 120 160 192 224 256 0 22 64 96 120 160 192 224 256
DNA含量 DNA含量
D E
10 blank **
lv⁃NTN1+PCB1254
*** 3
PCB1254 *** blank PCB1254 lv⁃NC+PCB1254 * * *
相对吸光度值 6 4 lv⁃NTN1+PCB1254 ** p⁃ERK 44 kDa p⁃ERK/ERK 蛋白相对表达量 2 1
8
lv⁃NC+PCB1254
***
42 kDa
44 kDa
ERK
0 2 GAPDH 42 kDa 0
36 kDa
0 h 24 h 48 h 72 h
blank PCB1254
lv⁃NTN1+PCB1254
lv⁃NC+PCB1254
A：NTN1过表达后各组细胞内NTN1的mRNA 表达水平（n=9）；B：NTN1过表达后各组细胞内NTN1的蛋白表达水平（n=3）；C：NTN1过表
达后的细胞周期变化（n=3）；D：NTN1过表达后的细胞增殖变化（n=5）；E：NTN1过表达后对p⁃ERK及ERK信号分子的影响（n=3）。与对照组比
较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001。
***
**
*
图3 过表达NTN1对PCB1254暴露后RGC⁃5细胞功能及对ERK信号通路的影响
Figure 3 Effects of overexpression of NTN1 on RGC⁃5 cell function and ERK signaling pathway after PCB 1254 exposure