Page 37 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第4期 沙博文，王 曾，周锦仁，等. 洛铂对肝癌肿瘤免疫及PD⁃L1表达的影响［J］.
2021年4月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（04）：503-508 ·507 ·

Hep3B SMMC⁃7721 HepG2
对照组 洛铂组 对照组 洛铂组 对照组 洛铂组

PD⁃L1 40~50 kDa
AKT 60 kDa
p⁃AKT 60 kDa
GAPDH 2.0 37 kDa * 对照组
PD⁃L1蛋白相对表达量 2.0 * * AKT蛋白相对表达量 1.5 p⁃AKT蛋白相对表达量 2.0 * * 洛铂组
2.5
2.5
**
1.5
1.5
1.0
1.0
1.0
0.5
0.5
0.5
0.0
SMMC⁃7721
Hep3B HepG2 0.0 Hep3B HepG2 0.0 Hep3B HepG2
SMMC⁃7721
SMMC⁃7721
两组比较，P < 0.05，P < 0.01（n=3）。
**
*
图3 Western blot检测Hep3B、HepG2、SMMC⁃7721细胞以洛铂（16 μmol/L）处理24 h后PD⁃L1、AKT、p⁃AKT表达情况
Figure 3 Effects of lobaplatin on expression of PD⁃L1，p⁃AKT and AKT in Hep3B，HepG2，SMMC⁃7721 cells detected by
Western blot
Hep3B 疫逃逸。我们进一步在体外实验中探究洛铂对肝癌
对照组 洛铂组 AKT抑制剂组 细胞的影响，用洛铂刺激肝癌细胞，流式细胞检测发
PD⁃L1 40~50 kDa 现肿瘤细胞抗原递呈组件HLA⁃Ⅰ、TAP⁃1、TAP⁃2表
达升高，提示洛铂诱导肿瘤细胞免疫原性提高，从而
GAPDH 37 kDa
可能加强机体抗肿瘤免疫，这与先前相关研究一致。
PD⁃L1蛋白相对表达量 2.0 剂可以阻断肿瘤免疫逃避相关途径，增强宿主抗肿
2.5
**
*
近年研究发现，PD⁃1/PD⁃L1等免疫检查点抑制
1.5
瘤免疫，在黑色素瘤及肺癌等恶性肿瘤治疗中取得
1.0
显著成果。Fournel等
［13］
的一项研究中，非小细胞肺
0.5
0.0
对照组 洛铂组 AKT抑制剂组 癌患者在经过铂类抗肿瘤药物治疗后，肿瘤组织中
的 PD⁃L1 表达明显升高，随后的动物实验表明铂类
两组比较，P < 0.05，P < 0.01（n=3）。
**
*
图 4 Western blot检测Hep3B细胞洛铂组、AKT抑制组和 抗肿瘤药物相关联合免疫检查点抑制剂，与单用铂
对照组PD⁃L1表达情况 类、PD⁃L1 单抗相比，产生更明显协同抑瘤作用，在
Figure 4 Effects of lobaplatin and AKT ⁃ inhibitor 胃肠道肿瘤及卵巢肿瘤中也发现类似抗肿瘤效果，
（MK2206）on the expression of PD ⁃ L1 in 这为临床肝癌的治疗提供了新思路 ［15-16］ 。
Hep3B cells detected by Western blot
因此我们研究了洛铂对肝癌细胞PD⁃L1表达的
与机体免疫功能状态联系紧密。Hodge 等 ［7-8，14］ 提 影响，并检测了可能参与调控的相关信号通路。结
出，在卵巢癌、前列腺癌、头颈部鳞癌中铂类细胞毒 果显示，用洛铂刺激 Hep3B、SMMC⁃7721、HepG2 肝
性抗肿瘤药物可以上调宿主抗原呈递组件表达，从 癌细胞后，通过 Western blot、RT⁃qPCR 检测发现洛
而提高机体抗肿瘤免疫。但铂类抗肿瘤药物对肝 铂处理组 PD⁃L1 表达明显增加，证实了洛铂能够诱
癌免疫环境影响的研究尚未开展，因此我们设计了 导肝癌细胞 PD⁃L1 表达增高，这与铂类药物在其他
一项前瞻性临床研究，通过在肝癌切除术中腹腔灌 肿瘤中的作用相一致。同时检测了 AKT 通路对这
注洛铂，对比手术前后患者淋巴细胞亚群变化探究 一作用的影响，发现洛铂组（16 μmol/L）与对照组相
洛铂对机体免疫功能的影响。研究发现接受洛铂 比，AKT 无明显变化，p⁃AKT、PD⁃L1表达增高，加入
+
+
腹腔灌注后的肝癌患者术后CD4 T细胞、CD4 /CD8 + AKT 阻断剂 MK2206 后，PD⁃L1 表达下降，从而证实
比值明显升高，Treg细胞下调，说明洛铂能够提高机 了 AKT 通路参与洛铂诱导肝癌细胞 PD⁃L1 表达。
体细胞免疫功能，同时降低Treg细胞水平对抗肿瘤免 上述实验证实洛铂对肝癌具有双重能力：洛铂可能