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第41卷第4期
               ·514 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年4月


                          1.5                                   的方法可以将胆固醇基修饰的miR⁃210加载到外泌
                               exo+miR⁃182 antagomir
                               exo+NC                           体中，并且加载 miR⁃210 的外泌体可以穿过血脑屏
                                                                                                  ［31］
                          1.0                                   障从而改善小鼠脑缺血损伤，Didiot等 研究发现外
                         吸光度值                 *                 泌体介导的寡核苷酸递送可以降低沉默 Huntingtin
                          0.5                                   （Htt）mRNA所需的寡核苷酸有效浓度，在最近的一
                                       *
                                                                项研究中，需要注入700 μg反义寡核苷酸才能有效
                                                                沉默 Htt mRNA，而 Didiot 等   ［31］ 研究表明，在 1 周内
                          0.0
                               24 h   48 h   72 h                                                HTT  就足以降低
                                                                （1 μg/d）仅注入 3.5~7.0 μg hsiRNA
                      与加载NC的外泌体组比较，P < 0.05（n=3）。
                                         *
                                                                Htt mRNA的水平约35%。上述研究表明，共孵育法
               图7 exo⁃miR⁃182 antagomir对CAL27细胞增殖的影响
              Figure 7 Effects of exo⁃miR⁃182 antagomir on the prolifera⁃  是一种简单高效的外泌体加载核酸类药物的方法，
                     tion of CAL27 cells                        也表现出外泌体在疾病治疗领域的巨大潜力。
                                                                     综上所述，miR⁃182在OSCC中以及肿瘤浸润深
              清液中的外泌体进行提取，并通过蛋白免疫印迹实                            度大于 5 mm 的患者的血清外泌体中表达水平均升
              验、TEM和NTA证明成功提取到了外泌体。                             高，这为 OSCC 的诊断及预后评估提供了新的标志
                  有研究表明miR⁃182与多种肿瘤的发生发展有                       物。外泌体加载miR⁃182的抑制剂也为口腔癌提供
              关，如miR⁃182⁃5p上调作为前列腺癌、膀胱癌、胃癌                      了潜在的治疗方法。
              和乳腺癌相关的致癌基因            ［20-24］ 。Guo等 ［25］ 研究发现    ［参考文献］
              miR⁃182⁃5p通过靶向MTSS1基因调节OSCC迁移和
                                                                ［1］ RADHIKA T，JEDDY N，NITHYA S，et al. Salivary bio⁃
              侵袭，当 OSCC 分化程度较低，T 和 N 分期较高时
                                                                     markers in oral squamous cell carcinoma ⁃ an insight［J］.
              miR⁃182⁃5p 表达的增加更为显著。本研究发现当
                                                                     J Oral Biol Craniofac Res，2016，6（Suppl 1）：S51-S54
              OSCC 患者肿瘤浸润深度＞5 mm 时，患者血清外泌                       ［2］ SALAHSHOURIFAR I，VINCENT ⁃ CHONG V K，KAL⁃
              体内 miR⁃182 含量相对于正常人有明显升高（P＜                            LARAKKAL T G，et al. Genomic DNA copy number alter⁃
              0.05），表明 OSCC 患者血清外泌体 miR⁃182 含量与                      ations from precursor oral lesions to oral squamous cell
              OSCC 的疾病进展密切相关。OSCC 的浸润深度与                             carcinoma［J］. Oral Oncol，2014，50（5）：404-412
              生存率密切相关，当肿瘤厚度超过 2 mm 时，常观                         ［3］ KRISHNA RAO S V，MEJIA G，ROBERTS⁃THOMSON
              察到颈部淋巴结转移           ［26］ ，OSCC 细胞的血管和神经                K，et al. Epidemiology of oral cancer in Asia in the past
              周围浸润是导致局部复发以及区域和远处转移的                                  decade⁃⁃an update（2000⁃2012）［J］. Asian Pac J Cancer
                                                                     Prev，2013，14（10）：5567-5577
              预后因素     ［27］ ，因此血清外泌体 miR⁃182 可能成为
                                                                ［4］ DE MORAIS E F，MAFRA R P，GONZAGA A，et al. Prog⁃
              OSCC 的预后标志物之一，但是其作用机制仍需进
                                                                     nostic factors of oral squamous cell carcinoma in young
              一步研究。
                                                                     patients：a systematic review［J］. J Oral Maxillofac Surg，
                  研究表明miR⁃182可以促进OSCC细胞的增殖、                          2017，75（7）：1555-1566
              迁移和侵袭，通过转染抗 miR⁃182 寡核苷酸可以显                       ［5］ GHARAT S A，MOMIN M，BHAVSAR C. Oral squamous
              著抑制 OSCC 的增殖、迁移和侵袭            ［25，28］ ，但缺乏安全           cell carcinoma：current treatment strategies and nanotech⁃
              有效的递送系统阻碍了其临床应用。外泌体作为天                                 nology⁃based approaches for prevention and therapy［J］.
              然的纳米材料，具有免疫原性小，细胞毒性低，可以穿                               Crit Rev Ther Drug Carrier Syst，2016，33（4）：363-400
              过血⁃脑屏障，能够在血液中稳定存在等特点                   ［29-30］ ，是  ［6］ MICHLEWSKI G，CÁCERES J F. Post ⁃ transcriptional
              一种理想的药物递送载体，因此我们采用外泌体递                                 control of miRNA biogenesis［J］. RNA，2019，25（1）：1-
              送 miR⁃182 的拮抗剂用于观察 OSCC 细胞的增殖实                         16
                                                                ［7］ HATA A，LIEBERMAN J. Dysregulation of microRNA
              验。通过共孵育的方法将亲脂性修饰的 miR⁃182
                                                                     biogenesis and gene silencing in cancer［J］. Sci Signal，
              antagomir 加载到 HEK293 细胞外泌体中，在荧光显
                                                                     2015，8（368）：re3
              微镜下观察到药物加载到外泌体中，加载 miR⁃182
                                                                ［8］ HUIYIN L，HAIQI L，XIAN W，et al. MicroRNAs as po⁃
              antagomir 的外泌体可以显著抑制 CAL27 细胞的增                        tential biomarkers in cancer：opportunities and challenges
              殖，这与Wang等      ［28］ 研究一致，为口腔癌治疗提供了                    ［J］. Biomed Res Int，2015，2015：1-17
              一种新的途径。Zhang等         ［15］ 的研究发现通过共孵育             ［9］ KOWAL J，TKACH M，THÉRY C. Biogenesis and secre⁃
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