Page 21 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第6期 马文杰，洪 牮，朱梦琳，等. 低分子量透明质酸通过CD44调控S100A4核转移促进心肌纤维化［J］.
2021年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（06）：796-803，825 ·799 ·

A 6 * B 10 *
mRNA相对表达量 4 mRNA 相对表达量 8 6 4

CD44 2 0 S100A4 2 0

MC CF MC CF
C CF MC D * E 6
CD44蛋白相对表达量 5 S100A4蛋白相对表达量
CD44 —82 kDa 4 *
S100A4 —12 kDa 3 4

GAPDH —36 kDa 2 2

0 1 0
MC CF MC CF
A、B：qRT⁃PCR 检测的 CD44（A）和 S100A4 mRNA（B）的半定量统计分析图；C~E：Western blot 检测结果（C）与 CD44（D）、S100A4（E）蛋白
表达的半定量统计分析图。两组比较，P＜0.01（n=3）。
*
图1 CD44与S100A4在乳小鼠CF与MC中的表达
Figure 1 Expressions of CD44 and S100A4 in neonatal mice CF and MC

A 2.0 B 1.6
**
**
**
**
1.5 ** ** ** ** 1.4 **
nm ） *
（ 450 1.0 EdU相对吸收度 1.2
D
0.5 1.0

0 0.8
0 0.1 0.2 0.4 0.8 1.6 3.2 6.4 0 0.1 0.2 0.4 0.8 1.6
LMW⁃HA（mg/mL） LMW⁃HA（mg/mL）
A：CCK⁃8检测CF增殖情况；B：EdU染色检测CF增殖情况。与0 mg/mL的对照组组比较，P＜0.05，P＜0.01（n=4）。
*
**
图2 不同浓度的LMW⁃HA刺激CF的增殖情况
Figure 2 The proliferation of CF stimulated by different concentrations of LMW⁃HA

S100A4 蛋白在 30 min 后的变化才有统计学意义 24 h，无论是否有LMW⁃HA的存在，胞浆和胞核中的
（P＜0.01）。结合总蛋白的表达，可以得出 CD44 蛋 CD44 和 S100A4 蛋白的表达量均没有改变（P＞
白从胞浆进入了胞核，而S100A4核蛋白虽然也在合 0.05，图6A、B）。免疫荧光结果也证明了其对CD44
成，但是主要来源于胞浆。免疫荧光结果也能印证 和S100A4蛋白核转移的抑制作用（图6C）。
这2个蛋白的核转移（图4C）。
3 讨 论
2.5 CD44 抑制剂存在时 LMW⁃HA 刺激后 CF 的表
型转化 心肌纤维化是众多心血管疾病及心脏老化的
PCR和Western blot结果均显示，BRIC⁃235本身 一个重要的病理特征，导致的心室重构会严重影响
对细胞无影响，不会导致CF中的心脏纤维化标志物 心功能，目前药物治疗主要围绕阻断神经⁃内分泌系
的增加（P＞0.05，图5）。同时LMW⁃HA的刺激纤维 统抑制心室重构来展开 ［23］ ，已知血管紧张素转化酶
化作用被逆转，α⁃SMA、Collagen 3和S100A4的表达 抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂均有逆转心室
不增加，CD44的表达依然不变（P＞0.05）。 重构的作用，但其确切效果并不佳；此外，干细胞移植
［24］
2.6 BRIC⁃235 能抑制 CD44 与 S100A4 蛋白从胞浆 和基因治疗研究正在逐步深入，但疗效尚不确切 。
进入胞核的过程 因此寻找抑制心肌纤维化逆转心室重构的新靶点
Western blot 结果显示，BRIC⁃235 预处理细胞 迫在眉睫。