Page 22 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 22

第41卷第6期
               ·800 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2021年6月


              A   4              **   B    3             **   C  1.5                 D     4              **
                 α⁃SMA mRNA相对表达量  3 2 1  **  mRNA  3 Collagen  相对表达量  2 1  *  mRNA相对表达量  1.0  mRNA S100A4  相对表达量  3 2 1  *




                                                                 0.5

                  0
                    对照组 4 h  8 h 12 h      0  对照组 4 h  8 h 12 h  CD44  0  对照组 4 h  8 h 12 h  0  对照组 4 h  8 h 12 h

                                            E       对照组 4 h   8 h  12 h
                                                α⁃SMA                  —42 kDa
                                              Collagen3                —139 kDa
                                                 CD44                  —82 kDa
                                               S100A4                  —12 kDa
                                               GAPDH                   —36 kDa
              F   3              **   G    3              **  H   1.5                 I     3              **
                 α⁃SMA蛋白相对表达量  2 1  *   3蛋白  Collagen  相对表达量  2 1  **  CD44蛋白相对表达量  1.0  S100A4蛋白  相对表达量  2 1  *




                                                                  0.5

                  0
                    对照组 4 h  8 h 12 h      0  对照组 4 h  8 h 12 h    0  对照组 4 h  8 h 12 h     0  对照组 4 h  8 h 12 h
               J
                            DAPI                  α⁃SMA                  S100A4                 Merge




                  对照组











                  LMW⁃HA









                 A~D:PCR检测α⁃SMA(A)、Collagen 3(B)、CD44(C)、S100A4(D)mRNA表达的半定量统计分析图;E~I:Western blot检测结果(E)与α⁃SMA
             (F)、Collagen 3(G)、CD44(H)、S100A4(I)蛋白表达的半定量统计分析图;J:免疫荧光对比图(×40)。与对照组组比较,P<0.05,P<0.01(n=3)。
                                                                                                  **
                                                                                           *
                                     图3 LMW⁃HA刺激后心肌纤维化标志物与CD44的表达量变化
                         Figure 3  The expressions of myocardial fibrosis markers and CD44 after LMW⁃HA stimulation

                  近年来细胞微环境的作用颇受关注。HA 是细                         刺激CF后1 h,细胞核内的S100A4明显增多同时胞
              胞外基质的重要组成成分,本研究首先明确相较于                            浆内的S100A4减少,并且细胞膜表面的特异性受体

              MC,CF 中的 CD44 与 S100A4 高表达,因此选择 CF                CD44 也有此种趋势。我们根据以上结果推测,
              作为研究对象。接着,本研究发现LMW⁃HA可促进                          LMW⁃HA 促进 CF 纤维化的机制可能与 CD44 的结
              CF 的表型转化,刺激 8 h 后开始分化为肌成纤维细                       合及S100A4的核转移相关。最后为明确该假设,本

              胞,促进心肌纤维化。进一步研究提示,LMW⁃HA                          研究使用了 CD44 抑制剂 BRIC⁃235 重复上述实验,
   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27