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第41卷第7期           吴   春,张小梅,向 阳,等. GDF15激活ERK/Bcl⁃2通路增强BM⁃MSCs放射抗性[J].
                  2021年7月                   南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(07):976-983,991                     ·979 ·


                A    8.0         **           C           DAPI                GDF15                 Merge
                    mRNA的相对表达量  6.0  **  **     未放射




                     4.0

                    GDF15  2.0 0  *

                         0 h  2 h  4 h  8 h  24 h
                B
                        0 h  2 h 4 h 8 h 24 h
                  GDF15                  25 kDa
                                                h
                                                放射后8
                  β⁃actin
                                         43 kDa
                     2.5
                    GDF15蛋白相对表达量  2.0  *  **
                                 **
                     1.5
                     1.0
                     0.5
                      0                         h 放射后24
                         0 h  2 h  4 h  8 h  24 h



                                                                                                           50 μm
                   A:RT⁃qPCR检测9 Gy放射后细胞GDF15的mRNA表达水平;B:Western blot检测9 Gy放射后细胞GDF15蛋白水平;C:免疫荧光染色检测
                9 Gy放射后细胞GDF15蛋白表达(×400)。两组比较,P ˂ 0.05,P ˂ 0.01(n=3)。
                                                    *
                                                           **
                                              图1 BM⁃MSCs经放射后GDF15的表达情况
                                      Figure 1 The expression of GDF15 in BM⁃MSCs after irradiation

                   A   1.5          *            B                               C  1.5        *  *
                                                                   干扰片段2组
                       mRNA相对表达量  1.0  *  *        GDF15  干扰对照组 干扰片段1组  干扰片段3组      GDF15蛋白相对表达量  1.0  *


                                                                          25 kDa
                                                                                    0.5
                       GDF15  0.5 0                β⁃actin                43 kDa      0
                       干扰对照组 干扰片段1组 干扰片段2组 干扰片段3组                                   干扰对照组 干扰片段1组 干扰片段2组 干扰片段3组



                   A:RT⁃qPCR检测细胞转染24 h后GDF15 mRNA水平;B:Western blot检测细胞转染72 h后GDF15蛋白水平;C:Western blot灰度值统计结
                果。两组比较,P ˂ 0.05(n=3)。
                          *
                                           图2   RT⁃qPCR和Western blot验证GDF15干扰效果
                        Figure 2 The interference effect of GDF15 in BM⁃MSCs were detected by RT⁃qPCR and Western blot


                染色检测细胞周期,结果显示,未放射条件下,干扰                           GDF15几乎不影响未放射时的细胞增殖活力,却可

                GDF15 对 BM⁃MSCs 周期无明显影响;放射后 24 h                  导致放射后 BM⁃MSCs 细胞增殖活力显著降低(P ˂
                时,干扰 GDF15 组 G2 期比例显著增加(P ˂ 0.05,图                0.01,图3C)。综上所述,干扰GDF15基因表达可导
                3A、B)。收取放射3 d后的细胞,CCK⁃8法检测细胞                      致放射后BM⁃MSCs细胞G2期阻滞并且降低细胞增
                增殖活力,结果显示与细胞周期结果相符,干扰                             殖活力。
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