Page 65 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第7期 马 佩，方 圆，查全斌，等. 长链非编码RNA LINC01197调节胃癌进展的机制研究［J］.
2021年7月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（07）：992-998，1014 ·995 ·

A B C
4 1.0 HR=1.29（1.04~1.61） 1.0 HR=1.37（1.08~1.73）
log⁃rank P=0.019 log⁃rank P=0.010
0.8 0.8
（ TPM+1 ） 2 总生存率 0.6 无进展生存率 0.6
3
0.4
0.4
log2 1 0.2 0.2
低表达 低表达
高表达 高表达
0 0
0
0 50 100 150 0 50 100 150
胃癌组织 正常胃组织 时间（月） 时间（月）
（ n=408 ）
（ n=211 ）
D E F
1.0 HR=1.38（1.03~1.84） 15 4 ***
log⁃rank P=0.029 P＜0.001 3 ***
0.8
进展后生存率 0.6 LIN01197表达量 10 LIN01197表达量 2 *** **

0.4
0.2
低表达 5 1
高表达
0
0 0
0 50 100 150 癌旁组织 癌组织 AGS
时间（月） GES⁃1 SGC⁃7901 BGC⁃823 MGC⁃803
A：LIN01197表达（GEPIA数据库）；B：总生存期；C：首次进展时间；D：进展后生存期；E：胃癌组织和癌旁组织LINC01197表达（qPCR法）；
F：胃癌细胞和正常胃黏膜细胞LINC01197表达（qPCR法），与GES⁃1组相比，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
***
**
图1 lncRNA LIN01197的表达与胃癌预后的关联分析
Figure 1 Analysis of the association between lncRNA LIN01197 and prognosis in gastric cancer
殖速度减缓（图3A、B），在皮下荷瘤15 d后最终成瘤 LINC01197 有可能是通过影响 SERPINA1 的表达水
的体积和重量也较小（图 3C）。免疫组化结果也显 平，从而进一步影响胃癌的进展。
示，实验组 Ki⁃67 的表达水平显著下降（图 3D）。这 2.4 LINC01197通过调节SERPINA1表达促进胃癌
些结果都证实了敲减LINC01197在体内和体外均可 进展
以抑制胃癌的发生和发展。 为进一步探究LINC01197促进胃癌进展是否是
2.3 LINC01197 在胃癌细胞中促进下游分子 SER⁃ 通过调节 SERPINA1 实现的，我们在已经稳定转染
PINA1的表达 shLINC01197 的 SGC⁃7901 和 BGC⁃823 两株胃癌细
为了深入探索LINC01197促进胃癌发生发展的 胞株中再转染 SERPINA1 过表达质粒。相较于 NC
机制，首先我们对 LINC01197 的亚细胞定位进行了 组和shLINC01197组，CCK⁃8实验表明shLINC01197
检测，发现LINC01197在SGC⁃7901和BGC⁃823两株 组胃癌细胞再过表达 SERPINA1 可恢复胃癌细胞
胃癌细胞中均主要分布于细胞核内（图4A），提示其 部分增殖能力（图 5A）。Transwell 实验也表明稳转
可 能 通 过 转 录 水 平 调 控 发 挥 功 能 。 对 敲 减 了 shLINC01197 的胃癌细胞再过表达 SERPINA1 可恢
LINC01197 后的 BGC⁃823 shLINC01197 细胞及阴性 复部分胃癌细胞侵袭迁移能力（图 5B）。上述结果
对照BGC⁃823 NC细胞进行转录组高通量测序（high⁃ 表明，LINC01197 促进胃癌细胞增殖和侵袭转移的
throughout transcriptome sequencing of mRNA，mRNA 实现部分是通过调节SERPINA1表达而实现的。
⁃seq）以寻找差异表达基因。差异基因结果分析表
3 讨 论
明，在敲减 LINC01197 后，5 个基因表达上调，95 个
基 因 表 达 下 调 。 qPCR 实 验 验 证 了 在 敲 减 越来越多的实验表明，lncRNA在恶性肿瘤的发
LINC01197 后，SERPINA1、APOA2、IGF2 的表达水 生发展发挥了很多作用，然而造成它们在肿瘤细胞
平明显下降，其中 SERPINA1 最为明显（图 4B）。蛋 中异常表达的靶标和通路机制还未完全阐明 ［11-14］ 。

白免疫印迹实验也证明了在 SGC⁃7901 和 BGC⁃823 本研究发现，LINC01197在胃癌细胞中呈高表达，且
两个细胞系中，敲减 LINC01197 后会降低 SERPI⁃ 与胃癌的不良预后正相关。体外和体内实验均证
NA1 蛋 白 的 表 达（图 4C）。 这 些 结 果 表 明 ， 实，敲减 LINC01197 基因后，胃癌细胞的增殖、侵袭