Page 89 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第7期 朱 友，董洪权，李梦羽，等. 稳定脑肥大细胞减轻脂多糖诱导的肝脏炎症［J］.
2021年7月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（07）：1015-1020 ·1019 ·

A B 4 ** 6 ** 8
cro+LPS 24 h
LPS 30 min cro+LPS 30 min （ fold of Ctrl） 3 6 ** **
LPS 24 h
Ctr 2 （ fold of Ctrl） 4 ** （ fold of Ctrl） 4
NF⁃κB 65 kDa 1 ** *# △△ *## △△ 2 **##
NF⁃κB p⁃Akt 2 p⁃p38 △△
Laminin B 64 kDa 0 0 0
LPS 24 h
cro+LPS 30 min
LPS 24 h
LPS 30 min cro+LPS 24 h LPS 30 min cro+LPS 24 h LPS 30 min cro+LPS 24 h
LPS 24 h
cro+LPS 30 min
cro+LPS 30 min
p⁃AKT 60 kDa Ctr Ctr Ctr
AKT 60 kDa
p⁃p38 43 kDa 10 ** 10
p38 38 kDa （ fold of Ctrl） 8 （ fold of Ctrl） 8 **
p⁃JNK 54 kDa 6 6
46 kDa 4 **
JNK 54 kDa 2 ## *△△ p⁃ERK 4 2 ## △△
46 kDa p⁃JNK
44 kDa 0 0
p⁃ERK
LPS 24 h
LPS 24 h
42 kDa Ctr Ctr
44 kDa LPS 30 min cro+LPS 24 h LPS 30 min cro+LPS 24 h
ERK 42 kDa cro+LPS 30 min cro+LPS 30 min
GAPDH 36 kDa
A：蛋白免疫印迹法检测大鼠肝脏中p⁃AKT、p⁃JNK、p⁃p38、p⁃ERK和NF⁃κB水平；B：将p⁃AKT、p⁃JNK、p⁃p38、p⁃ERK和NF⁃κB水平用各自的
*
总 AKT、JNK、p38、ERK 或层黏连蛋白 B（Laminin B）水平进行标准化，然后将每个值相对于设置为 1 的对照组进行统计；与对照组比较，P <
0.05，P < 0.01；与LPS 30 min组比较，P < 0.05，P < 0.01；与LPS 24 h组比较， P < 0.01。
**
##
#
△△
图4 色甘酸钠抑制LPS诱导的MAPK信号通路和NF⁃κB活化
Figure 4 Cromolyn inhibits LPS induced MAPK signaling pathway and NF⁃κB activation
大量研究证实LPS可以诱导下丘脑和垂体激素
3 讨 论
发生代谢改变 ［17-18］ 。但是恢复下丘脑和垂体激素水
非 酒 精 性 脂 肪 肝（nonalcoholic fatty liver dis⁃ 平是否能缓解LPS诱导的肝脏炎症尚不清楚。甲状
ease，NAFLD）疾病谱包括单纯性脂肪肝、非酒精性 腺激素的释放受HPT轴的严密监督，甲状腺激素与
脂肪性肝炎、肝硬化及肝癌，已成为严重威胁人类 炎症之间的相互联系 ［19］ ，尽管已广为人知，但尚未
健康的全球性疾病，是美国肝移植的第一大原因， 得到充分研究。本实验发现在LPS引起的肝脏炎症
现也超越病毒性肝炎成为我国慢性肝损伤的第一 过程中，血清和下丘脑中TSH和T3激素水平显著下
大原因。LPS 作为细菌代谢的主要产物，通过肠肝 降而T4水平显著升高，这表明LPS诱导了脑神经递
循环经门静脉进入肝脏，导致 TNF⁃α和 IL⁃6 等炎症 质改变和 HPT 轴的激活。富含肥大细胞的下丘脑
因子生成增加，进而引起肝细胞损伤、变性、凋亡， 区是HPT轴的核心区域。本研究还发现，下丘脑内
参与 NAFLD 的发生发展 ［13-15］ 。本研究也证实了腹 给予肥大细胞稳定剂色甘酸钠可以恢复LPS诱导的
腔注射 LPS 可以引起肝脏炎症，以及血清和肝脏组 激素水平改变，并抑制 LPS 诱导的肝脏炎症。说明
织中炎性因子水平的增高。 中枢神经系统中肥大细胞对肝脏炎症的调节作用
我们前期研究发现，腹腔注射 LPS 可以诱导大 可能是通过HPT轴实现的。
鼠下丘脑的肥大细胞激活，而肥大细胞稳定剂可以 NF⁃κB信号通路参与了炎症反应 。一旦激活，
［20］
［21］
抑制这种激活 ［16］ 。在本研究中我们也发现下丘脑 NF⁃κB进入细胞核，调节炎性细胞因子的表达 。本
定位给予肥大细胞稳定剂色甘酸钠可以抑制LPS引 研究发现，色甘酸钠抑制 LPS 诱导的肝脏 NF⁃κB 激
起的外周血和肝脏中炎性因子水平的上升。由于 活。AKT和MAPK通路也参与了LPS诱导的炎症反
血脑屏障的存在，脑定位给予的色甘酸钠无法影响 应，我们进一步评估了色甘酸钠对AKT和MAPK 信
到肝脏中的肥大细胞，因此色甘酸钠肝脏炎症的这 号通路的影响，发现色甘酸钠抑制了 LPS 诱导的肝
种抑制作用，来自于稳定脑内肥大细胞。我们还发 脏中 AKT 和 MAPK 的激活。这进一步说明中枢神
现色甘酸钠作用30 min和24 h均可以抑制LPS引起 经系统肥大细胞在调节肝脏炎症促炎因子信号通
的炎性因子生成，说明脑内肥大细胞对于肝脏炎症 路中发挥作用，是否涉及其他促炎因子及信号通
的作用是快速且持续的。本研究结果表明，脑内肥 路，尚待后续的实验深入研究。
大细胞在调节肝脏炎症中发挥了作用。 综上所述，本研究表明脂多糖可引起肝脏炎