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第41卷第8期         姚   雪,刘   烁,俞宛君,等. 二甲双胍对IFN⁃γ诱导的人卵巢颗粒细胞损伤的保护作用[J].
                  2021年8月                    南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(08):1135-1140                      ·1137 ·


                统计分析,实验结果来自至少3次重复实验,计量资                           2.2  Met可改善IFN⁃γ对KGN细胞生长状态的影响
                料用均数±标准差(x ± s)表示,多组比较采用方差分                           显微镜下观察各处理细胞的生长状态(图 2),
                析,两两比较采用SNK法,P < 0.05 为差异有统计学                     可见IFN⁃γ作用48 h后可使细胞增殖的速度和密度
                意义。                                               明显降低,且部分细胞皱缩、变圆。Met单独处理对
                                                                  KGN细胞的增殖效应无明显影响;但Met与IFN⁃γ共
                2  结 果
                                                                  同作用则在一定程度上改善了被IFN⁃γ抑制的细胞
                2.1  Met可提高IFN⁃γ诱导损伤的KGN细胞活力                      增殖。
                    CCK⁃8结果(图1)显示,与对照组相比,各处理                      2.3 Met可减轻IFN⁃γ对KGN细胞凋亡的损伤
                组细胞在培养 24 h 及 72 h 后,除 IFN⁃γ处理组细胞                     各处理组对KGN细胞处理48 h后,流式分析结
                活力受到抑制(P < 0.05)外,其他组未见明显变化。                      果显示,对照组与 Met 处理组的细胞凋亡比例统计
                而培养48 h后,IFN⁃γ处理组细胞活力受到明显抑制                       分析无显著差异(P > 0.05)。而IFN⁃γ处理后,细胞
               (P < 0.01,图 1);低、中、高浓度的 Met 单独处理对                  凋亡比例与对照组相比差异明显(P < 0.01)。同时,
                KGN 活力均无明显影响,但Met与IFN⁃γ共同作用可                      Met+IFN⁃γ处理组细胞凋亡比例与单独 IFN⁃γ处理
                减缓IFN⁃γ对 KGN 细胞活力的抑制。其中,以中浓                       组相比明显降低(P < 0.05,图 3)。以上结果表明,
                度 Met 处理组(10 μmol/L)的缓解效应最为明显                     Met可减轻IFN⁃γ对KGN 细胞凋亡的损伤。
               (P < 0.01,图 1),故后续试验均采用此药物浓度和                      2.4 Met可缓解IFN⁃γ对KGN的细胞周期阻滞
                处理时间。                                                 流式分析时,先对 KGN 细胞设门,去除细胞碎

                    1.5                                           1.5
                                                    对照组                                           对照组
                                                    Met(低浓度)                                      IFN⁃γ
                                                    Met(中浓度)                             *    一一一一
                                                                                                  Met(低)+IFN⁃γ
                   nm )  1.0                        Met(高浓度)     nm )  1.0  *   ** △ △△ △     一一一一
                                                                                                  Met(中)+IFN⁃γ
                                                                                                一一一一
                                                                                                  Met(高)+IFN⁃γ
                                                                                    一一一一
                   ( 450                                         ( 450     一一一一     一一一一      一一一一
                                                                                                一一一一
                                                                                              一一一一
                                                                           一一一一
                   D
                                                                 D
                    0.5
                                                                  0.5
                                                                           一一一一     一一一一      一一一一
                                                                           一一一一     一一一一      一一一一
                                                                           一一一一     一一一一      一一一一
                      0                                            0                一一一一      一一一一
                           24 h     48 h    72 h                        24 h  一一一一 48 h   72 h
                                                                                    一一一一      一一一一
                                   与Contorl组比较,P < 0.05,P < 0.01;与IFN⁃γ组比较,P < 0.05, P < 0.01,(n=3)。
                                                                                △△
                                                                         △
                                                *
                                                      **
                                            图1 CCK⁃8检测不同处理对KGN细胞活力的影响
                              Figure 1 The effects of different treatments on KGN cells viability detected by CCK⁃8
                           对照组                     Met组                   IFN⁃γ组                Met+IFN⁃γ组
                 h
                 0






                 h
                 48




                                            图2   不同处理对KGN细胞生长状态的影响(×40)
                                  Figure 2  The effects of different treatments on the growth of KGN cells(×40)
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