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第41卷第8期 姚 雪,刘 烁,俞宛君,等. 二甲双胍对IFN⁃γ诱导的人卵巢颗粒细胞损伤的保护作用[J].
2021年8月 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(08):1135-1140 ·1137 ·
统计分析,实验结果来自至少3次重复实验,计量资 2.2 Met可改善IFN⁃γ对KGN细胞生长状态的影响
料用均数±标准差(x ± s)表示,多组比较采用方差分 显微镜下观察各处理细胞的生长状态(图 2),
析,两两比较采用SNK法,P < 0.05 为差异有统计学 可见IFN⁃γ作用48 h后可使细胞增殖的速度和密度
意义。 明显降低,且部分细胞皱缩、变圆。Met单独处理对
KGN细胞的增殖效应无明显影响;但Met与IFN⁃γ共
2 结 果
同作用则在一定程度上改善了被IFN⁃γ抑制的细胞
2.1 Met可提高IFN⁃γ诱导损伤的KGN细胞活力 增殖。
CCK⁃8结果(图1)显示,与对照组相比,各处理 2.3 Met可减轻IFN⁃γ对KGN细胞凋亡的损伤
组细胞在培养 24 h 及 72 h 后,除 IFN⁃γ处理组细胞 各处理组对KGN细胞处理48 h后,流式分析结
活力受到抑制(P < 0.05)外,其他组未见明显变化。 果显示,对照组与 Met 处理组的细胞凋亡比例统计
而培养48 h后,IFN⁃γ处理组细胞活力受到明显抑制 分析无显著差异(P > 0.05)。而IFN⁃γ处理后,细胞
(P < 0.01,图 1);低、中、高浓度的 Met 单独处理对 凋亡比例与对照组相比差异明显(P < 0.01)。同时,
KGN 活力均无明显影响,但Met与IFN⁃γ共同作用可 Met+IFN⁃γ处理组细胞凋亡比例与单独 IFN⁃γ处理
减缓IFN⁃γ对 KGN 细胞活力的抑制。其中,以中浓 组相比明显降低(P < 0.05,图 3)。以上结果表明,
度 Met 处理组(10 μmol/L)的缓解效应最为明显 Met可减轻IFN⁃γ对KGN 细胞凋亡的损伤。
(P < 0.01,图 1),故后续试验均采用此药物浓度和 2.4 Met可缓解IFN⁃γ对KGN的细胞周期阻滞
处理时间。 流式分析时,先对 KGN 细胞设门,去除细胞碎
1.5 1.5
对照组 对照组
Met(低浓度) IFN⁃γ
Met(中浓度) * 一一一一
Met(低)+IFN⁃γ
nm ) 1.0 Met(高浓度) nm ) 1.0 * ** △ △△ △ 一一一一
Met(中)+IFN⁃γ
一一一一
Met(高)+IFN⁃γ
一一一一
( 450 ( 450 一一一一 一一一一 一一一一
一一一一
一一一一
一一一一
D
D
0.5
0.5
一一一一 一一一一 一一一一
一一一一 一一一一 一一一一
一一一一 一一一一 一一一一
0 0 一一一一 一一一一
24 h 48 h 72 h 24 h 一一一一 48 h 72 h
一一一一 一一一一
与Contorl组比较,P < 0.05,P < 0.01;与IFN⁃γ组比较,P < 0.05, P < 0.01,(n=3)。
△△
△
*
**
图1 CCK⁃8检测不同处理对KGN细胞活力的影响
Figure 1 The effects of different treatments on KGN cells viability detected by CCK⁃8
对照组 Met组 IFN⁃γ组 Met+IFN⁃γ组
h
0
h
48
图2 不同处理对KGN细胞生长状态的影响(×40)
Figure 2 The effects of different treatments on the growth of KGN cells(×40)