Page 36 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第8期
·1138 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年8月

片；再对细胞周期分析的单细胞群体设门，去除黏 （12.137 ± 1.586）下 降（P < 0.05），G2 ⁃ M 期 比 例
连细胞，继而分析单细胞中处于各细胞周期的细胞 （11.276±1.398）也稍有下降但无统计学意义（P >
比例。结果显示（图4），与对照组G0⁃G1期（54.432± 0.05）；而与IFN⁃γ处理组相比，Met+IFN⁃γ处理组G0⁃
2.526）、S 期（31.732 ± 1.965）、G2 ⁃ M 期（13.637 ± G1 期细胞比例（71.152±1.861）下降，且 S 期比例
1.816）相比，Met处理组的各周期细胞比例均无明显 （19.572±1.615）升高，二者结果间的差异均具有统计
变化；而与对照组相比，IFN⁃γ处理组 G0⁃G1 期细胞 学意义（P < 0.05）。以上结果提示Met可缓解IFN⁃γ
比例（76.673±2.432）明显增加（P < 0.01），S 期比例 对KGN细胞由G0⁃G1期进入的S期阻滞效应。

对照组 Met组
Q1 Q2 Q1 Q2
0.23 3.60 0.24 5.62

（ % ） 30 *
Q4 Q3 Q4 Q3
细胞凋亡率
93.0 3.13 91.6 2.51 20 △
IFN⁃γ组 Met+IFN⁃γ组 10
Q1 Q2 Q1 Q2
0
1.74 21.4 0.69 9.61
Met+IFN⁃γ组
对照组 Met组 IFN⁃γ组

7⁃AAD Q4 4.33 Q4 2.70
Q3
Q3
72.6
87.0
Annexin V
与对照组比较，P < 0.01；与IFN⁃γ组比较，P < 0.05（n=3）。
△
*
图3 流式检测不同处理对KGN细胞凋亡的影响
Figure 3 The effects of different treatments on KGN cells apoptosis detected by flow cytometry
2.5 Met对细胞周期的调控与CDKN1A下调有关 治疗 ［10-11］ 。前期研究结果发现，PCOS患者外周血中
利用q⁃PCR法检测各处理组CDKN1A mRNA的 IFN⁃γ的含量较健康人明显增多，且IFN⁃γ体外作用
表达，结果显示，IFN⁃γ处理可使KGN细胞的CDKN1A 于人卵巢颗粒细胞 KGN 可明显抑制其增殖并促进
的 mRNA 表达上调约 5 倍，说明 IFN⁃γ诱导的 KGN 凋亡；表明炎症因子IFN⁃γ可能是PCOS中导致KGN
G0⁃G1 期阻滞可能与 CDKN1A 异常上调有关。当 细胞功能损伤的重要因素之一 。
［4］
用 Met 处理后，Met 可在一定程度上降低 IFN⁃γ对 Met是一种常规降糖药，可作为胰岛素增敏剂，
CDKN1A 的诱导表达（P < 0.05，图 5）。此结果提 降低高胰岛素血症并抑制女性卵巢中过多雄激素
示，Met 可能是通过下调 IFN⁃γ诱导的 CDKN1A 异 的产生 ［12］ 。此外，在 PCOS 大鼠模型中，Met 已被证
常表达，从而减轻了 IFN⁃γ引起的 KGN 细胞 G0⁃ 明可抑制卵泡膜细胞增殖、减少小卵泡和囊肿的数
G1 周期阻滞。 量，进而提高排卵率 ［13］ 。最近有研究发现 Met 可通
过有机阳离子转运蛋白 OCTs 诱导大鼠卵巢细胞
3 讨 论
AMPK 磷酸化并减少血管内皮生长因子VEGF 的产
PCOS 是一种与异常卵泡增生相关的内分泌紊 生 。本实验的研究结果显示Met单独作用对KGN
［8］
乱疾病，GC的增殖受抑被认为是异常卵泡成熟的关 细胞增殖、凋亡等功能无明显影响，原因可能是本
［9］
键因素 。既往研究表明，IFN⁃γ是卵泡闭锁的重要 实验使用的 Met 的浓度较低，也可能是实验细胞株
生理性调节因子，在卵泡发育早期未分化颗粒细胞 与其他研究来源不同。但本研究发现 Met 与 IFN⁃γ
Fas受体表达以及随后的凋亡反应中发挥了关键作 共同作用可提高损伤的KGN的细胞活力，缓解IFN⁃γ
［3］
用 。此外，基于其细胞抑制、抗增殖和促凋亡效 引起的细胞凋亡及 G0⁃G1 周期阻滞，提示 Met 可减
应，IFN⁃γ被认为可应用于多种类型癌症的辅助免疫 轻IFN⁃γ诱导的KGN 细胞功能损伤。但Met 能否改