Page 52 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第9期
·1318 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年9月

Control组 显著降低关节软骨退变评分和蛋白聚糖损失评分
MIA模型组
MIA+Nic（0.5 mg/kg）组 （P < 0.05，图2B、C）。软骨细胞再次清晰可辨，排列
MIA+Nic（1.0 mg/kg）组
（ g ） 1.4 一一一一 一一一一 # * # # 规整、致密，近似水平排列，软骨潮线结构恢复存
MIA+Nic（1.0 mg/kg）+MLA组
机械缩足反射潜伏期阈值 0.8 一一一一 * # △ * * # △ * * * # △ * 细胞发生凋亡，MIA组软骨细胞凋亡率明显增高，达
一一一一
1.2
在。TUNEL 荧光染色显示 MIA 可诱发膝关节软骨
1.0
一一一一
到（31.83 ± 3.89）%，是对照组的6.58倍（P < 0.05，图
0.6
一一一一
2A）。1.0 mg/kg Nic 可显著降低软骨细胞凋亡率
0.4
一一一一
*
0.2
一一一一
一一一一 一一一一 一一一一
0.0
一一一一
2周
基线 一一一一 一一一一 一一一一 一一一一 （P < 0.05，图 2D），这一结果表明 Nic 对 MIA 诱导的
3周
1周
关节软骨退变及细胞凋亡具有保护作用，而α7⁃
一一一一 一一一一 一一一一
与对照组比较，P < 0.01；与 MIA 模型组比较，P < 0.01；与 nAChR 选择性拮抗剂 MLA 可抵消 Nic 对软骨细胞
#
*
MIA+Nic（1.0 mg /kg）组比较，P < 0.01（n=8）。 凋亡的保护作用，使得软骨细胞凋亡率重新升高至
△
图 1 Nic 对 MIA 模型小鼠 Von Frey 纤维丝实验中疼痛行 （31.67 ± 5.35）%。
为的影响 Nic对MIA诱导的软骨细胞凋亡相关蛋白表达
Figure 1 Effects of Nic treatment on pain behavior in 2.3
mice subjected to MIA injection 的影响
Western blot 实验结果显示，MIA 造模小鼠关节
关节软骨浅表层纤维化，表面完整性破坏，结构紊乱， 软骨中Bcl⁃2的蛋白表达显著下调，同时Bax蛋白的
裂隙深，可见放射带，软骨细胞明显减少，潮线破坏。 表达上调，cleaved caspase⁃9 表达增加。而 Nic 治疗
MIA组关节软骨退变评分和蛋白聚糖损失评分分别 组 Bcl⁃2 的蛋白表达上调，Bax 蛋白表达和 cleaved
为（5.33 ± 1.19）分和（2.33 ± 0.27）分，1 mg/kg Nic 可 caspase⁃9/caspase⁃9 的比率降低，α7⁃nAChR 特异性
A Control组 MIA模型组 MIA+Nic（0.5 mg/kg）组 MIA+Nic（1.0 mg/kg）组 MIA+Nic（1.0 mg/kg）+MLA组
甲苯胺蓝染色 （ ×100 ）

番红固绿染色 （ ×100 ）

TUNEL染色 （ ×100 ）

B C D **
6 5 ** △△ 3.0 * *△ 40 ** ** △△
关节软骨退变评分 4 3 2 * 蛋白聚糖损失评分 2.0 * ## （% ） 凋亡率 30 **
**
35
2.5
#
25
20
##
1.5
15
10
0 1 ## 1.0 5 0
0.0
MIA（0.1 mg）- + + + + MIA（0.1 mg） - + + + + MIA（0.1 mg） - + + + +
Nic（0.5 mg/kg）- - + - - Nic（0.5 mg/kg） - - + - - Nic（0.5 mg/kg） - - + - -
Nic（1.0 mg/kg）- - - + + Nic（1.0 mg/kg） - - - + + Nic（1.0 mg/kg） - - - + +
MLA（1.0 mg/kg）- - - - + MLA（1.0 mg/kg） - - - - + MLA（1.0 mg/kg） - - - - +
A：甲苯胺蓝染色、番红固绿染色、TUNEL染色结果；B：关节退变评分分析；C：蛋白聚糖损失评分分析；D：TUNEL阳性细胞百分比的定量分
析。与对照组比较，P < 0.05，P < 0.01；与MIA模型组比较，P < 0.05，P < 0.01；与MIA+Nic（1.0 mg/kg）组比较，P < 0.05， P < 0.01（n=8）。
*
△△
**
##
△
#
图2 Nic对MIA模型小鼠膝关节退化及软骨细胞凋亡的影响
Figure 2 Effects of Nic on knee joint degradation and apoptosis in mice subjected to MIA injection