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第41卷第9期 章海军，黄嘉琛，钱考亮，等. α7⁃nAChR通过抑制软骨细胞凋亡延缓小鼠膝骨关节炎关节软骨退变［J］.
2021年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（09）：1315-1321 ·1319 ·

拮抗剂MLA可抵消Nic对MIA诱导的软骨细胞凋亡 cleaved caspase⁃9增加，启动caspase 级联，进而导致
相关蛋白表达的影响（图3）。考虑到caspase⁃9是半 凋亡。因此Nic对MIA诱导的软骨细胞凋亡的影响
胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族的重要成员。受到凋 可能与线粒体途径相关 ［15-16］ 。
亡刺激时，线粒体释放的细胞色素 C 会结合 procas⁃
3 讨 论
pase⁃9/凋亡酶激活因子⁃1（Apaf⁃1）。Apaf⁃1 介导的
caspase⁃9 激活涉及固有蛋白酶解加工，可导致 越来越多的研究发现胆碱能抗炎通路在免疫

A MIA（0.1 mg） - + + + + B
Nic（0.5 mg/kg） - - + - - 140
Nic（1.0 mg/kg） - - - + + 120 # #
MLA（1.0 mg/kg） - - - - + 100
Bcl⁃2 26 kDa 80 * *△
Bax 23 kDa Bcl⁃2/β⁃actin （ % of control） 60
cleaved caspase⁃9 39 kDa 40
20
caspase⁃9 49 kDa 0
MIA（0.1 mg）- + + + +
β⁃actin 43 kDa Nic（0.5 mg/kg）- - + - -
Nic（1.0 mg/kg）- - - + +
MLA（1.0 mg/kg）- - - - +
C D
160 250
* # *△ （ % of control） 200 * # *△
140
Bax/β⁃actin （ % of control） 100 Cleaved caspase⁃9/ 150
120
80
100
60
40
20
0 caspase⁃9 50 0
MIA（0.1 mg） - + + + + MIA（0.1 mg） - + + + +
Nic（0.5 mg/kg） - - + - - Nic（0.5 mg/kg） - - + - -
Nic（1.0 mg/kg） - - - + + Nic（1.0 mg/kg） - - - + +
MLA（1.0 mg/kg） - - - - + MLA（1.0 mg/kg） - - - - +
A：Western blot实验结果；B：各组Bcl⁃2蛋白相对表达量的比较；C：各组Bax蛋白相对表达量的比较；D：各组cleaved caspase⁃9/caspase⁃9蛋
白相对表达量的比较。与对照组比较，P < 0.01；与MIA模型组比较，P < 0.01；与MIA+Nic（1.0 mg/kg）组比较，P < 0.01（n=4）。
△
#
*
图3 Nic对MIA模型小鼠膝关节软骨凋亡相关蛋白表达的影响
Figure 3 Effects of Nic on the expression of apoptosis⁃related proteins in mice subjected to MIA injection
系统中发挥重要作用，感染或损伤的分子产物激活 接近，α7⁃nAChR在OA动物模型中的作用机制仍不
感觉神经元到达迷走神经脑干部，诱发从脑干到脾 清楚。
脏或其他器官的动作电位，最终导致 T 细胞释放乙 OA 的主要病理变化是软骨退变，软骨细胞合
酰胆碱，后者与α7⁃nAChRs结合可抑制巨噬细胞中细 成代谢与分解代谢的动态平衡有助于维持软骨细
胞因子的释放 。α7⁃nAChR是近年来多种炎性疾病 胞外基质结构和功能完整，因此软骨细胞功能是调
［17］
的研究热点，是胆碱能抗炎通路中的关键分子 ［18］ 。 控细胞外基质稳定的关键因素之一。越来越多的
Van Maanen 等 ［19］ 发现在α7⁃nAChR 敲除小鼠中，胶 研究发现：软骨细胞凋亡与 OA 的发生发展密切相
原诱导的关节炎严重程度显著增加，滑膜炎症和关 关，寻找软骨细胞凋亡调控的新靶点正成为 OA 研
节破坏也明显增多。Li等 ［20］ 研究进一步发现Nic干 究的热点问题 ［22］ 。本实验室前期研究发现，Nic 通
预可明显缓解胶原诱导的关节炎动物模型相关临 过激活α7⁃nAChR 调控细胞外调节蛋白激酶 1/2
床和组织病理学变化，减少滑膜中 CD11b 阳性巨 （ERK1/2）和 p38 丝裂原活化蛋白激酶抑制脂多糖
噬细胞的数量，下调血清中巨噬细胞炎性蛋白和 诱导的脑星形胶质细胞的活化 ［16］ 。Que 等 ［23］ 发现
单核细胞趋化蛋白的表达水平，而迷走神经切除 FK506在体外能抑制成纤维细胞的增殖并诱导其凋
则加重了关节炎程度，上调单核细胞趋化蛋白的 亡，而ERK1/2抑制剂PD98059可以抑制FK506诱导
表达水平 ［20-21］ 。以上研究证实α7⁃nAChR 在胶原诱 的成纤维细胞凋亡。Zhou等 ［24］ 发现p38在骨髓增生
导的关节炎模型的发生与发展中发挥重要作用，胶 异常综合征的骨髓中过度活化，并诱导造血干细胞
原诱导的关节炎模型的病理特点与类风湿关节炎 凋亡，在分子水平抑制 p38 MAPK 通路可以减少干