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第42卷第1期
· 12 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年1月

表2 RREB1⁃siRNA干扰对TGF⁃β1诱导的系膜细胞周期的影响
Table 2 Effects of RREB1⁃siRNA interference on cycle of TGF⁃β1⁃mediated mesangial cells
（%，x ± s，n=6）
组 别 G1 G2 S
空白对照组 79.32 ± 1.17 6.53 ± 0.78 13.95 ± 1.12
RREB1⁃siRNA组 78.91 ± 2.17 5.86 ± 1.43 15.36 ± 3.40
NC组 79.44 ± 1.64 4.70 ± 1.17 15.86 ± 1.86
TGF⁃β1组 69.96 ± 3.26 * 8.97 ± 1.28 * 21.25 ± 1.90 *
TGF⁃β1+RREB1⁃siRNA组 74.61 ± 2.26 # 7.46 ± 2.06 # 17.94 ± 2.36 #
TGF⁃β1+NC组 71.54 ± 1.62 8.07 ± 1.14 20.39 ± 2.18
与对照组比较，P < 0.05；与TGF⁃β1组比较，P < 0.01。
#
*
的病理改变之一。但HSPN肾小球系膜细胞增生的 关键伴侣，提供 Ras 和 TGF⁃β1 途径之间的分子联
病理生理机制尚未完全阐明。TGF⁃β1 是一种多功 系，从而协同诱导发育性和纤维化 EMT ［14］ 。既往
能的细胞因子，能够调节细胞增殖、分化、胚胎发育 研究表明 RREB1 是 2 型糖尿病相关终末期肾病的
及凋亡，在促进肾小球病变发生、发展过程中起重 新候选基因，且与肾小球滤过率相关，提示 RREB1
［5］
要作用 。TGF⁃β1可调节肾小球固有细胞增殖、促 在肾脏损伤中发挥重要作用 ［15］ 。RREB1 还可诱
进细胞外基质（extracellular matrix，ECM）合成分泌 导以及抑制许多基因的转录，有研究表明可诱导
和沉积，是体内外诱导肾小球系膜细胞活化最强有 P53 ［16］ 、抑制 P16 ［17］ ，而这些细胞周期调控关键基因
力的细胞因子 。目前已经被广泛应用在体外系膜 的异常表达均参与了系膜细胞的异常增殖。但尚
［6］
细胞增殖模型的建立中。 未有研究证实 RREB1 与肾小球系膜细胞增殖之间
PCNA 即增殖细胞核抗原，是反映细胞增殖活 的相关性。
性的重要指标，与细胞周期密切相关，存在于正常 实验发现在 TGF⁃β1 诱导的大鼠肾小球系膜细
增殖细胞和肿瘤细胞增殖周期的各个时期，其表达 胞增殖中，RREB1 的表达明显增加，提示 RREB1 在
［7］
水平随细胞增殖活性增加而升高 。在病理增殖情 TGF⁃β1 诱导的系膜细胞增殖中可能发挥作用。为
况下肾小球系膜细胞可以合成分泌大量α⁃SMA，α⁃ 了探讨RREB1是否参与了TGF⁃β1诱导的系膜细胞
SMA可以进一步刺激系膜细胞增殖，促进肾脏纤维 增殖，我们使用 siRNA 干扰技术，发现 RREB1⁃siR⁃
化 。本研究检测了 PCNA 及α⁃SMA 的表达情况， NA干扰后，TGF⁃β1诱导的系膜细胞增殖受到抑制，
［8］
TGF⁃β1 干预后的系膜细胞上述两种蛋白表达明显 增殖相关基因PCNA表达下调，α⁃SMA表达下调，细
升高，表明TGF⁃β1可引起系膜细胞病理性增殖。 胞增殖活力下降，并将细胞周期阻滞于 G1 期，提示
在 前 期 研 究 中 ，我 们 发 现 HSPN 患 儿 存 在 RREB1 这一 ras 反应元件结合蛋白对肾小球系膜
1 条 差 异 表 达 的 多 肽 。 通 过 UniProt 数 据 库 分 细胞的增殖具有重大影响，但其中的具体机制还有
析 前 体 蛋 白的相关信息，发现差异表达的多肽 待阐明。报道表明 RREB1 能被 Ras 通路激活 ［18］ ，
PPLVGSSALLSGTALLRPLRPKPPLLLPKPPVTE对应 而 Ras 通路在细胞增殖起主要作用。赵非等 ［19］ 发
的前体蛋白为RREB1 。RREB1是锌指转录因子的 现 Ki⁃RasA⁃c⁃Raf⁃MEK⁃ERK 这一信号通路独立参
［9］
一员，能够与靶基因启动子上的 ras 反应元件相结 与了醛固酮诱导的系膜细胞增殖。miR⁃34a 也通
合，广泛参与细胞增殖、转录调控及 DNA 损伤修 过 PDGFR⁃β/Ras⁃MAPK 信号通路调节系膜细胞增
复等生物学过程 ［10］ ，在肿瘤、糖尿病、淋巴瘤及白血 殖 ［20］ 。本研究中 RREB1 干扰后 G1 期细胞明显增
病等疾病中均有研究 ［11］ 。在胰腺癌患者中 RREB1 多，提示RREB1干扰抑制肾小球系膜细胞增殖的机
可激活细胞中长链非编码 RNA（AGAP2⁃AS1）的 制可能与细胞周期阻滞相关。
转 录，进而调控胰腺癌细胞的增殖和迁移 ［12］ 。 综上所述，在 TGF⁃β1 诱导的系膜细胞增殖
在直肠癌细胞中，AGAP2⁃AS1 调控 Ras/MAPK 通 中 RREB1 上调，干扰 RREB1 可抑制系膜细胞增
路进而影响细胞周期与增殖 ［13］ 。在肿瘤细胞中 殖，阻滞细胞周期，有望成为 HSPN 诊治的新靶

RREB1 作为上皮⁃间质转化（epithelial⁃mesenchymal 标，但其中的确切机制并不明确，有待今后进一
transition，EMT）中 TGF⁃β1 激活的 Smad 转录因子的 步研究。