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第42卷第1期       王小平，王诺凡，陈小翔，等. 血清miR⁃23a、miR⁃27a联合CEA在结直肠癌诊断中的临床价值［J］.
                  2022年1月                     南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（01）：058-062                       · 59  ·


                serum of CRC patients is closely related to the T stage，lymph node metastasis and distant metastasis of CRC patients. The combination
                of miR⁃23a，miR⁃27a and CEA could significantly improve the diagnosis efficiency of CRC.
               ［Key words］ colorectal cancer；miR⁃23a；miR⁃27a；CEA；diagnostic value
                                                                              ［J Nanjing Med Univ，2022，42（01）：058⁃062］





                    结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是全球最常见             1.2  方法
                的癌症之一，每年约有120万CRC新病例及60.87万                       1.2.1 血清miRNA的检测
                               ［1］
                例 CRC 患者死亡 。在美国，Ⅰ期 CRC 患者的 5 年                        所有血液样本获得后以 1 500 r/min 的速度离
                生存率约为93.2%，而Ⅳ期患者仅为8.1％ 。 因此，                      心 10 min，移 液 器 收 集 上 清 ，- 80 ℃ 保 存 备 用 。
                                                    ［2］
                CRC 的早期诊断对于提高总体生存率非常必要。                           TRIzol LS（Invitrogen 公司，美国）试剂提取血清样本
                尽管 X 线钡灌肠以及肠镜检查对 CRC 的早期发现                        中的总RNA，通过上海吉玛制药技术有限公司提供
                有一定临床价值，但由于其成本较高及有创性，无                            的 Hairpin⁃it TM  microRNA and U6 snRNA normaliza⁃
                法广泛用于普查       ［3-4］ 。此外，目前使用的临床肿瘤标                tion RT⁃PCR quantitation kit 检测血清中miRNA的表
                志物，例如癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）           达水平，以U6为内参，以2          -ΔΔCT 计算血清中miRNA的
                                                       ［5］
                对于 CRC 的早期诊断缺乏灵敏度和特异性 。因                          相对表达量。
                此寻求有效的高灵敏度及特异度的新型非侵入性                             1.2.2 血清CEA的检测
                生物标志物对于 CRC 的早期筛查具有重要的临床                              通过化学发光法检测研究对象外周血标本分
                意义。                                               离后的血清CEA的水平。
                    近年来，循环miRNA作为恶性肿瘤诊断的生物                        1.3  统计学方法
                学标志物受到越来越多的关注。miRNA 是短的单                              采用SPSS22.0软件进行统计学分析。计量资料
                链非编码RNA（约22个核苷酸），可以通过结合靶基                         符合正态分布，以均数±标准差（x ± s）表示。 多组
                因 mRNA 的 3′UTR 诱导 mRNA 降解或翻译抑制，从                  间比较采用方差分析。对照组和CRC组血清中miR
                                ［6］
                而发挥生物学功能 。肿瘤细胞来源的循环miRNA                          ⁃23a及miR⁃27a的表达水平采用独立样本t检验。计
                稳定存在于外周血中，它们不仅可以包装成一些颗                            数资料采用率表示，率的比较采用卡方检验；采用
                粒，如凋亡小体、外泌体，还可以与蛋白质复合物结                           Logistic 回归分析 CRC 发生的影响因素，血清 miR⁃
                合，赋予它们抵抗内源性核糖核酸酶活性、极端 pH                          23a、miR⁃27a及CEA对CRC的诊断效能分析使用受试
                值及高温的能力       ［7-9］ 。                             者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，
                    本研究通过 GEO 数据库（GSE25609）分析 CRC                 ROC曲线）。P < 0.05为差异具有统计学意义。
                患者血清 miR⁃23a 及 miR⁃27a 的表达水平。通过回
                                                                  2  结 果
                顾性分析 100 例 CRC 患者的临床及随访资料，检测
                CRC 患者血清miR⁃23a及miR⁃27a的表达水平，旨在                   2.1 血清miR⁃23a、miR⁃27a在CRC患者中高表达
                探讨其在CRC中的临床价值，以期为CRC临床诊断                              Vychytilova⁃Faltejskova 等 ［10］ 通过二代测序发现
                提供依据。                                             miR⁃23a 以及 miR⁃27a 可能作为 CRC 早期诊断的标
                                                                  志物。本研究通过 GEO 数据库（GSE25609）对 20 例
                1  对象和方法
                                                                  健康体检者和 30 例 CRC 患者血清进行表达水平分
                1.1  对象                                           析，发现miR⁃23a和miR⁃27a在CRC患者血清中的表
                    收集 2014 年 1 月—2018 年 12 月在南京医科大               达水平显著升高（P < 0.01，图 1），进而收集 100 例
                学附属南京医院进行治疗的100例CRC患者。同时                          CRC 患者及 100 例健康体检者血清，发现 CRC 患者
                收集 100 例健康体检者的血清作为对照组，血清                          miR⁃23a及miR⁃27a的相对表达量明显高于健康体检
                立即保存至-80 ℃。结直肠癌的诊断以病理学诊断                          者（P < 0.001，图2）。
                为金标准。所有接受过放化疗等系统治疗以及伴                             2.2 血清miR⁃23a、miR⁃27a与临床病理特征的关系
                有其他部位肿瘤的患者均被排除。本研究经医院                                 为了进一步验证血清 miR⁃23a 及 miR⁃27a 与临
                伦理委员会批准，所有受试者知情同意。                                床病理特征的关系，收集了上述CRC患者的临床病
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