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第42卷第10期 宋 洁，王 涛，程 晨，等. 达格列净治疗早期糖尿病肾病的疗效以及对调节性T细胞的
2022年10月 影响［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（10）：1409-1414 ·1411 ·

（glycated albumin，GA）、HbA1c、尿常规、肝肾功能、 表1 47例早期DKD患者的一般资料
Table 1 General information of 47 patients with early
电解质，检测 24 h 尿蛋白定量、UACR，利用 MDRD
DKD
公式计算 eGFR［eGFRMDRD=186×Scr - 1.154 ×Age - 0.203 （×
0.742 如果为女性），Scr：血肌酐（mg/dL），Age：年龄 项目 数值（n=47）
（岁）］ ，记录不良反应。 性别（男/女，n/n） 37/10
［10］
年龄（岁，x ± s） 55 ± 12
1.2.2 Treg检测
病程［年，M（P25，P75 ）］ 9（4，14）
治疗前后采集患者静脉血，利用流式细胞学技
BMI（kg/m ，x ± s） 027.74 ± 4.16
2
术检测Treg的表达量，具体步骤如下：①CD4、CD25
合并糖尿病视网膜病变［n（%）］ 18（38.30）
的抗体各取3 μL加入50 μL全血中，2~8℃避光孵育 合并高血压［n（%）］ 39（82.98）
30 min；②400 g 离心 5 min，弃去上清液，加入 Flow 单纯饮食+运动降糖［n（%）］ 06（12.77）
cytometry staining buffer 清洗细胞，离心，弃上清； 胰岛素降糖［n（%）］ 11（23.40）
③加 500 μL 固定剂，室温下避光孵育 50 min；④不 胰岛素+口服降糖药［n（%）］ 17（36.17）
需要清洗，加入 1 mL 破膜剂，室温下以 400 g 离心 口服降糖药降糖［n（%）］ 13（27.66）
FBG（mmol/L，x ± s） 008.96 ± 0.83
5 min，弃上清；⑤将细胞重悬于100 μL Flow cytometry
HbA1c（%，x ± s） 008.42 ± 1.37
staining buffer，加入稀释好的 Foxp3 抗体 2 μL，4 ℃
GA（%，x ± s） 018.47 ± 3.32
避光过夜后上机检测。所有样品均在BD Accuri C6
24 h尿蛋白定量［g/24 h，M（P25，P75 ）］ 1.14（0.29，2.08）
TM
Plus 流式细胞仪上进行分析。使用 BD CSampler UACR［mg/g，M（P25，P75 ）］ 80（45，150）
Plus 软件进行分析。检测外周血 Treg 的 eBiosci⁃ 血尿素氮（mmol/L，x ± s） 006.84 ± 2.15
ence Human Regulatory T Cell Staining Kit 购自美国 血肌酐（μmol/L，x ± s） 075.64 ± 26.34
TM
Ebioscience公司。 eGFR［mL/（min·1.73 m），x ± s］ 105.30 ± 36.01
2
1.2.3 炎症因子的检测
IL⁃1β、IL⁃6、IL⁃10 以及 TNF⁃β均采用 ELISA 方 vs.（7.42 ± 0.67）mmol/L］、GA［（18.47 ± 3.32）% vs.
法检测，按照试剂盒说明书进行操作。所有试剂盒 （15.49 ± 2.62）%］、24 h 尿 蛋 白 定 量［1.14（0.29，
均购自美国Ebioscience公司。 2.08）g/24 h vs. 0.28（0.15，0.83）g/24 h］以及 UACR
1.3 统计学方法 ［80（45，150）mg/g vs. 40（30，80）mg/g］较治疗前均
采用SPSS25.0统计软件进行数据的统计分析， 明显下降，差异有统计学意义（P < 0.05），治疗 4 周
计量资料采用均数±标准差（x ± s）表示，不符合正态 后 eGFR 较治疗前亦有所下降［（105.30 ± 36.01）
分布的计量资料以中位数（四分位数）［M（P25，P75 ）］ mL/（min·1.73 m）vs.（92.07 ± 35.26）mL/（min·1.73 m），
2
2
表示，自身前后对照采用配对 t 检验或 Wilcoxon 符 P < 0.05］，治疗 8 周后 eGFR 可恢复至治疗前水平
号 秩 检 验 ；计 数 资 料 采 用 频 率 或 百 分 比 表 示 。 ［（104.88 ± 36.86）mL/（min·1.73 m）vs.（105.30 ±
2
P < 0.05 为差异有统计学意义。 36.01）mL/（min·1.73 m），P > 0.05，表2］。
2
2.3 Treg比较
2 结 果
达格列净治疗 4 周后，与治疗前相比 T 细胞的
2.1 一般情况 标志物 CD4 的阳性率显著升高，同时 CD25 Foxp3 +
+
+
本研究共纳入患者47例，患者一般资料见表1。 的阳性率也显著升高，结果显示达格列净可显著上
2.2 临床疗效评估 调Treg的表达量［（3.19 ± 0.74）% vs.（5.64 ± 0.93）%，

达格列净治疗4周后 FBG［（8.96 ± 0.83）mmol/L P < 0.05，图1、表3］。
表2 治疗前后FBG、GA、24 h尿蛋白、UACR、eGFR指标比较
Table 2 Comparison of FBG，GA，24 h urine protein quantification，UACR，eGFR before and after treatment
时间 FBG（mmol/L） GA（%） 24 h尿蛋白定量（g/24 h） UACR（mg/g） eGFR［mL/（min·1.73 m）］
2
治疗前 8.96 ± 0.83 18.47 ± 3.32 1.14（0.29，2.08） 80（45，150） 105.30 ± 36.01
治疗4周后 7.42 ± 0.67 * 15.49 ± 2.62 * 0.28（0.15，0.83） * 40（30，80） * 92.07 ± 35.26 *
治疗8周后 — — — — 104.88 ± 36.86 **
与治疗前相比，P < 0.05；与治疗4周后比，P < 0.05，n=47。
*
**