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第42卷第11期 顾寰宇，李姗姗，王 芹，等. 血浆外泌体通过微小RNA⁃25⁃3p对心肌纤维化影响的初步研究［J］.
2022年11月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（11）：1515-1522 ·1519 ·

细胞的纤维化水平，但心肌纤维化模型组的血浆外 纤维化模型组血浆外泌体内的miR⁃25⁃3p含量明显
泌体却失去这一作用。这提示两组血浆外泌体的 高于对照组。这提示心肌纤维化模型组血浆外泌
成分有所不同，心肌纤维化模型组的外泌体内可能 体失去抗心肌纤维化的能力，可能是 miR⁃25⁃3p 含
有更多促纤维化的成分或更少的抗纤维化成分。 量增加介导的。
2.3 正常小鼠和心肌纤维化模型小鼠的血浆外泌 2.4 miR⁃25⁃3p过表达对小鼠心脏成纤维细胞纤维
体内miR⁃25⁃3p的表达差异 化水平的影响
检测正常小鼠和心肌纤维化模型小鼠的血浆 在细胞水平明确miR⁃25⁃3p对心肌纤维化的影
外泌体内miR⁃25⁃3p的水平（图3）。结果显示：心肌 响，qPCR验证miR⁃25⁃3p模拟物有效上调miR⁃25⁃3p

A B C
3 *** * * 4 *** * * 对照组 心肌纤维化
AngⅡ
α⁃SMA mRNA 相对表达量 2 1 mRNA col1α1 相对表达量 3 2 1 α⁃SMA PBS PBS 外泌体 模型组外泌体
42 kDa

0 0 GAPDH 36 kDa
PBS PBS PBS PBS
心肌纤维化
心肌纤维化
模型组外泌体
模型组外泌体
A 对照组外泌体 B 对照组外泌体 D 2.0 *** * *
1.0
AngⅡ AngⅡ α⁃SMA蛋白 相对表达量 1.5
0.5
0
对照组外泌体
心肌纤维化
PBS PBS
模型组外泌体
AngⅡ
A、B：qPCR 检测对照组小鼠和心肌纤维化模型组小鼠的血浆外泌体处理细胞后的纤维化相关指标α⁃SMA（A）和 col1α1（B）；C：Western
blot检测α⁃SMA蛋白水平；D：各组α⁃SMA蛋白的半定量分析。两组比较，P < 0.05， P < 0.001（n=4）。
*
***
图2 血浆外泌体对心脏成纤维细胞纤维化水平的影响
Figure 2 Effects of plasma exosome on cardiac fibrosis

4 3 * 响；Ang Ⅱ处理后，细胞的增殖和分化水平均增加，
miR⁃25⁃3p相对表达量 2 1 种能力（图4D~F）。
但miR⁃25⁃3p模拟物却不会进一步促进细胞的这两

miR⁃25⁃3p敲低对小鼠心脏成纤维细胞纤维化
2.5
水平的影响
qPCR 验证 miR⁃25⁃3p 抑制物可有效下调 miR⁃
0 25⁃3p 的表达量（图 5A）。miR⁃25⁃3p 抑制物分别在
对照组 心肌纤维化
外泌体 模型组外泌体 基础水平和 Ang Ⅱ刺激情况下减少心脏成纤维细
两组比较，P < 0.05（n=4）。 胞α⁃SMA 的蛋白表达量（图 5B、C）。细胞免疫荧光
*
图3 两组小鼠血浆外泌体内miR⁃25⁃3p的表达差异
Figure 3 Verification of miR⁃25⁃3p in plasma exosome of 染色结果显示：在基础水平和 Ang Ⅱ刺激情况下，
mice between two groups miR⁃25⁃3p抑制物均可阻碍心脏成纤维细胞向肌成
纤维细胞表型转化，但不影响细胞的增殖能力（图
的表达量近1 500倍（图4A）。miR⁃25⁃3p模拟物在基 5D~F）。以上结果表明血浆外泌体中的miR⁃25⁃3p可
础水平增加心脏成纤维细胞α⁃SMA 的蛋白表达水 发挥促进心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化
平，但在Ang Ⅱ刺激情况下却不能进一步增加其表 的作用。

达（图4B、C）。细胞免疫荧光染色结果显示：miR⁃25
3 讨 论
⁃3p模拟物在基础水平可促进心脏成纤维细胞向肌
成纤维细胞表型转化，但对细胞的增殖水平无影 心肌纤维化是由多种病理因素导致心脏疾病