Page 28 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第11期
·1520 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年11月

miR⁃25⁃3p相对表达量 1 000 5 4 3 GAPDH 模拟物 模拟物 模拟物 模拟物 42 kDa α⁃SMA蛋白 相对表达量 1.5 *
A 2 000 *** B 对照 miR⁃25⁃3p 对照 miR⁃25⁃3p C 2.0 ** 无AngⅡ
AngⅡ
AngⅡ刺激
1 500
α⁃SMA
1.0
36 kDa
2
1
0
对照模拟物 miR⁃25⁃3p模拟物 0.5 0
miR⁃25⁃3p模拟物
miR⁃25⁃3p模拟物
对照模拟物 对照模拟物
D AngⅡ
对照模拟物 miR⁃25⁃3p模拟物 对照模拟物 miR⁃25⁃3p模拟物

E 2.5 F *
* 无AngⅡ 1.5 * 无AngⅡ
AngⅡ刺激
AngⅡ刺激
2.0
*
α⁃SMA 相对荧光量 1.5 细胞相对增殖率 2.0
1.0
1.0
0.5
0 0.5 0
miR⁃25⁃3p模拟物
miR⁃25⁃3p模拟物
对照模拟物 对照模拟物 对照模拟物 对照模拟物
miR⁃25⁃3p模拟物
miR⁃25⁃3p模拟物
A：qPCR检测miR⁃25⁃3p模拟物的效率；B、C：Western blot检测miR⁃25⁃3p模拟物在基础水平和AngⅡ刺激下对心脏成纤维细胞α⁃SMA蛋
白表达量的影响（B）和半定量分析（C）；D：免疫荧光染色观察细胞α⁃SMA 荧光强度和细胞增殖水平（标尺：100μm）；E：各组α⁃SMA 相对荧光
量比较；F：各组细胞相对增殖率比较。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
***
**
图4 miR⁃25⁃3p模拟物对心脏成纤维细胞纤维化水平的影响
Figure 4 Effects of miR⁃25⁃3p mimic on cardiac fibrosis
发展至一定阶段所共有的病理改变，是心室重构以 生不可逆损害。
及心功能失代偿的重要病理基础之一。防治心肌 在心血管系统，外泌体能在心肌细胞、心脏成
纤维化对很多心血管疾病都至关重要，但临床尚无 纤维细胞、血管内皮细胞之间传递分子信号来参与
有效药物治愈心肌纤维化，这不但严重影响患者生 心肌细胞存活、心肌纤维化、心室重构、血管新生等
活质量，还增加国家医疗保障系统的负担 ［18］ 。因此 过程 ［19］ 。这些作用使外泌体成为心肌纤维化防治
探索新的有效干预心肌纤维化的靶点或有效诊断 的潜在新靶点。血液中的外泌体浓度较高，它们在
标志物是亟待解决的重要问题。 不同细胞和组织之间扮演信息传递者的角色。人
心肌纤维化发生时的主要事件有成纤维细胞 和大鼠的血浆外泌体在体内体外实验中都有心脏
增殖、向肌成纤维细胞分化、细胞外基质异常积聚， 保护作用 ［20］ ，而血浆外泌体是否能够抑制心肌纤维
心肌细胞外基质含量多少常被用于评估心肌纤维 化及其作用机制鲜有报道。心肌纤维化是一个复
化程度。目前临床针对心肌纤维化的药物主要有 杂的过程，例如Ⅰ型胶原纤维较粗，抗牵拉功能较
RAAS阻滞剂、β受体阻滞剂、抗炎药物、血管紧张素 强，维持心室壁强度；Ⅲ型胶原纤维则较细，有良好
受体⁃脑啡肽酶双重抑制剂 LCZ696、心脏起搏电流 伸展性，影响心肌和血管顺应性，它们在纤维化的
抑制剂伊伐布雷定等 。但这些药物只能改善疾病 不同阶段会有不同的表达量，在纤维化的不同阶段
［2］
症状，不能阻断疾病进程，心脏结构和功能依旧发 发挥不同作用 ［21］ 。同样地，本课题提取的外泌体是