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第42卷第11期 顾寰宇，李姗姗，王 芹，等. 血浆外泌体通过微小RNA⁃25⁃3p对心肌纤维化影响的初步研究［J］.
2022年11月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（11）：1515-1522 ·1521 ·

A 1.5 ** B 对照 miR⁃25⁃3p 对照 miR⁃25⁃3p C 无AngⅡ
miR⁃25⁃3p相对表达量 1.0 GAPDH 抑制物 抑制物 抑制物 抑制物 42 kDa α⁃SMA蛋白 相对表达量 2.5 * * * *
AngⅡ
AngⅡ刺激
2.0
α⁃SMA
0.5
1.5
36 kDa
1.0
0
对照抑制物 miR⁃25⁃3p抑制物
0.5
0
对照抑制物 对照抑制物
miR⁃25⁃3p抑制物
miR⁃25⁃3p抑制物
D AngⅡ
对照抑制物 miR⁃25⁃3p抑制物 对照抑制物 miR⁃25⁃3p抑制物

E F
2.5 * 无AngⅡ * 无AngⅡ
* * AngⅡ刺激 1.5 * AngⅡ刺激
2.0
α⁃SMA 相对荧光量 1.5 * 细胞相对增殖率 2.0
1.0
1.0
0.5
0 0.5 0
miR⁃25⁃3p抑制物
miR⁃25⁃3p抑制物
对照抑制物 对照抑制物 对照抑制物 对照抑制物
miR⁃25⁃3p抑制物
miR⁃25⁃3p抑制物
A：qPCR 检测 miR⁃25⁃3p 抑制物的敲低效率；B、C：Western blot 检测 miR⁃25⁃3p 抑制物在基础水平和 Ang Ⅱ刺激下对心脏成纤维细胞
α⁃SMA 蛋白表达量的影响（B）和半定量分析（C）；C：免疫荧光染色观察心脏成纤维细胞的α⁃SMA 荧光强度和增殖率（标尺：100 μm）；E：
各组α⁃SMA相对荧光量比较；F：各组细胞相对增殖率比较。两组比较，P < 0.05，P < 0.01（n=3）。
**
*
图5 miR⁃25⁃3p抑制物对心脏成纤维细胞纤维化水平的影响
Figure 5 Effect of miR⁃25⁃3p inhibitor on cardiac fibrosis
基于慢性心肌梗死模型，区别于急性心肌梗死，需进 拟物在基础水平上调成纤维细胞α⁃SMA 的蛋白表
一步在不同时间点提取血浆外泌体，分别检测以明确 达水平，但α⁃SMA表达水平在Ang Ⅱ刺激情况下却
外泌体内容物的含量是否有时间依赖性。 不能进一步增加，这可能是因为该刺激已经使细胞
本研究利用 Ang Ⅱ刺激心脏成纤维细胞建立 达到了纤维化的上限，其他处理不能再继续上调纤
细胞纤维化模型，细胞α⁃SMA 和 col1α1 的 mRNA 表 维化水平。本课题目前只初步研究了血浆外泌体
达量均升高，提示建模成功。提取的外泌体的形 内 miR⁃25⁃3p 对心肌纤维化的作用，后续需在体内
态、直径分布及标志物表达均符合外泌体的特征。 外继续表型和机制研究以验证实验结果。
发现对照组小鼠血浆外泌体有改善心肌纤维化的
综上所述，血浆外泌体可改善心肌纤维化，血浆
作用，而心肌纤维化模型组小鼠的血浆外泌体则没
外泌体内的miR⁃25⁃3p上调可促进心肌纤维化发生，
有，这说明两者外泌体的内含物种类或含量有差
提示该指标可能是心肌纤维化潜在的生物标志物，这
异。外泌体内容物的成分复杂，其中miRNA有高稳
将为探索心肌纤维化的潜在治疗靶点提供新思路。
定性和靶向性 。本课题只研究了miR⁃25⁃3p的作
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用，其在外泌体内对心肌纤维化的影响是否扮演了关 ［参考文献］
键作用还需进一步探索。本研究发现miR⁃25⁃3p模 ［1］ THANNICKAL V J，ZHOU Y，GAGGAR A，et al. Fibro⁃