Page 44 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第5期
·640 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年5月
常氧组 缺氧组 2C)显示,CDDP 处理后,缺氧条件下siYAP1组细胞
凋亡率显著高于NC组(P < 0.01)。CCK⁃8检测结果
YAP1 78 kDa
(图 2D)显示,CDDP 处理后,缺氧条件下 siYAP1 组
GAPDH 36 kDa 细胞活力显著低于NC组(P < 0.01)。
2.3 过表达 YAP1 降低缺氧条件下骨肉瘤细胞对
4
*
CDDP的敏感性
YAP1蛋白相对表达量 2 1 粒,Western blot 检测结果(图 3A)显示,YAP1 过表
在 MG⁃63 细胞中转染 pcDNA⁃3.1⁃YAP1⁃HA 质
3
达组细胞中YAP1蛋白的表达水平较空载体组显著
升高。CCK⁃8检测结果(图3B)显示,CDDP处理后,
体组(P < 0.01),而常氧条件下,两组细胞活力无显
0 缺氧条件下YAP1过表达组细胞活力显著高于空载
常氧组 缺氧组
著差异(P > 0.05)。
两组比较,P < 0.05(n=3)。
*
图1 缺氧条件下MG⁃63细胞中YAP1的表达 2.4 YAP1影响缺氧条件下STAT3磷酸化水平
Figure 1 The expression of YAP1 in MG⁃63 cells under Western blot 检测结果显示(图 4),在缺氧条件
hypoxic condition 下,与 NC 组相比,siYAP1 组 MG⁃63 细胞中 p⁃STAT3
蛋白的表达水平显著降低(P < 0.01),而总STAT3蛋
YAP1 组细胞中 YAP1 蛋白的表达水平较阴性对照 白的表达水平没有显著变化(P > 0.05)。
NC 组显著降低(P < 0.01)。流式细胞检测结果(图 2.5 STAT3影响缺氧条件下骨肉瘤细胞对CDDP的
A B
1.2 常氧 空白对照组 siYAP1组 1.5
缺氧
NC组
相对细胞活力 0.8 ** ## YAP1 78 kDa YAP1蛋白相对表达量 1.0
1.0
**
0.6
0.4
0.5
0.2
0 GAPDH 36 kDa 0 △△
对照组 CDDP组
空白对照组 NC组 siYAP1组
C D
NC组 NC+CDDP组
10 4 10 4
10 3 10 3
对照
2
2
C 10 10 D
60 对照 △△ 1.2 CDDP
( % ) 50 1.0
10 1 10 1 CDDP **
10 0 10 0 40 ** 相对细胞活力 0.8 ** △△
0.6
30
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 细胞凋亡率 20 0.4 **
siYAP1组 siYAP1+CDDP组 10 0.2
10 4 10 4
0 0
NC组 siYAP1组 NC组 siYAP1组
10 3 10 3
10 2 10 2
10 1 10 1
PI 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
AV
A:CCK⁃8检测细胞活力;B:Western blot 检测YAP1蛋白的表达;C:流式细胞术检测细胞凋亡;D:CCK⁃8检测细胞活力。与对照组比较,
P < 0.01;与常氧组比较,P < 0.01;与NC组比较, P < 0.01(n=3)。
** ## △△
图2 沉默YAP1增强缺氧条件下MG⁃63细胞对CDDP的敏感性
Figure 2 Silencing YAP1 enhances the sensitivity of MG⁃63 cells to CDDP under hypoxia