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第42卷第5期 黄煜龙，李晨露. 缺氧通过HIF⁃1α介导细胞内YAP1降低骨肉瘤细胞对CDDP的敏感性及机制［J］.
2022年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（05）：638-643 ·641 ·

A 显著低于NC组（P < 0.01）。
空载体组 YAP1过表达组
常氧组 缺氧组 常氧组 缺氧组 2.6 HIF⁃1α影响缺氧条件下YAP1的表达和骨肉瘤
YAP1⁃HA 78 kDa 细胞对CDDP的敏感性
GAPDH 36 kDa 利用 siRNA 方法抑制 MG⁃63 细胞中 HIF⁃1α表
达后，给予细胞缺氧处理。Western blot 检测结果
B
2.0
常氧 ## （图6A）显示，与NC组相比，siHIF⁃1α组细胞中HIF⁃
缺氧 **
1.5 ** 1α、YAP1 蛋 白 的 表 达 水 平 均 显 著 降 低（均 P <
相对细胞活力 1.0 后，缺氧条件下siHIF⁃1α组细胞活力显著低于NC组
0.01）。CCK⁃8 检测结果（图 6B）显示，CDDP 处理

0.5 （P < 0.01）。
3 讨 论
0
空载体组 YAP1过表达组 以铂类药物为基础的化疗是骨肉瘤的重要治
A：Western blot 检测 YAP1 蛋白的表达；B：CCK⁃8 检测细胞活 ［1-4］
疗方式，其中最常用的是 CDDP 。肿瘤细胞耐药
力。与常氧组比较，P < 0.01；与空载体组比较，P < 0.01（n=3）。 是导致部分患者治疗效果降低，引起肿瘤复发与转
##
**
图 3 过表达 YAP1 降低缺氧条件下 MG⁃63 细胞对 CDDP
移，甚至死亡的主要原因 ［1-4］ 。缺氧已被证实是引起
的敏感性
Figure 3 Overexpression of YAP1 reduces the sensitivity 骨肉瘤细胞化疗耐药的重要因素之一 ［5-7］ 。本研究
of MG⁃63 cells to CDDP under hypoxia 发现，缺氧可使骨肉瘤细胞内YAP1表达上调，缺氧
条件下用 siRNA 沉默 YAP1 后再给予 CDDP 处理，
敏感性 MG⁃63细胞活力下降，凋亡升高，这表明在缺氧条件
在 MG⁃63 细胞中用 siRNA 抑制 STAT3 表达， 下 YAP1 降低了骨肉瘤细胞对 CDDP 的敏感性。虽
Western blot 检测结果（图 5A）显示，缺氧条件下 然本研究通过体外实验首次证实了YAP1影响缺氧
siSTAT3 组细胞中 STAT3 蛋白的表达水平较 NC 组 条件下骨肉瘤细胞对 CDDP 的敏感性，但还需动物
显著降低（P < 0.01）。CCK⁃8 检测结果（图 5B）显 实验进一步验证其作用。
示，CDDP 处理后，缺氧条件下 siSTAT3 组细胞活力 既往研究证实 HIF⁃1α是缺氧条件下调控耐药
空白对照组 siYAP1组 1.5 1.2
NC组

p⁃STAT3 86 kDa p⁃STAT3 蛋白相对表达量 1.0 ** STAT3 蛋白相对表达量 0.8
STAT3 86 kDa 0.5 0.4
YAP1 78 kDa 0 0
空白对照组 NC组 siYAP1组 空白对照组 NC组 siYAP1组
GAPDH 36 kDa

与NC组比较，P < 0.01（n=3）。
**
图4 YAP1影响缺氧条件下STAT3磷酸化水平
Figure 4 Effect of YAP1 on STAT3 phosphorylation under hypoxia
空白对照组 siSTAT3组 1.2 CDDP
A 1.2 B 对照
NC组
STAT3 ** 0.8 ##
STAT3 蛋白相对表达量 0.8 1.0
86 kDa
GAPDH 36 kDa 0.4 相对细胞活力 0.6 ##
**
0.4
0 0.2
空白对照组 NC组 siSTAT3组 0 NC组 siSTAT3组

A：Western blot检测STAT3蛋白的表达；B：CCK⁃8检测细胞活力。与NC组比较，P < 0.01；与对照组比较，P < 0.01（n=3）。
##
**
图5 沉默STAT3增强缺氧条件下MG⁃63细胞对CDDP的敏感性
Figure 5 Silencing STAT3 enhances the sensitivity of MG⁃63 cells to CDDP under hypoxia