Page 60 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第6期
               ·812 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年6月


              激组 Ucp⁃1、CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/en⁃                 示冷刺激提高3种脂肪组织线粒体的功能,但仅能提
              hancer⁃binding protein β,C/EBPβ)等产热相关基因           高BAT和iWAT而非eWAT中产热基因的表达。
              和 激 素 敏 感 型 脂 肪 酶(hormone ⁃ sensitive lipase,     2.3 冷刺激后3种脂肪组织交感神经基因表达变化
              HSL)的表达显著高于对照组(图 2E),表明冷刺激                             研究表明脂肪组织产热主要受交感神经释放
              能够促进 iWAT 产热和线粒体功能显著增加。在                          去甲肾上腺素调节,酪氨酸羟化酶(tyrosin hydroxy⁃
              eWAT中,qRT⁃PCR结果显示冷刺激组Aco2、ATP 合                   lase,TyrH)主要表达于交感神经,是儿茶酚胺类激
              成酶⁃H 转运⁃线粒体F1复合体α亚基1(ATP synthase,                素生物合成过程中的关键限速酶。免疫组化结果
                    +
              H  +  transporting,mitochondrial F1 complex,alpha  显示,在 BAT 和 iWAT 中,冷刺激组 TyrH 表达显著
              subunit 1,Atp5α1)、琥珀酸脱氢酶 B 亚基(succinate           高于对照组(图3)。
              dehydrogenase complex iron sulfur subunit B,Sdhb)等  2.4  冷刺激后3种脂肪组织中巨噬细胞的M2型极
              线粒体功能相关基因和 Cpt2 的表达显著升高(图                         化状态变化
              2F);Western blot 结果显示对照组和冷刺激组在产                        巨噬细胞极化在脂肪组织炎症中起着重要作
              热相关基因表达上无显著差异(图2G)。以上结果提                          用。M1型巨噬细胞是经典型巨噬细胞,具有促炎活


              A                                                               B
                          BAT                iWAT                eWAT            10 8   *               对照组
                                                                                mRNA相对定量  4              *  *
                                                                                                        冷刺激组
                对照组                                                               6



                                                                                  0 2      *   *
                                                                                   Ucp1 Pparg Ppargc1α Prdm16 Cidea Tmem26 Cd137  Tbx1  Aco2 Atp5α1  Sdhb Cpt1a Acox1  Cpt2

                冷刺激组






              C                               D                                 E
                       对照组     冷刺激组              20 *                   对照组              对照组     冷刺激组
                                                 mRNA相对定量  10
                  Ucp1                 32 kDa    18                     冷刺激组        Ucp1                 32 kDa
                                                 16
               Ppargc1α                100 kDa   14                              Ppargc1α                100 kDa
                  Pparg                58 kDa    12                               C/EBPβ                 36 kDa
                C/EBPβ                 36 kDa     8 6       *                        Atgl                55 kDa
                   Atgl                55 kDa     4     *          *                HSL                  83 kDa
                  HSL                  83 kDa     2                                 Actin                42 kDa
                                                  0
                                                    Ucp1 Pparg Ppargc1α Prdm16 Cidea Tmem26 Cd137  Tbx1  Aco2 Atp5α1  Sdhb Cpt1a Acox1  Cpt2
                Tubulin                55 kDa

                              F                                 G         对照组    冷刺激组
                                  6  对照组                    *       Ucp1                 32 kDa
                                 mRNA相对定量  4 2     *  *  *        Ppargc1α               100 kDa
                                     冷刺激组
                                                                    Pparg
                                                                                         58 kDa
                                                                     Atgl
                                                                                         55 kDa
                                                                                         83 kDa
                                                                     HSL
                                  0                                 Actin                42 kDa
                                   Ucp1 Pparg Ppargc1α Prdm16 Cidea Tmem26 Cd137  Tbx1  Aco2 Atp5α1  Sdhb Cpt1a Acox1  Cpt2

                 A:免疫组化检测各脂肪组织 Ucp⁃1蛋白表达(×200);B:qRT⁃PCR 检测BAT 基因表达情况(n=5);C:Western blot 检测BAT 中蛋白表达情
              况;D:qRT⁃PCR 检测 iWAT 基因表达情况(n=5);E:Western blot 检测 iWAT 中蛋白表达情况;F:qRT⁃PCR 检测 eWAT 基因表达情况(n=5);G:
              Western blot检测eWAT中蛋白表达情况。两组比较,P < 0.05。
                                                  *
                                            图2  冷刺激后3种脂肪组织产热基因表达水平
                           Figure 2  Expressions of thermogenic genes in three adipose tissues after cold stimulation
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