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第42卷第6期 叶笛笛，柳 姚，邱 憬. 兔上颌前牙即刻种植动物模型的构建及其骨结合观察［J］.
2022年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（06）：821-829 ·823 ·

时间：-7 0 7
愈合期
2周组

4周组
即刻种植
处死
8周组
12周组

牙齿拔除 数据分析
图1 实验时序设计示意图
Figure 1 Schematic diagram of experimental timing design

有限公司），高压灭菌锅（TH⁃3560，TSAOSHIN公司， 减张缝合牙龈软组织瓣，关闭创口，缝线待其自行
美国），Micro⁃CT（Sky scan 1176，Bruker 公司，比利 脱落。术后当天新西兰兔苏醒后，将 10%葡萄糖+
时），自动组织脱水机（HistoCore PEARL）、石蜡包埋 布洛芬胶囊混合液注入口腔，使其自行吞咽。术后
机（Histocore Arcadia H）、全自动半薄轮转切片机 3 d肌注青霉素钠20×10 U/次，每天1次。每周调磨
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（RM2265）、硬组织自动切片机（RM2255）（Leica 公 下前牙以免过度伸长导致咬合创伤。手术操作如
司，德国），磨片机（400CS，EXAKT公司，德国），体视 图2所示。
显微镜（SMZ1000，Nikon公司，日本），正置荧光显微 1.2.4 标本取材
镜（DM4000，Leica公司，德国）等。 分别在术后第 2、4、8、12 周采用随机数字法选
1.2 方法 择实验动物处死，取含种植体的上颌骨标本，观察
1.2.1 种植体制备和即刻种植预实验 并记录标本中的种植体稳固与否以及种植体周围
委托中国宝鸡永铭泰金属材料有限公司参照 的骨质状况，再用4%多聚甲醛溶液浸泡固定标本，
本课题组前期研究中的锥柱状种植体设计图 ［10］ 加 保存于4 ℃冰箱中备用。
工制作纯钛种植体。种植体使用前，按双蒸水— 1.2.5 标本的观察、分析与检测
75%医用酒精—双蒸水—75%医用酒精—双蒸水顺 一般观察：在标本取材前，对新西兰兔进行生
序超声清洗，独立封装，高温高压灭菌消毒，烘干后 命体征和牙龈颜色、形态、质地的总体观察，检查记
备用。过量麻醉处死 1 只实验兔，体外解剖兔上颌 录创口愈合情况。标本取材后，观察记录上颌骨内
骨，熟悉兔上颌前牙区解剖特征，拔除上颌前牙并 种植体有无松脱、种植体周围骨质包绕情况以及种
即刻植入纯钛种植体，分别在拔牙前后以及即刻种 植体⁃骨之间有无缝隙。
植后拍摄 X 线片，检测兔上颌前牙即刻种植后骨壁 Micro⁃CT 扫描与分析：使用南京医科大学江宁
的完整性。 校区动物实验中心的Micro⁃CT扫描组织标本，扫描电
1.2.2 新西兰兔的麻醉 压90 kV，扫描电流278 μA，分辨率17.76 μm，曝光时
回顾既往研究和国内外文献 ［14］ ，在预实验中对 间 325 ms，以 0.6°旋转角度进行 360°扫描，添加
新西兰兔行陆眠宁肌肉注射麻醉，根据麻醉反应调 1 mm 的铜+铝过滤器以过滤扫描射线，后续采用
整陆眠宁用药浓度和注射部位。 CT Analyser（Version：1.15.4.0）和 Dataviewer（Ver⁃
1.2.3 手术操作 sion：1.5.4.0）软件对CT数据进行分析。
新西兰兔术前 24 h 禁食，陆眠宁（0.15 mL/kg） 组织学观察：利用上述标本制备硬组织切片及
肌肉注射，全身肌肉松弛后，仰卧位固定于手术 脱钙颌骨切片。硬组织切片制作：固定后的颌骨标
台。上颌前牙术区消毒，采用必兰行局部浸润麻 本经流水冲洗 12 h、乙醇脱水、二甲苯透明、甲基丙
醉，分离牙龈后，用微创牙挺以牙齿舌侧及近中为 烯酸甲酯浸泡、包埋、修整，固定于硬组织自动切片
支点挺松上颌前牙，再用乳牙钳拔除。探查确定唇 机上，沿种植体长轴近远中向切片（200 μm），再经
侧骨壁完整后，搔刮冲洗拔窝，使用血管钳和专用 磨片机磨至切片厚度为 30~40 μm，粘于载玻片，表
“一”字型螺丝刀将种植体顺时针旋入拔牙窝，种植 面抛光，行甲苯胺蓝染色，采用正置荧光显微镜观
体上端与唇侧骨壁上缘平齐，生理盐水冲洗术区， 察种植体的骨结合情况，体视显微镜拍照后测算种