Page 53 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第9期 潘 雪，高春峰，邢玉斐，等. 伴随基因突变/扩增在肺癌患者中的变化及其临床意义［J］.
2022年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（09）：1246-1252 ·1247 ·

and hepatocyte growth factor receptor（MET）. A total of 50 newly diagnosed patients’blood samples were detected by NGS technology.
The results showed that EGFR positive rate was 34%（17/50）. Except EGFR mutation，there were 79 kinds of gene mutations/
amplifications detected，with an average of 2.46 times/example，but without statistical difference in concomitant gene mutation/
amplification among clinical stage，smoking status，age，gender and pathological classification groups in blood samples. A total of 46
newly diagnosed patients’tissue samples were detected by NGS technology，of which EGFR positive rate was 50%（23/46）. Except
EGFR mutation，there were 160 kinds of gene mutations/amplifications detected，with an average of 6.20 times/example. There was no
statistical difference in concomitant gene mutation/amplification between clinical stage and age groups in tissue samples（P＞0.05）.
But in terms of smoking status，gender and pathological classification groups，there were statistically differences（U=74.000，P＜0.001；
U=130.5，P=0.003；F=8.968，P=0.011）. At the same time，TP53 mutation or not had no statistical significance on survival rate（the
2 2
blood group：χ =0.321，P=0.571；the tissue group：χ =0.309，P=0.579）. For the same patients，the frequency of gene mutation/
amplification in the tissue group（［3（1，8）］）was higher than that in the blood group［3（0，1）］，and the differences were statistically
significant（W=-150，P =0.001）. In the 17 patients with dynamic monitoring，there was no statistically significant difference in the
frequency of concomitant gene mutation/amplification between the two groups before and after anti⁃tumor treatment（W=-3，P=0.916）.
Conclusion：There may be multiple parallel gene mutations/amplifications before the first⁃line treatment for lung cancer. Previous
smoking and male patients are associated with higher levels of mutation/amplification status. Changes in the frequency of gene
mutation/amplification cannot indicate disease progression，and TP53 mutation has no significant effect on the survival rate of patients.
［Key words］ lung cancer；genetic testing；gene amplification；mutation
［J Nanjing Med Univ，2022，42（09）：1246⁃1252］

2021年美国癌症协会数据报告，肺癌仍是目前 纳入标准：①组织学或细胞学确诊的肺癌患
人类死亡率最高（男性 22%，女性 22%）的肿瘤 。 者；②年龄≥18岁。排除标准：①同时有其他恶性肿
［1］
肺癌的恶性程度较高，病情进展较快，超过 70%的 瘤；②存在可能影响随访和短期生存的其他严重疾
患者在确诊时已出现局部或远隔器官的转移，失去 病；③既往服用过 EGFR⁃TKI 等靶向药物、免疫药
［2］
了手术治疗的最佳时机 。表皮生长因子受体⁃酪 物；④既往接受过化疗、放疗或其他治疗。共纳入
氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor⁃ 71例患者（132份标本）。
tyrosine kinase inhibitor，EGFR⁃TKI）已成为表皮生长 1.2 标本收集及患者随访
因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）基 1.2.1 检测标本
因敏感突变患者的一线标准治疗，建议初诊非小细 肿瘤组织来源为气管镜下活检组织标本、肺穿
胞肺癌患者完善新一代基因测序（next⁃generation 刺活检组织标本，循环肿瘤 DNA（circulating tumor
sequencing technology，NGS）检测 。NGS 检测除了 deoxyribo nucleic acid，ctDNA）检测标本为外周血
［3］
可为患者选择合适的靶向治疗外，还可以预测疗 液、胸腔积液、脑脊液。
效，发现耐药机制，同时能发现新的基因突变类型， 1.2.2 标本收集
为靶向药物研发提供依据 。本研究回顾性分析经 血液、胸腔积液、脑脊液标本：收集患者用药前
［4］
NGS检测的71例肺癌患者的基因检测数据，并进一 和耐药后全血（8 mL）或胸腔积液（8 mL）或脑脊液
步分析其临床意义。 （3 mL），保存于streck管，并于管壁标记患者姓名及
样品号，15~35 ℃条件下运输，72 h内运送至实验室。
1 对象和方法
4 ℃条件下，1 590 g离心10 min，收集上清至15 mL离
1.1 对象 心管，4 ℃条件下 16 000 g 离心 10 min，再次收集上
纳入苏州大学附属第二医院 2015 年 12 月— 清至新的15 mL离心管。封口膜封口后干冰运输。
2020年7月入组的肺癌患者，依据气管镜、电子计算 石蜡组织标本：收集患者肿瘤组织切片，要
机断层扫描（computed tomography，CT）引导下经皮 求 恶 性 肿 瘤 细 胞 占 比 ≥10% ，坏 死 组 织 区 域 ≤
肺穿刺、胸腔积液病理结果明确诊断。患者或家属 50%，标本编号标记规范清晰，石蜡组织标本切片
均已签署书面知情同意书，本研究已经苏州大学附 厚度 5 μm（防脱玻片），切片时摊片即可，无需烤
属第二医院伦理委员会审批［（2013）伦审科研第 片处理，取 6 周以内的石蜡切片，每组切片 15 张，
（K11）号］通过。 常温或 2~8 ℃运输。