Page 50 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第4期
·488 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年4月

A 4 B 2.5 ANKRD1⁃NC
ANKRD1蛋白相对表达量 2 （ 450 nm ） 1.5
ANKRD1⁃NC ANKRD1 3 *** 2.0 ANKRD1 ***
ANKRD1 36 kDa ***

GAPDH 36 kDa 1 0 D 1.0 **
0.5
ANKRD1⁃NC ANKRD1 0 1 2 3 4 5 6

C D 时间（d）
平板克隆细胞团数 200 ANKRD1⁃NC EdU阳性率 30
ANKRD1⁃NC ANKRD1 400 *** DAPI EdU Merge （ % ） 50 ***
40
300
20
100
0 ANKRD1 10 0
ANKRD1⁃NC ANKRD1 ANKRD1⁃NC ANKRD1

E F
（ % ） 60 *** 400 *** 300 ***
ANKRD1⁃NC ANKRD1 80 ANKRD1⁃NC ANKRD1
划痕修复比例 20 100 0 100 0
h 40 迁移细胞数 300 侵袭细胞数 200
200
0 迁移

ANKRD1⁃NC
h 0 ANKRD1⁃NC ANKRD1 ANKRD1⁃NC ANKRD1
48 ANKRD1 侵袭

A：HCCLM3细胞过表达ANKRD1后Western blot检测过表达效率；B：CCK⁃8实验检测过表达ANKRD1后细胞增殖能力的变化；C：平板克
隆实验表明，过表达ANKRD1后的肝癌细胞系形成了更多的克隆细胞团数；D：EdU实验用来探究过表达ANKRD1对肿瘤细胞增殖能力的影
响；E.划痕实验表明过表达ANKRD1后肝癌细胞具有更强的迁移能力；F：Transwell实验表明，过表达ANKRD1促进肝癌细胞的迁移与侵袭能
力。与ANKRD1⁃NC组比较，P < 0.01， P < 0.001，n=3。
**
***
图2 过表达ANKRD1可以促进肝癌细胞增殖、迁移与侵袭
Figure 2 ANKRD1 overexpression promoted the proliferation，migration and invasion of HCC cells

的迁移与侵袭能力也明显下降（图3E、F）。 表达 ANKRD1 可以促进皮下瘤的生长，ANKRD1 敲
2.4 ANKRD1 介导 HCC 细胞 EMT 通路激活并促进 低则会抑制皮下瘤的生长（图4B~E）。同时，免疫组
肝癌细胞在体内的生长 化实验也表明过表达 ANKRD1 后 Ki⁃67 阳性率升
既往研究表明，EMT通路可以促进肿瘤细胞的 高，而敲低 ANKRD1 后结果相反，过表达 ANKRD1
迁移与侵袭能力 ［10］ ，本研究发现ANKRD1可以促进 会抑制 HCC 细胞 E⁃cadherin 的表达，促进 Vimentin
肝癌细胞的迁移与侵袭能力，为了进一步探究 的表达，ANKRD1敲低则结果相反（图4C）。以上表
ANKRD1 对肝癌细胞迁移能力影响的机制，我们通 明，ANKRD1 可以促进肝癌细胞在体内的生长并促
过 Western blot 实验检测了 ANKRD1 过表达与敲低 进EMT通路的蛋白表达。

后EMT相关蛋白的表达情况，发现过表达ANKRD1
3 讨 论
后，Vimentin 蛋白与 N⁃cadherin 蛋白表达上调，而
E⁃cadherin 蛋白则表达下调，敲低 ANKRD1 后结果 虽然目前医疗发展迅速，但HCC的生存率仍然
相反（图 4A），这表明，ANKRD1 可以介导 EMT 通路 较低。因此，探究 HCC 的发生发展的病理机制，寻
激活。 找肝癌治疗的新靶点一直是研究的重点。ANKRD1
进一步通过皮下成瘤实验探究 ANKRD1 对肝 是一种公认的转录因子，在肌肉发育、信号转导、损
癌细胞在体内生长的影响，发现与对照组相比，过 伤、炎症和细胞应激反应中发挥作用 ［11］ 。近年来