Page 51 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第4期 朱德明，孔连宝，贾文博，等. ANKRD1通过介导上皮细胞间充质转化促进肝细胞肝癌增殖
2023年4月 与转移［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（04）：484⁃491 ·489 ·

A B
2.0 si⁃NC ***
1.5
ANKRD1蛋白相对表达量 *** （ 450 nm ） 1.0 *
si⁃NC si⁃1 si⁃2 si⁃3 1.5 si⁃ANKRD1
ANKRD1 36 kDa 1.0 * **

GAPDH 0.5 D
36 kDa *** 0.5
0
si⁃NC si⁃1 si⁃2 si⁃3 0 1 2 3 4 5 6
时间（d）

C 200 D DAPI EdU Merge 50
平板克隆细胞团数 100 *** si⁃NC EdU阳性率 30 ***
si⁃NC si⁃ANKRD1 150 （ % ） 40

20
50
10
0
si⁃NC si⁃ANKRD1 si⁃ANKRD1 0 si⁃NC si⁃ANKRD1

E F
（ % ） （ % ） 400 300
si⁃NC si⁃ANKRD1 80 si⁃NC si⁃ANKRD1
划痕修复比例 20 EdU阳性率 100 侵袭细胞数 100
h 60 *** 300 200
0 40 迁移 200 *** ***

h 0 0 0
si⁃ANKRD1
si⁃ANKRD1
48 si⁃NC si⁃ANKRD1 侵袭 si⁃NC si⁃NC
A：Western blot检测ANKRD1在3个小干扰RNA转染下的敲低效率；B：CCK⁃8实验证明敲低ANKRD1可以抑制肝癌细胞增殖；C：平板克隆
实验表明敲低 ANKRD1 后细胞团数明显减少；D：EdU 实验表明，敲低 ANKRD1 后，处于增殖期的细胞比例明显降低；E：划痕实验表明敲低
ANKRD1后细胞移动能力降低；F：Transwell 实验表明，敲低ANKRD1后抑制了肝癌细胞的迁移与侵袭能力。与si⁃NC组比较，P < 0.05，P < 0.01，
*
**
P < 0.001，n=3。
***
图3 敲低ANKRD1可以抑制肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭
Figure 3 ANKRD1 knockdown inhibited the proliferation，migration and invasion of HCC cells

ANKRD1在肿瘤中的作用越来越受到重视，Kojic等 ［6］ 制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase
发现 ANKRD1 是肿瘤抑制因子 p53 的共激活因子， inhibitor，EGFR⁃TKI）耐药细胞的mRNA和蛋白表达
ANKRD1 的过表达也与顺铂耐药和卵巢癌预后恶 水平上过度表达。在EGFR⁃TKI耐药细胞株中沉默
化相关 。Lei 等 ［12］ 发现了 ANKRD1 在卵巢细胞中 ANKRD1 后，阿法替尼和奥西替尼可诱导细胞株凋
［7］
作为顺铂敏感性调节因子的新作用，改变 ANKRD1 亡。伊马替尼可抑制ANKRD1的表达，使EGFR⁃TKI
的表达可调节培养细胞对顺铂的敏感性，并发现 耐药细胞对阿法替尼和奥西替尼的敏感性恢复。
ANKRD1 高表达与浆液性卵巢癌患者的生存期较 在EGFR突变型非小细胞肺癌患者中，在EGFR⁃TKI
差相关。ANKRD1是TGF⁃β/Wnt信号通路作用的靶 治 疗 失 败 后 ，特 别 是 长 期 EGFR ⁃ TKI 治 疗 后 ，
标 ［13］ ，并上调 p21 WAF1/ cip1［14］ 。它也是基于肌联蛋白 ANKRD1 在肿瘤中过度表达。这表明 ANKRD1 抑
的信号转导复合物的组成部分 ［15］ ，肌联蛋白已被 制对EGFR突变型非小细胞肺癌患者可能是一种有
确定为携带癌症相关“驱动”突变的候选基因 ［16］ 。 前途的治疗策略。Obara 等 ［17］ 发现ANKRD1是一个
Takahashi 等 ［8］ 在对肺腺癌的研究中发现过表达 依赖ERK5和ERK1/2的独立基因，它在ERK的调控
的 ANKRD1 与 EMT 通路和抗凋亡有关，并且在 下，通过抑制酪氨酸羟化酶的泛素化参与调控嗜铬
第二代和第三代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑 细胞瘤的增殖、分化和基因表达。但目前其在HCC