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第43卷第6期 毋柯蓉，郭 兴. Drp1缺失通过ABCB10激活线粒体未折叠蛋白反应［J］.
2023年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（6）：772-779 ·775 ·
的mtUPR。 2.4 敲除、敲低或抑制Drp1对ABCB10蛋白表达水
2.2 Drp1抑制剂小分子多肽处理可激活mtUPR 平的影响
不同浓度（0、2.5、5.0、10.0 mmol/L）3⁃NP 处理 本实验室前期研究表明，线粒体内膜蛋白
DMSO 组、Mdivi1 组、TAT 组和 P110 组细胞 24 h。 ABCB10 是 HD 细 胞 和 动 物 模 型 中 mtUPR 激 活
Western blot结果显示，与对照相比，CHOP蛋白的表 CHOP 所必需的蛋白 ［19］ 。猜测 Drp1 可能通过调控
达水平显著上升（P＜0.05，图 2），Mdivi⁃1 和 P110 处 ABCB10进而激活mtUPR。Western blot结果显示，敲
理均显著增强3⁃NP诱导的mtUPR。 除Drp1（Drp1⁃KO组）、敲低Drp1（sh⁃Drp1组）以及抑
2.3 敲低或抑制Drp1对mtUPR相关蛋白的影响 制Drp1（小分子多肽Mdivi1和P110处理）后，与对照
为进一步探讨抑制 Drp1 表达与 mtUPR 的相关 组相比，ABCB10 蛋白水平显著升高（P 均＜0.01，图
性，检测反映 mtUPR 活化的线粒体伴侣蛋白 Hsp60 4）。提示ABCB10参与Drp1缺失激活mtUPR的过程。
和线粒体蛋白酶 LONP1 蛋白表达水平的变化。 2.5 敲低 Drp1 或 Mdivi1 处理对 ABCB10 mRNA 水
Western blot结果显示，sh⁃Drp1组、P110组及Mdivi⁃1 平的影响
组细胞中，Hsp60和LONP1蛋白表达水平显著上升（P 为 检 测 ABCB10 蛋 白 水 平 的 升 高 是 否 与 其
均＜0.05，图3）。提示Drp1表达下降可激活mtUPR。 mRNA 水平的变化有关，qRT⁃PCR 检测 pLKO 和
A B
WT Drp1⁃KO pLKO sh⁃Drp1
3⁃NP（mmol/L） 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0 3⁃NP（mmol/L） 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0
CHOP 29 kDa CHOP 29 kDa
Drp1 80 kDa Drp1 80 kDa
β⁃actin WT *# 42 kDa β⁃actin pLKO 42 kDa
蛋白相对表达水平 30 Drp1⁃KO * *# CHOP 蛋白相对表达水平 20 sh⁃Drp1 * *# *#
15
20
CHOP 10 * 5 * *
10
0 * * 0 *
0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0
3⁃NP（mmol/L） 3⁃NP（mmol/L）
A：3⁃NP处理后，WT组和Drp1⁃KO组细胞CHOP蛋白的表达；Ｂ：3⁃NP处理后，sh⁃Drp1组与pLKO组细胞CHOP蛋白的表达。与0 mmol/L
3⁃NP组比较，P < 0.05（n=3）；Drp1⁃KO组/sh⁃Drp1组与对应WT组/pLKO组比较，P < 0.05（n=3）。
#
*
图1 在MEF细胞中敲除或敲低Drp1后CHOP蛋白的表达情况
Figure 1 Expression of CHOP protein after Drp1 knocking out/knocking down in MEF cells
A DMSO Mdivi⁃1 B TAT P110
3⁃NP（mmol/L） 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0 3⁃NP（mmol/L） 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0
CHOP 29 kDa CHOP 29 kDa
β⁃actin DMSO *# 42 kDa β⁃actin TAT *# 42 kDa
蛋白相对表达水平 40 Mdivi⁃1 蛋白相对表达水平 8 6 P110 * *#
30
CHOP 20 * * *# CHOP 4 * *
10
0 * * 2 0 *
0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0 0 2.5 5.0 10.0
3⁃NP（mmol/L） 3⁃NP（mmol/L）
A：3⁃NP 处理后，Mdivi⁃1 组和 DMSO 组 MEF 细胞 CHOP 蛋白的表达；B：3⁃NP 处理后，P110 组和 TAT 组 MEF 细胞 CHOP 蛋白的表达。与
0 mmol/L 3⁃NP组比较，P < 0.05（n=3）；Mdivi1组/P110组与对应DMSO/TAT组比较，P < 0.05（n=3）。
#
*
图2 在MEF细胞用Drp1抑制剂处理后CHOP蛋白的表达情况
Figure 2 Expression of CHOP protein after Drp1 inhibitors treatment in MEF cells
