Page 34 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第6期
               ·776 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年6月


                           A      pLKO sh⁃Drp1          B   2.0                 C   1.5     *
                                                           LONP1蛋白相对表达量  1.0       Hsp60蛋白相对表达量
                             LONP1
                                             100 kDa        1.5     *
                             Hsp60           60 kDa                                 1.0
                              Drp1           80 kDa                                 0.5
                             β⁃actin         42 kDa         0.5
                                                             0
                                                                pLKO sh⁃Drp1         0  pLKO sh⁃Drp1
                           D       TAT   P110           E   3                   F   1.5
                                                           LONP1蛋白相对表达量            Hsp60蛋白相对表达量
                             LONP1           100 kDa               **                       *
                             Hsp60           60 kDa         2                       1.0
                             β⁃actin         42 kDa         1                       0.5


                                                            0
                                                                TAT  P110            0  TAT  P110
                           H                            I                       J
                                  DMSO Mdivi⁃1              1.5    **               1.5     *
                                                           LONP1蛋白相对表达量            Hsp60蛋白相对表达量
                             LONP1           100 kDa
                             Hsp60                          1.0                     1.0
                                             60 kDa
                             β⁃actin         42 kDa         0.5                     0.5


                                                             0
                                                               DMSO Mdivi⁃1          0  DMSO Mdivi⁃1
                 A~C:sh⁃Drp1组及对照pLKO组细胞中检测LONP1、Hsp60蛋白表达(A)及LONP1蛋白(B)、Hsp60蛋白(C)表达灰度分析;D~F:在P110组
              及对照TAT组细胞中检测LONP1、Hsp60蛋白表达(D)及LONP1蛋白(E)、Hsp60蛋白(F)表达灰度分析:G~I:在Mdivi⁃1组及对照DMSO组细
              胞中检测LONP1、Hsp60蛋白表达(G)及LONP1蛋白(H)、Hsp60蛋白(I)表达灰度分析。两组比较,P < 0.05,P < 0.01(n=3)。
                                                                                        **
                                                                                 *
                                           图3 敲低或抑制Drp1对mtUPR相关蛋白的影响
                              Figure 3 Effects of knocking down or inhibiting Drp1 on mtUPR⁃related proteins

               A                       C                       E                       G
                        WT Drp1⁃KO             pLKO sh⁃Drp1            DMSO Mdivi⁃1             TAT  P110
                 ABCB10          60 kDa  ABCB10          60 kDa  ABCB10          60 kDa  ABCB10          60 kDa
                   Drp1          80 kDa    Drp1          80 kDa   β⁃actin        42 kDa   β⁃actin        42 kDa
                  β⁃actin        42 kDa   β⁃actin        42 kDa

                 B    4                  D           **         F     4                 H     4
                            ***              2.0                      3     ***               3      **
                      3
                   ABCB10  蛋白相对表达量  2      ABCB10  蛋白相对表达量  1.5    ABCB10  蛋白相对表达量  2       ABCB10  蛋白相对表达量  2
                                             1.0



                      0 1                    0.5                      1 0                     1 0
                                               0
                          WT Drp1⁃KO              pLKO sh⁃Drp1           DMSO Mdivi⁃1             TAT P110
                 A、B:在Drp1⁃KO组及对照WT组中检测ABCB10蛋白表达(A)及半定量分析(B);C、D:在sh⁃Drp1组及对照pLKO组中检测ABCB10蛋白
              表达(C)及半定量分析(D);E、F:在Mdivi⁃1组及对照DMSO组细胞中检测ABCB10蛋白表达(E)及半定量分析(F);G、H:在P110组及对照TAT
              组细胞中检测ABCB10蛋白表达(G)及半定量分析(H),两组比较,P < 0.01, P < 0.001(n=3)。
                                                                  ***
                                                           **
                                      图4 敲除、敲低或抑制Drp1对ABCB10蛋白表达水平的影响
                  Figure 4  The effect of knocking out,knocking down or inhibiting Drp1 on the expression level of ABCB10 protein

              sh⁃Drp1 组以及 DMSO 对照和 Mdivi1 处理组 mRNA              的mRNA水平显著上升(P均<0.01,图5)。
              水平,以确定 Drp1 是否影响 ABCB10 的 mRNA 水                  2.6 Drp1和ABCB10双敲对mtUPR的影响

              平。与对照组相比,sh⁃Drp1 和 Mdivi1 组的 ABCB10                    为进一步验证 Drp1 是否通过 ABCB10 调节
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