Page 17 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第8期 曹 清，秦 丽，刘 娟. V11β⁃羟化类固醇脱氢酶敲除对高脂饮食喂养小鼠认知功能的影响［J］.
2023年8月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（8）：1047-1054 ·1051 ·

功能改善的原因，对两组小鼠海马体石蜡切片进行 构，结果显示全身11β⁃HSD1基因敲除高脂喂养小鼠
与认知功能密切相关的功能蛋白脑源性神经营养 的海马神经元的细胞核核仁更清楚，染色质分布均
因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）的免 匀，未见明显的板层松解现象，核糖体较为丰富（图
疫荧光染色（图 4A），并对阳性细胞率进行定量分 4C），细胞内的线粒体数量明显增加（P < 0.05，图
析，结果显示 11β⁃HSD1 敲除组与对照组相比， 4D），而野生对照的海马神经元线粒体含量少，且呈
BNDF 阳性细胞率显著上升（P < 0.05，图4B）。留取 空泡样改变。
两组小鼠的海马体，透射电镜观察神经元的超微结 进一步对海马体相关功能进行评估，使用 RT⁃

A B
DAPI BDNF Merge 1.0 *
Positive cell rate of BNDF 0.8
WT 0.9

0.7
WT KO
KO

C ×5 000 ×20 000 ×40 000 D
PCS
50 *
Mitochondrial number 20
WT 40
30

10
0
WT KO

KO

A：石蜡切片（BDNF 免疫荧光染色，×50）；B：BDNF 阳性细胞率；C：透射电镜观察小鼠神经元超微结构；D：神经元线粒体数量统计。两
组比较，P < 0.05（n=3）。
*
图4 11β⁃HSD1基因敲除高脂饮食喂养小鼠海马体形态学评估
Figure 4 Morphological assessment of the hippocampus in 11β⁃HSD1 knockout mice fed high⁃fat diet

PCR 荧光定量分析评估认知功能相关蛋白：活性调 包括线粒体融合蛋白 1（mitofusion 1，Mfn1）、线粒体

节细胞骨架相关蛋白（activity⁃regulated cytoskeleton⁃ 融合蛋白 2（mitofusion 2，Mfn2）、视神经萎缩蛋白
associated protein，Arc）、BDNF、突 触 结 合 蛋 白 ⁃ 1 （optic atrophy 1，Opa1），动力相关蛋白 1（dynamin⁃
（synaptotagmin⁃1，Syt1），结果表明，11β⁃HSD1 敲除 related protein 1，Drp1）、线粒体分裂蛋白 1（mito⁃
组与野生对照组相比，Arc、Syt1表达量有上升趋势， chondrial fission protein 1，Fis1）的基因表达无显著
BDNF 表达量显著升高（P < 0.05，图 5）。由于电镜 性差异（图 5B、C）；接着，检测了线粒体呼吸链相关
结果提示11β⁃HSD1敲除高脂喂养小鼠海马体的线 蛋白的基因表达，包括环氧合酶 2（cyclooxygenase⁃
粒体数量明显增加，进一步分析海马体线粒体融合 2，COX2）、细胞色素C氧化酶7α亚单位多肽1（cyto⁃
和分裂相关蛋白基因，结果显示 11β⁃HSD1 敲除组 chrome c oxidase subunitVIIa polypeptide 1，Cox7α
和野生对照组相比，线粒体融合和分裂相关蛋白， 1）、细胞色素 C 氧化酶 8b 亚单位（cytochrome c oxi⁃