Page 56 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 56

第43卷第8期
               ·1090 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年8月


                  A    1.5  ADR         **     B  Nephrin  ADR  NC   135 kDa    4   ADR
                      mRNA相对表达水平  1.0  *  ***     Podocin            75 kDa    蛋白相对表达量  3 2 1  **  *  *
                                                                                    NC
                            NC
                                                    Gas6
                                                                     42 kDa
                       0.5
                        0
                          Nephrin  Podocin  Gas6  GAPDH              36 kDa     0  Nephrin  Podocin  Gas6
                                   A:qRT⁃PCR;B:Western blot。与NC相比,P<0.05,P<0.01, P<0.001(n=3)。
                                                                             ***
                                                               *
                                                                      **
                                             图4 阿霉素肾病细胞模型中Gas6表达升高
                                  Figure 4 Gas6 is highly expressed in adriamycin nephropathy cell model
                  A    1.5  Gas6               B  Nephrin  Gas6  NC   135 kDa     4   Gas6
                      mRNA相对表达水平  1.0  *  *       GAPDH               42 kDa     蛋白相对表达量  3 2 1  **  **
                                                                                      NC
                            NC
                                                   Podocin
                       0.5
                                                                      36 kDa
                        0
                            Nephrin    Podocin                                    0   Nephrin   Podocin
                                       A:qRT⁃PCR;B:Western blot。与NC相比,P<0.05,P<0.01(n=3)。
                                                                          **
                                                                    *
                                                   图5   Gas6刺激MPC5细胞
                                            Figure 5 MPC5 cells were stimulated by Gas6

                        A                          B
                                 Gas6                GAPDH  Gas6   NC  36 kDa    0.6   Gas6
                                                                                       NC
                                 NC
                            2.0
                           mRNA相对表达水平  1.5  *         BCL⁃2            26 kDa    蛋白相对表达量  0.4  *  ***
                                  **
                            1.0
                                                                                 0.2
                                                        Bax
                                                                       21 kDa
                            0.5
                                                                                   0
                             0
                                                                                      BCL⁃2    Bax
                                 BCL⁃2    Bax
              C                                  Gas6(ng/mL)                               25
                              0                      10                     100            20
                   10 3                   10 3                   10 3                      ( % )
                      B1:0.07%  B4:0.47%     B1:0.47%  B4:0.29%     B1:0.35%  B4:0.39%     15        ***
                                                                                           凋亡率  10        ***
                    2                       2                      2
                   10                     10                     10
                                                                                            5
                   10 1                   10 1                   10 1                       0
                 PI   B3:80.27%  B4:19.19%   B3:89.73%  B4:9.51%    B3:90.45%  B4:8.81%         0    10    100
                                                                                                  Gas6(ng/mL)
                   10 0                   10 0                   10 0
                         10 0  10 1  10 2  10 3  10 0  10 1  10 2  10 3  10 0  10 1  10 2  10 3
                                               Annexin V⁃FITC
                           A:qRT⁃PCR;B:Western blot;C:流式细胞术。与NC或对照组相比,P<0.05,P<0.01, P<0.001(n=3)。
                                                                                      ***
                                                                        *
                                                                               **
                                               图6   在HEK⁃293T细胞中Gas6抗凋亡
                                           Figure 6  Gas6 is antiapoptotic in HEK⁃293T cells
              通过 Western blot 检测 TFAP2A 敲低或过表达效率,               高(P<0.01和P<0.05,图10)。
              同时检测在敲低或过表达 TFAP2A 后 Gas6 蛋白的
                                                                3  讨 论
              表 达 是 否 改 变 。 与 siNC 组 相 比 ,siTFAP2A 组
              TFAP2A 与 Gas6 的蛋白表达水平明显降低(P<                           真核生物基因的表达调控是十分复杂的,涉及

              0.01 和 P<0.05);与 pENTER 组 相 比 ,pENTER ⁃           许多具有调控功能的核酸序列和蛋白质调控因
              TFAP2A组TFAP2A与Gas6的蛋白表达水平明显升                      子。转录因子、辅因子、染色质调节因子、RNA 聚合
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