Page 56 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第8期
·1090 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年8月
A 1.5 ADR ** B Nephrin ADR NC 135 kDa 4 ADR
mRNA相对表达水平 1.0 * *** Podocin 75 kDa 蛋白相对表达量 3 2 1 ** * *
NC
NC
Gas6
42 kDa
0.5
0
Nephrin Podocin Gas6 GAPDH 36 kDa 0 Nephrin Podocin Gas6
A:qRT⁃PCR;B:Western blot。与NC相比,P<0.05,P<0.01, P<0.001(n=3)。
***
*
**
图4 阿霉素肾病细胞模型中Gas6表达升高
Figure 4 Gas6 is highly expressed in adriamycin nephropathy cell model
A 1.5 Gas6 B Nephrin Gas6 NC 135 kDa 4 Gas6
mRNA相对表达水平 1.0 * * GAPDH 42 kDa 蛋白相对表达量 3 2 1 ** **
NC
NC
Podocin
0.5
36 kDa
0
Nephrin Podocin 0 Nephrin Podocin
A:qRT⁃PCR;B:Western blot。与NC相比,P<0.05,P<0.01(n=3)。
**
*
图5 Gas6刺激MPC5细胞
Figure 5 MPC5 cells were stimulated by Gas6
A B
Gas6 GAPDH Gas6 NC 36 kDa 0.6 Gas6
NC
NC
2.0
mRNA相对表达水平 1.5 * BCL⁃2 26 kDa 蛋白相对表达量 0.4 * ***
**
1.0
0.2
Bax
21 kDa
0.5
0
0
BCL⁃2 Bax
BCL⁃2 Bax
C Gas6(ng/mL) 25
0 10 100 20
10 3 10 3 10 3 ( % )
B1:0.07% B4:0.47% B1:0.47% B4:0.29% B1:0.35% B4:0.39% 15 ***
凋亡率 10 ***
2 2 2
10 10 10
5
10 1 10 1 10 1 0
PI B3:80.27% B4:19.19% B3:89.73% B4:9.51% B3:90.45% B4:8.81% 0 10 100
Gas6(ng/mL)
10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 0 10 1 10 2 10 3 10 0 10 1 10 2 10 3
Annexin V⁃FITC
A:qRT⁃PCR;B:Western blot;C:流式细胞术。与NC或对照组相比,P<0.05,P<0.01, P<0.001(n=3)。
***
*
**
图6 在HEK⁃293T细胞中Gas6抗凋亡
Figure 6 Gas6 is antiapoptotic in HEK⁃293T cells
通过 Western blot 检测 TFAP2A 敲低或过表达效率, 高(P<0.01和P<0.05,图10)。
同时检测在敲低或过表达 TFAP2A 后 Gas6 蛋白的
3 讨 论
表 达 是 否 改 变 。 与 siNC 组 相 比 ,siTFAP2A 组
TFAP2A 与 Gas6 的蛋白表达水平明显降低(P< 真核生物基因的表达调控是十分复杂的,涉及
0.01 和 P<0.05);与 pENTER 组 相 比 ,pENTER ⁃ 许多具有调控功能的核酸序列和蛋白质调控因
TFAP2A组TFAP2A与Gas6的蛋白表达水平明显升 子。转录因子、辅因子、染色质调节因子、RNA 聚合