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第43卷第8期 颜 凤，周国平. 转录因子AP2A对肾病相关基因Gas6的调控研究［J］.
2023年8月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（8）：1085-1093 ·1091 ·

Anti⁃TFAP2A Positive control Anti⁃IgG 结合，从而调节靶标基因的表达 ［10］ 。研究转录因子
Input （ 2% ）
对启动子的调控作用对进一步认识转录调控机制
Marker
和疾病小分子机制的研究以及疾病的预防、治疗等
都具有重要意义。然而，目前对Gas6基因的研究主
要集中在其下游蛋白水平，对Gas6基因的启动子调
控方面的研究却很少。本研究通过建立肾病细胞
模型、用 Gas6 细胞因子作用于 MPC5 细胞，证明
Gas6 可促进 NS 的发展，并通过用 Gas6 细胞因子干
10
* 预 HEK⁃293T 细胞证明 Gas6 在 HEK⁃293T 细胞中具
8 有抗凋亡作用。本研究还通过 ChIP 实验证明转录
相对信号富集 6 4 因子 AP2A 可与 Gas6 启动子结合，同时构建人 Gas6

启动子萤光素酶基因报告质粒 pGas6⁃1450 并证明

2 其是有启动转录活性的启动子，并对其预测得到的
关键转录结合位点进行定点突变，明确 TFAP2A 在
0
IgG TFAP2A
Gas6启动子上的关键性结合位点，同时通过敲低或
与IgG相比，P＜0.05（n=3）。
*
过表达TFAP2A证明TFAP2A在启动子、mRNA和蛋
图7 TFAP2A可与Gas6启动子结合
Figure 7 TFAP2A can bind to the promoter of Gas6 白水平对Gas6基因均有正向转录调控。
生 长 抑 制 特 异 性 基 因（growth arrest ⁃ specific
酶Ⅱ（Pol Ⅱ）和其他反式作用因子直接或间接地与 transcripts，GAS）在进化过程中结构和功能高度保
转录调控元件（包括启动子、增强子和超级增强子） 守，其家族成员众多，它们的基因编码产物在微丝

siNC pENTER
pENTER⁃TFAP2A
*** 1.5 ** siTFAP2A 2.0 ***
4
1.5
相对萤光素酶活性 3 2 1 相对萤光素酶活性 1.0 * 相对萤光素酶活性 1.0 * 相对萤光素酶活性 1.5 **
***
***
1.0
0.5
0.5
0.5
0.0
0
0.0
0.0
pGas6⁃1450 mut1+2
pGas6⁃1450 mut1
pGL3⁃Basic pGas6⁃1450 pGas6⁃1450 pGas6⁃1450 mut2 pGas6⁃1450 pGas6⁃1450 mut2 pGas6⁃1450 pGas6⁃1450 mut2
pGas6⁃1450 mut1+2
pGas6⁃1450 mut1+2
pGas6⁃1450 mut1
pGas6⁃1450 mut1
两组比较，P＜0.05，P＜0.01， P＜0.001（n=3）。
***
*
**
图8 人Gas6启动子、突变启动子活性以及TFAP2A对其活性的影响
Figure 8 The activity of human Gas6 gene’s promoter and its mutants and affected by TFAP2A
pENTER
siNC pENTER⁃TFAP2A
1.5 2 000
siTFAP2A
**
mRNA相对表达水平 1.0 mRNA相对表达水平 1 000 2 *
***
**
1 500
0.5
0.0 1 0
TFAP2A Gas6 TFAP2A Gas6
两组比较，P＜0.05，P＜0.01， P＜0.001（n=3）。
*
**
***
图9 TFAP2A在mRNA水平调控人Gas6基因表达
Figure 9 TFAP2A regulates the human Gas6 gene at the mRNA level