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第43卷第9期 徐 洋，王 敏，张恒璐，等. 达格列净通过Rffl抑制STAT1/TGF⁃β1信号通路改善糖尿病肾病
2023年9月 肾小管上皮细胞EMT和纤维化［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（9）：1201-1207 ·1205 ·

A ESRD 的主要病理基础和共同途径，然而目前针对
NC组 HG组 Dap⁃L组 Dap⁃H组
Rffl 37 kDa DKD的治疗方式在抑制EMT、抗纤维化方面效果有
限。如何有效抑制肾小管上皮细胞 EMT 及肾纤维
α⁃Tubulin 50 kDa 化，从而阻止和延缓 DKD 向终末期肾病发展，是目
前亟待解决的难题。
B 1.0 #△
肾小管上皮细胞 EMT 在肾脏纤维化中发挥重
# 要作用 ［9-10］ ，而抑制 EMT 可以在一定程度上延缓肾
0.8
Rffl蛋白相对表达量 0.6 * 纤维化进展。在 EMT 过程中，上皮细胞的迁移、侵
袭、抗凋亡能力增强，促进细胞外基质沉积，加剧肾
0.4
间质细胞纤维化，严重危害肾脏功能
［11］
。E⁃cadherin
作为细胞黏附连接的中心成分，是维持上皮细胞完整
0.2
性所必需的。α⁃SMA是肌纤维成熟细胞表达的一个
0
NC组 HG组 Dap⁃L组 Dap⁃H组 ［12］
特征蛋白，在肾组织中可直接反映纤维化程度 。
A：Western blot 检测各组Rffl蛋白表达；B：各组Rffl蛋白表达的
Fibronectin 是肾纤维化中一种主要的 ECM 成分，其
*
#
定量分析；与NC组比较，P < 0.05；与HG组比较，P < 0.05；与Dap⁃L
合成增加会促进ECM积聚，加快肾间质纤维化的进
组比较，P < 0.05，n=3。
△
图5 Western blot检测达格列净对HK⁃2中Rffl表达的影响 展 ［13］ 。肾EMT常以E⁃cadherin表达量降低，α⁃SMA、
Figure 5 The effect of dapagliflozin on Rffl expression in Fibronectin 等间质标志物表达量升高等为主要特
HK⁃2 detected by Western blot 征 ［14-16］ 。泛素化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修
饰，它是泛素分子在一系列酶的作用下，与靶蛋白
的主要因素，显著增加了糖尿病患者的病死率。肾 质共价结合的修饰过程。E3 泛素连接酶 MARCH7
小 管 上 皮 细 胞 EMT 及 肾 纤 维 化 是 DKD 进 展 到 能够调控E⁃cadherin 和β⁃catenin的表达。在卵巢癌
A B 0.8 C 2.0
NC组 HG组 PCDH组 PCDH⁃Rffl组 0.6 * 1.5 *

STAT1 83 kDa STAT1蛋白相对表达量 0.4 # TGF⁃β1蛋白相对表达量 1.0 #
TGF⁃β1 44 kDa
α⁃Tubulin 50 kDa 0.2 0.5
0
PCDH组
NC组 HG组 PCDH⁃Rffl组 0 NC组 HG组 PCDH组
PCDH⁃Rffl组
A：Western blot检测各组STAT1、TGF⁃β1蛋白表达；B：各组STAT1蛋白表达的定量分析；C：各组TGF⁃β1蛋白表达的定量分析；与NC组比
较，P < 0.05；与PCDH组比较，P < 0.05，n=3。
#
*
图6 Western blot检测过表达Rffl对HK⁃2中STAT1、TGF⁃β1表达的影响
Figure 6 The effects of Rffl overexpression on the expression of STAT1 and TGF⁃β1 in HK⁃2 detected by Western blot
A B 2.0 C 2.0 *
NC组 HG组 Dap⁃L组 Dap⁃H组 *

STAT1 83 kDa 1.5 # #△ 1.5 # #△
TGF⁃β1 44 kDa STAT1蛋白相对表达量 1.0 TGF⁃β1蛋白相对表达量 1.0
α⁃Tubulin 50 kDa 0.5 0.5

0
Dap⁃H组
NC组 HG组 Dap⁃L组 0 NC组 HG组 Dap⁃L组
Dap⁃H组
A：Western blot检测各组STAT1、TGF⁃β1蛋白表达；B：各组STAT1蛋白表达的定量分析；C：各组TGF⁃β1蛋白表达的定量分析；与NC组比
较，P < 0.05；与HG组比较，P < 0.05；与Dap⁃L组比较，P < 0.05，n=3。
△
#
*
图7 Western blot检测达格列净对HK⁃2中STAT1、TGF⁃β1表达的影响
Figure 7 The effects of dapagliflozin on STAT1 and TGF⁃β1 expression in HK⁃2 detected by Western blot