Page 50 - 南京医科大学自然版

第44卷第10期
·1366 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年10月

响。普纳替尼可以显著抑制 FGFR1 蛋白表达及 磷酸化无明显作用。两药联合后，STAT3 的磷酸化
STAT3、STAT5的磷酸化，但对PI3K/AKT及MAPK的 水平较ATO或普纳替尼单药组进一步下降（图3）。

A 1.5 *** B DMSO ATO Ponatinib ATO+Ponatinib 丈丈丈丈丈丈丈丈 Control ***
ATO
FGFR1 mRNA expression level 1.0 0 ATO ** ** p⁃mTOR 56 kDa Protein expression level （Targets/GAPDH） 1.5 0 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈 ******
Ponatinib
ATO+Ponatinib
丈丈丈丈丈丈丈丈
*
p⁃AKT
1.0
56 kDa
AKT
p⁃PI3K
126 kDa
0.5
0.5
丈丈丈丈丈丈丈丈
PI3K
126 kDa
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
289 kDa
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
ATO+Ponatinib
丈丈丈丈丈丈丈丈
DMSO
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
Control
C Ponatinib mTOR 289 kDa p⁃AKT/AKT p⁃PI3K/PI3K p⁃mTOR/mTOR
ATO
DMSO ATO Ponatinib ATO+Ponatinib 丈丈丈丈丈丈丈丈 Ponatinib
ATO+Ponatinib
丈丈丈丈丈丈丈丈
p⁃MAPK 41 kDa 1.5 *** *** ***
MAPK 41 kDa ****** *** ** *** ***
p⁃STAT3 88 kDa Protein expression level （Targets/GAPDH） 1.0 *** *** ***
STAT3 88 kDa ***
p⁃STAT5 90 kDa 0.5
STAT5 90 kDa 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
FGFR1 92 kDa 0 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈 丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
丈丈丈丈丈丈丈丈
p⁃MAPK/MAPK p⁃STAT5/STAT5
p⁃STAT3/STAT3
GAPDH 36 kDa FGFR1
A：Ponatinib inhibited FGFR1 gene expression in KG⁃1 cells. B，C：Western blot analysis of FGFR1 protein and signal molecules phosphorylation
**
***
*
in KG⁃1 cells after ATO and ponatinib treatment. P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）.
图3 ATO及普纳替尼对FGFR1表达和信号通路的影响
Figure 3 Effects of ATO and ponatinib on the expression of FGFR1 and Western blot signaling pathways
+
phocytic leukemia，ph ALL）患者中ABL激酶区T315I
3 讨 论
突变，且具有良好的安全性及耐受性，已被美国食
EMS的发病机制与FGFR1基因重排相关。FGFR1 品及药物管理局批准用于治疗对一代或二代TKI耐
基因编码的 FGFR1 蛋白是受体酪氨酸激酶家族成 药或不耐受的 CML 或 ph ALL 患者 ［11-13］ 。由于普纳
+
员之一，拥有胞外受体结合域、跨膜区和胞内酪氨 替尼独特的多靶点特征，进一步研究已经证明其能
酸激酶催化域，当 FGFR1 基因发生断裂重排时，保 够靶向其他恶性肿瘤中的酪氨酸激酶，如 FGFR、
留胞内的酪氨酸激酶结构域，并与伙伴基因（如 SRC、PDGFR和KIT等 。
［14］
ZNF198）相互易位形成新的融合基因，使 FGFR1 酪 Ren等 ［15］ 研究发现普纳替尼在< 50 nmol/L时便
氨酸激酶发生非配体依赖性异常激活，进而激活下 能有效抑制包括KG⁃1在内的EMS模型细胞的增殖
游信号通路如 JAK/STAT 等，使细胞发生致瘤性转 以及转染 CEP110⁃FGFR1 或 BCR⁃FGFR1 融合基因
化 ［8-9］ 。KG⁃1 细胞株来源于 1 例急性髓系白血病患 的人 CD34 细胞的克隆形成，抑制 FGFR1 蛋白表达
者，该细胞株被鉴定为携带FGFR1OP2⁃FGFR1融合 及其下游信号通路PLCγ、STAT5和Src的表达，并促
基因，且保留了完整的 FGFR1 酪氨酸激酶结构域， 进凋亡增加。动物实验中，普纳替尼能显著延长
［10］
为研究EMS提供了独一无二的细胞模型 。 携带不同 FGFR1 相关融合基因的部分 EMS 移植
普纳替尼是一种多酪氨酸激酶抑制剂，可以克 模型小鼠的生存时间。然而，该研究也发现，EMS
服慢性粒细胞白血病（chronic myelocytic leukemia， 小鼠口服给药 6 h 后，普纳替尼血浆平均水平高达
+
CML）及ph阳性急性淋巴细胞白血病（ph acute lym⁃ 561 nmol/L（体外细胞实验 IC50的 10~20 倍）时，仅有