Page 27 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第2期 袁秀琛，范世杰，段伟豪，等. 负载仙茅苷的3D打印复合支架促进血管化和成骨效应的研究［J］.
2024年2月 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（2）：162-169 ·165 ·

盒进行染色。 扫描电镜结果显示，HGS/HGSC复合支架表面粗糙，
1.2.14 Transwell实验 各孔径均匀（图 1A）。在 HGSC 周围局部区域可以
使用 Transwell 小室（8 μm 孔径）进行细胞迁移 观察到由白色箭头标记的分散的CUR⁃PM。LDS法
能力评估。首先将 200 μL 的 HUVEC 悬浮液（不含 确定微球尺寸分布，结果表明微球大小主要分布在
胎牛血清的培养基，细胞密度为2.0×10 个/mL）加入 （355.00±23.89）nm附近（图1B）。
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上室，同时在下室加入SE。经过24 h孵育后，用棉签 2.2 红外光谱
轻轻擦除上层孔中的细胞，然后用 4%的甲醛固定 在 CUR 药物的红外光谱中可以看到在 1 700~
下层细胞 15 min。随后，对细胞进行结晶紫染色 1 750 cm 附近存在较强的峰波，可能是由于羧基
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30 min。通过光学显微镜观察细胞迁移情况，并对 （C=O）振动所导致；羟基磷灰石的的显著波峰分布
细胞迁移数量进行定量分析。 在 1 010 cm 主要是由于磷酸盐的拉伸振动和变形
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1.3 统计学方法 振动；SA 的⁃COO⁃的典型峰出现在 1 600 cm 和
采用 Origin 8.0 软件和 GraphPad Prism 9.1 软件 1 400 cm 附近。此外，在 3 300 cm 附近出现较
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进行统计学分析并绘图。所有数据均以均数±标准 宽的峰波可能由于氢键形成；GEL 的特征峰酰胺
差（x ± s）表示。多组间比较使用 ANOVA 单因素方 键⁃Ⅰ（amideⅠ）和酰胺键⁃Ⅱ（amide Ⅱ）分别出现
差分析，P < 0.05为差异有统计学意义。 在1 630 cm 和1 540 cm （图2A）。根据图2B，HGSC
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组可以看到 1 715 cm 附近有 CUR 特征性峰波，说
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2 结 果
明支架成功加载CUR⁃PM。
2.1 材料微观表征 2.3 生物墨水流变学分析
值得注意的是，支架的孔径大小不仅影响营养 如图 3A 所示，无论温度变化如何，HGSC 的生
交换，而且对骨和血管组织的长入也有显著影响。 物墨水在10~45 ℃的存储模量（G′）都高于损失模量

A B
HGS HGSC
20
（ % ） 15
Volume 10 5

0
0.1 1 10 100 1 000 10 000
Size（nm）

A：Scanning electron microscope images of HGS/HGSC（×30），the white arrows mark dispersed CUR⁃PM. B：Measuring microsphere diameter us⁃
ing DLS（n=3）.
图1 对支架进行微观表征
Figure 1 Microscopic characterization of the scaffolds

A B
CUR
HGS
（ % ） HA 1 715 （ % ）
Transmittance SA Transmittance HGSC 1 715

GEL
amideⅠ amide Ⅱ
3 288 1 630 1 540 1 032 3 327 1 715 1 062 1 022
4 000 3 000 2 000 1 000 4 000 3 000 2 000 1 000
Wavenumbers（cm ） Wavenumbers（cm ）
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A：FTIR spectra of different components. B：FTIR spectrum of HGS/HGSC scaffold.
图2 支架的FTIR光谱图
Figure 2 FTIR spectrum of the scaffolds