Page 28 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第2期
·166 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年2月

（G″）。然而在30 ℃时，含有HGS的生物墨水的存储 2.4 载药率、包封率、药物累积释放率、降解率和支
模量（G′）低于损失模量（G″）。此外，发现两者都表 架的力学性能评价
现出剪切变薄行为，并随着剪切速率的增加，出现 通过测得的上清药物浓度分别为0、12.5、25.0、
黏度降低现象（图3B）。 50.0、100.0、150.0 μg/mL 时的吸光度数据绘制标准

A 10 000 HGS G′ B 1 000 HGS C 1.0 y=0.005 4x+0.007 8
（ Pa ） 1 000 HGS G″ （ Pa·s ） 100 HGSC 0.8 R =0.996 4
2
HGSC G′
Moudulus G′ G″ 100 1 Viscosity 10 1 Absorbance 0.6
HGSC G″
0.4
10
0.2
0.1 0.1 0.0
10 15 20 25 30 35 40 45 0.1 1 10 100 1 000 0 50 100 150 200
Temperature（℃） Shear rates（s ） Drug concentration（μg/mL）
-1
D E F
100 100 HGS 400
CUR⁃PM （ kPa ） HGS
（ % ） 80 HGSC （ % ） 80 HGSC HGSC
Drug release 40 Degradation 40 Engineering stress 200
60
60
20
20
0 0 0
0 5 10 15 3 7 14 28 0 25 50 75 100
Time（d） Time（d） Engineering strain（%）
A：Evolution of moduli as a function of temperature for the HGS and HGSC. B：Relations between viscosity and shear rate for the different scaffolds.
C：Absorbance⁃drug concentration standard curve. D：Accumulated drug release rate（n=3）. E：Scaffold degradation rate（n=3）. F：Engineering stress⁃
strain curve（n=3）.
图3 HGS/HGSC支架的理化性质表征
Figure 3 Physicochemical characterization of HGS/HGSC scaffolds

曲线得到CUR/PCL微球对CUR的载药率为（16.98± 明显的管状结构，节点和分支数量的定量分析表
2.23）%，包封率为（33.33±3.17）%（图 3C）。在第 明，HGSC 组成管明显增多（图5B、D、E）。ALP是早
3 天时，CUR⁃PM和HGSC两组药物释放分别占总药 期骨形成的标志物，ALP 染色实验结果显示，HGSC
物的（45.10±3.51）%、（6.86±1.05）%。在第 12 天时， 组ALP活性明显高于HGS组（图6）。
CUR⁃PM的药物释放率为（82.00±4.90）%，HGSC的药
3 讨 论
物释放率为（25.70±3.10）%（图3D）。降解率曲线显
示HGS支架和HGSC支架的降解趋势相似，两组支架 在骨组织工程应用中，微球在药物控释方面发
3~7 d的降解速率均加快（图3E），7~14 d降解速率减 挥着重要作用，这对于药物靶向作用并提升生物利
缓，14~28 d降解速率再次加快。工程应力⁃应变曲线 用率具有重要意义 ［12］ 。PCL拥有良好的生物降解性
显示，HGSC支架的变异性低于HGS支架（图3F）。 和价格便宜的特性，相比高成本以及更容易产生酸
2.4 支架的毒性和增殖能力评价 性环境的聚乳酸（polylactic acid，PLA）和聚乳酸⁃乙醇
CCK⁃8 细胞增殖实验表明，在第 1 天和第 3 天， 酸共聚物（lactic⁃co⁃glycolic acid，PLGA）等合成聚合
3 组 BMSC 细胞活力接近，提示支架无明显细胞毒 物而言，PCL更适合作为药物传递系统的载体 ［13-14］ 。
性，并且在第 7 天，HGSC 组的 BMSC 细胞活力明显 CUR 是从仙茅中分离出来的天然化合物。
增高（图 4A）。EdU 荧光染色结果再次表明两组支 Wang 等 ［10］ 研究表明，它可以有效减少活性氧（reac⁃
架对BMSC细胞均无明显增殖抑制（图4B）。 tive oxygen species，ROS）的产生和脂质过氧化来保
［9］
2.5 支架的血管化和成骨潜能评价 护成骨细胞。Ma等 研究证明，CUR具有促进骨前
Transwell 实验表明 HGSC 组的 HUVEC 细胞迁 体细胞向成骨分化的作用。本研究首次将 CUR 与
移数量明显高于HGS组（图5A、C）。细胞成管实验 骨组织工程和微球载药技术相结合，希望能为骨缺
显示，与 HGS 组相比，HGSC 组 HUVEC 细胞形成了 损修复提供一个切实可行的解决方案。