Page 22 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第2期
·160 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年2月

A B C
300 mg/kg PbAc ## 9.0 600 mg/kg PbAc # 0 mg/kg PbAc
5.0 ** 8.0 * 300 mg/kg PbAc
expression miR⁃124 4.0 ## ## ** expression miR⁃124 7.0 ** ## （ ng/L ） 90 600 mg/kg PbAc * * * **
4.5
#
**
**
80
6.0
3.5
#
5.0
70
3.0
**
4.0
2.5
60
Relative of 2.0 # Relative of 3.0 # # # * # Level 50
* **
1.5
2.0
40
1.0
1.0
30
0.5
0.0 0.0 IL⁃1β 20
D1⁃1h post dose
D56⁃24h post dose
D56⁃8h post dose
D56⁃4h post dose
D1⁃24h post dose
D1⁃4h post dose
D56⁃pre dose
D7⁃8h post dose
10
D56⁃4h post dose
D56⁃pre dose
D56⁃24h post dose
D56⁃8h post dose
D7⁃8h post dose
D1⁃4h post dose
D1⁃24h post dose
D1⁃1h post dose
D1⁃pre dose D1⁃8h post dose D7⁃pre dose D56⁃1h post dose D1⁃pre dose D1⁃8h post dose D7⁃pre dose D56⁃1h post dose D1⁃pre dose D14⁃pre dose D21⁃pre dose D56⁃pre dose
0
D14⁃1h post dose
D21⁃1h post dose
D1⁃1h post dose
D56⁃1h post dose
D E
0 mg/kg PbAc 0 mg/kg PbAc
300 mg/kg PbAc 200 300 mg/kg PbAc
（ ng/L ） 1 000 * ** ** ** ** （ ng/L ） 180 **
1 200
600 mg/kg PbAc
600 mg/kg PbAc
160
140
Level 800 ** Level 120 * *
600
100
80
TNF⁃α 400 IL⁃10 60
40
200
0 20 0
D1⁃1h post dose
D56⁃1h post dose
D14⁃1h post dose
D21⁃1h post dose
D21⁃1h post dose
D1⁃pre dose D14⁃pre dose D21⁃pre dose D56⁃pre dose D1⁃pre dose D21⁃pre dose D56⁃pre dose
D1⁃1h post dose
D56⁃1h post dose
A and B：Plasma miR⁃124 expression changes of rats in the 300 mg/kg lead acetate group（A）and 600 mg/kg lead acetate group（B）at different time
**
*
points（n=5）. Compared with the baseline values of D1⁃pre dose，P < 0.05，P < 0.01；miR⁃124 expressions of pre⁃dose and post⁃dose time points on
#
##
D56 and D7 were compared with that on D1，P < 0.05，P < 0.01. C，D and E：Effect of lead acetate on IL⁃1β（C），TNF⁃α（D），and IL⁃10（E）expression
**
*
of SD rat serum（n=4）. Compared with the solvent control group，P < 0.05，P < 0.01.
图4 循环miR⁃124与炎症细胞因子的灵敏性比较
Figure 4 Sensitivity comparison of circulating miR⁃124 and inflammatory cytokines
要评估至少 3 个冻融循环的稳定性，并且冻融条件 明显变化；在肝毒性模型中，循环 miR⁃124 表达降
需要模拟预期的样本处理条件 ［21］ 。循环 miRNA 在 低。大鼠大脑中 miR⁃124 的浓度约是肝脏中 miR⁃
大多数情况下都是稳定的，但目前尚未查阅到有文 124 浓度的24 000倍 ［24］ ，与神经毒性相比，肝毒性引
献对 miR⁃124 的稳定性进行研究。在本研究中，考 起的循环 miR⁃124 的变化非常轻微，不影响神经毒
察发现 miR⁃124 在室温储存 6 h、2~8 ℃储存 24 h 性的评估。虽然常见的心脏、肝脏和肾脏毒性不影
和-70~-90 ℃储存36 d以及3个冻融循环均可以保 响循环 miR⁃124 作为生物标志物评价神经毒性，然
持稳定，为循环 miR⁃124 样本的保存和处理提供了 而 miR⁃124 参与中枢神经系统的多项生物学功能，
稳定性数据支持。 中枢神经系统疾病如脑卒中、抑郁 ［25］ 、帕金森病 ［26］
在临床用药过程中，肝脏、心脏和肾脏是常见 等也可能引起 miR⁃124 含量的改变，因此循环 miR⁃
的靶器官，有研究汇总了撤市的 133 种药物的安全 124 结合血铅浓度可以更加敏感、特异地评价铅神
性表现，发现肝毒性（27.1%）、心脏毒性（18.8%）和 经毒性。
肾毒性（10.5%）是药物停用的主要原因 ［22］ 。铅被吸 综上所述，含有miR⁃124的样本保存在室温、2~
收后首先与血液中的红细胞结合，然后分布至软组 8 ℃、-70~-90 ℃，以及冷冻条件下 3 个冻融循环时
织和骨骼中，成人软组织中铅含量最密集的部位为 均非常稳定，可满足样本生物分析稳定性验证的要
肝脏和肾脏。SD大鼠使用醋酸铅染毒后，检测到铅 求；miR⁃124在脑组织的含量远高于其他脏器，循环
大量存在于肝脏和肾脏中，并引起肝脏和肾脏的组 miR⁃124 的变化受其他脏器损伤的干扰极小，具有
织病理学改变 ［23］ 。为了排除以上器官毒性对神经 良好的组织特异性；与炎症标志物相比，循环 miR⁃
毒性检测的干扰，分别用对乙酰氨基酚、异丙肾上 124 可以更早期、更灵敏地检测铅暴露引起的神经
腺素和庆大霉素建立肝毒性、心脏毒性和肾毒性模 炎症。因此认为miR⁃124可成为评价铅神经毒性效
型，检测循环miR⁃124的表达变化。与溶媒对照组相 应的更早期、更敏感、更特异的生物标志物，可与血
比，在心脏毒性和肾毒性模型中，循环miR⁃124没有 铅浓度结合用于铅神经毒性评价。