Page 34 - 南京医科大学学报自然科学版
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第44卷第3期
               ·324 ·                          南   京 医 科       大 学      学 报                        2024年3月


              用丝线套取游离备用，远心端用丝线结扎。近心端                            抗（1∶50）、CD47 一抗（1∶400）在 4 ℃孵育过夜。室
              用动脉夹夹闭，用眼科剪在远心端剪一“V”形切口。                          温下与二抗孵育 1 h，用二氨基联苯胺染色，蒸馏水
                  经典手术方式：将3.5 mm×15.0 mm球囊导管沿                   阻断反应，封片后在显微镜下观察拍摄。
              导丝送入腹主动脉内，送入过程中松开动脉夹，球                            1.3  统计学方法
              囊进入深度约 15 cm。将球囊加压至 12~14 大气压                          所有数据均以均数±标准差（x ± s）表示，两组资
             （1 215.6~1 418.2 kPa），回拉球囊导管10 cm，然后球              料之间比较采用独立样本 t 检验，成组资料采用配
              囊减压至 0 kPa，再次送至原位置，如此反复3次，损                       对样本 t 检验，所有统计学结果均采用 GraphPad
              伤腹主动脉内皮。撤出球囊导管，迅速以动脉夹夹闭                           Prism 8进行分析，P < 0.05为差异有统计学意义。
              股动脉，结扎股动脉近心端，松开动脉夹，缝合消毒。
                                                                2  结 果
                  改良手术方式：将2.0 mm×15.0 mm球囊导管沿
              导丝送入股动脉内约2 cm，以4个大气压（405.2 kPa）                   2.1  一般情况
              扩张球囊，阻断血流，固定球囊，松开动脉夹，继续送                               正常饮食假手术组无死亡，手术组当日麻醉死
              入导丝25~30 cm，动脉夹夹闭近心端，撤出球囊。将                       亡1只，动脉夹层破裂死亡1只（改良手术组），高脂
              3.5 mm×15.0 mm 球囊导管沿导丝送入腹主动脉                      饲养过程中绝食重度营养不良死亡 1 只（经典手术

              内，送入过程中松开动脉夹，球囊进入深度为 25~                          组），剩余 12 只（经典手术组与改良手术组各 6 只）
              30 cm。将球囊加压至20个大气压（2 026.0 kPa），反                 均完成4周的高脂饮食喂养，每组均有1只出现轻度
              复前后拉动球囊30~40次，逐步回撤 10 cm，损伤腹                      趾甲溃烂。各组体重变化见表1，经典手术组与改良
              主动脉内皮。撤出球囊导管，迅速以动脉夹夹闭股                            手术组体重变化比较，差异无统计学意义（图1）。
              动脉，结扎股动脉近心端，松开动脉夹，缝合消毒。                           2.2  兔腹主动脉IVUS结果
                  术后常规护理，予青霉素2 500 U/kg肌注，连续3 d。                     各组兔腹主动脉IVUS 图像见图2。假手术组：
              1.2.3 IVUS检查                                      内膜无增厚，血流通畅，管腔无狭窄；经典手术组：
                  术后各组对应饮食喂养 4 周，麻醉后暴露切开                        内膜稍增厚模糊，未见管腔明显狭窄与斑块形成；
              左侧股三角区，穿刺左股动脉，沿导丝送入 IVUS 探                        改良手术组：内膜明显增厚，斑块突出于腔内，呈偏心
              头，在超声引导下将探头送至降主动脉左肾动脉开
                                                                             表1 各组兔造模前后体重
              口以上水平，采用机器自动控制系统，缓慢匀速回
              拉超声导管至髂总动脉分叉处，全程记录超声图                              Table 1  The weight of rabbits in each group before and
                                                                         after modeling             （kg，x ± s）
              像，保存供脱机分析。
                                                                                         Classical  Modified
              1.2.4 苏木素⁃伊红（hematoxylin⁃eosin，HE）染色                            Sham group
                                                                     Weight             intervention intervention
                  各组兔完成IVUS检测后，沿耳缘静脉注入过量                                        （n=5）
                                                                                        group（n=6） group（n=6）
              丙泊酚处死两组实验兔，开腹，动脉夹夹闭膈肌下
                                                                  Before modeling 2.30 ± 0.11 2.30 ± 0.11 2.30 ± 0.18
              近心端腹主动脉，结扎两侧肾动脉。从降主动脉与                              After modeling  2.70 ± 0.17 2.80 ± 0.21 2.90 ± 0.13
              肾动脉开口间向下切取约8 cm腹主动脉，取出腹主
              动脉。切取左肾动脉开口以下约8 cm的腹主动脉，                                    1.0
              于肝素水中冲洗后，4％多聚甲醛固定24 h。标尺测                                  （ kg ）  0.8
              量切取动脉，每段1 cm，顺序编号后进行石蜡包埋，
              每层4 μm逐层切片。部分切片HE 染色后，拍摄图                                   0.6
              像，取粥样硬化斑块最大切面，Image J 分析计算粥                                Changes of weight  0.4
              样硬化斑块最大内膜厚度、平均内膜厚度、内膜中                                      0.2
              膜面积比及血管狭窄比例（斑块面积/管腔总面积）。                                     0
                                                                                   Modified intervention group
              1.2.5 免疫组化检测                                                 Sham group
                  免疫组化检测假手术组和改良手术组血管中                                     Classical intervention group
              巨噬细胞相关蛋白 CD68 及抗吞噬蛋白 CD47 的蛋                                 图1 各组兔造模前后体重差值
              白表达水平。上述石蜡切片进行脱蜡、水化和蒸馏                             Figure 1  Weight changes of rabbits in each group before
              水冲洗。山羊血清封闭1 h后，切片分别与CD68一                                  and after modeling
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