Page 33 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第3期 华 芮，李 宸，雍 辉，等. 改良球囊损伤联合高脂饮食建立兔腹主动脉粥样硬化模型［J］.
2024年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（3）：322-328 ·323 ·

group exhibited significantly increased in maximum intimal thickness［（174.69±53.76）μm vs.（481.50±81.94）μm，P < 0.05］and
mean intimal thickness［（77.49±18.02）μm vs.（262.63±53.04）μm，P < 0.05］，a higher intimal /media area ratio［0.39±0.14 vs. 1.57±
0.30，P < 0.05］and severer vascular stenosis［（19.04±5.90）% vs.（52.13±11.31）%，P < 0.05］. The immunohistochemistry staining
revealed significantly enhanced macrophage infiltration in the modified intervention group，compared with the classical intervention
group. Moreover，a higher expression of the anti ⁃ phagocytic protein CD47 in the proliferative intima was detected in the modified
intervention group than the sham group and the classical intervention group. Conclusion：The novel rabbit model of abdominal aorta
atherosclerosis was established by the modified balloon injury and the high ⁃ cholesterol diet，further accelerating early plaque
development with an enhanced stability and reliability. A significant necrotic cell clearance impairment was detected in early plaque in
this novel model.
［Key words］ atherosclerosis；rabbit；modified balloon injury；CD47
［J Nanjing Med Univ，2024，44（03）：322⁃328］

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种以脂质 bott Vascular 公司，美国）；压力泵（Merit 公司，美
代谢障碍为基础、血管内壁脂质沉积为特征的慢性、 国），血管内超声（intravascular ultrasound，IVUS）仪
进行性动脉血管病变，严重危害人类生命健康 ［1-3］ 。 （Volcano公司，美国）；苏木素染色液（武汉赛维尔生
AS斑块破裂，可继发血栓形成，从而造成组织严重缺 物公司），伊红染色液（武汉塞维尔生物公司）；CD47
血、缺氧、甚至坏死 ［4-5］ 。建立动物模型，进一步研究 抗体（北京博奥森生物公司），CD68 抗体（Thermo
AS的发病机制，对预防心血管事件有重要意义。 Fisher Scientific 公司，美国）；丙泊酚乳状注射液（北
兔是建立 AS 模型常用的动物之一。目前研究 京费森尤斯卡比公司）；利多卡因注射液（重庆天圣
多采用球囊损伤联合高脂饮食建立兔腹主动脉粥 药业有限公司）；青霉素（石家庄华北制药股份有限
样硬化模型，这在一定程度上避免了单纯高脂饮食 公司）。
带来的耗时长、动物多脏器脂质沉积等缺陷，但仍 1.2 方法
存在建模时间长、动物死亡率高、模型不稳定等问 1.2.1 动物与饲养
题 。本研究采用一种改良的球囊损伤方式、联合 3 月龄健康雄性新西兰白兔 20 只，体重 2.0~
［6］
4 周高脂饮食建立兔腹主动脉粥样硬化模型，探讨 2.5 kg，由南京市莱芙养殖场提供［许可证编号：
其与经典手术方式在模型成功率、稳定性和斑块发 SCXK（苏）2019⁃0005，合格证号：202238952］。所有
展速度等方面的差异。 动物单笼饲养，自由饮水，保持12 h昼夜节律，恒定温
分化簇（cluster of differentiation，CD）47，也称为 度和湿度，本研究方案经过南京医科大学实验动物福
整合素相关蛋白，是广泛表达于细胞膜表面的抑制性 利伦理委员会审查批准（编号：IACUC⁃2207041）。手
［7］
受体，在免疫系统的自我识别中起关键作用 。CD47 术组15只，根据造模方式又分为经典手术组和改良
与巨噬细胞上的信号调节蛋白α（signal regulatory 手术组，麻醉、切皮、分离股动脉，经股动脉随机行
protein alpha，SIRPα）跨膜蛋白结合，向巨噬细胞传递 经典球囊损伤或改良球囊损伤，术后缝合创口，予
［8］
吞噬抑制信号 。研究报道CD47在小鼠和人类AS 高脂饮食 4 周。假手术组 5 只，同样麻醉、切皮、分
斑块的内皮和平滑肌中的表达显著上调 ［9-10］ 。然而， 离股动脉加缝合，但不行球囊损伤，术后予普通饮
CD47是否在早期AS斑块中表达并损害吞噬清除作 食4周。20只兔术前对应饲料适应性喂养1周。高
用尚缺乏研究。本研究将利用建立的兔腹主动脉早 脂饲料配制：1%胆固醇、8%猪油、7.5%蛋黄粉和
期粥样硬化模型，验证 CD47 在 AS 早期斑块中的表 83.5%普通饲料。
达，为AS的发病机制和治疗研究提供借鉴。 1.2.2 球囊损伤术构建兔腹主动脉粥样硬化模型
经耳缘静脉注射丙泊酚（6 mg/kg）麻醉，麻醉成
1 材料和方法
功表现为呼吸深慢、四肢瘫软、角膜反射迟缓。将
1.1 材料 兔仰卧位固定于手术台上，双侧股三角区局部备
TM
Maverick 2.0 mm×15.0 mm 球囊（Boston Scien⁃ 皮、消毒，利多卡因局部麻醉，在股动脉搏动明显处
tific 公司，美国），Quantum 3.5 mm×15.0 mm 球囊 切口，沿动脉走行方向切开皮肤、逐层分离筋膜肌
TM
（Boston Scientific 公司，美国），PILOT 50 导丝（Ab⁃ 肉，暴露右股动脉。游离右股动脉 4~5 cm，近心端