Page 42 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第3期
·332 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年3月

A B
O O
f d d
O x O O O x
c
O O
f O O H
+
S S N N -
c，f O COO
b 2
d a O
CH3OD
a，b
CDCI3
7 6 5 4 3 2 1 0 ppm 7 6 5 4 3 2 1 0 ppm
图2 PAC聚合物（A）和PAC（TCB）聚合物（B）的核磁共振氢谱图
Figure 2 1 H⁃NMR spectra of PAC polymer（A）and PAC（TCB）polymer（B）

PCL 胶束溶液中加入 10%的 BSA 水溶液，加入 BSA 强于OEG，纳米胶束表面形成紧密的水合层可有效阻
溶液后的PAC（TCB）和PEG⁃PCL胶束大小均无明显 碍蛋白的非特异吸附。基于蛋白稳定性的考虑，选用
变化，显示较好的胶体稳定性；然而其余两组胶束 PAC（TCB）和 PEG⁃PCL 胶束作为研究对象，且通过

的粒径发生很大变化（图 3B）。与 PAC（TCB）⁃PCL DLS测定其表面电位分别为-4.6 mV和-1.2 mV。
胶束相比，PAC（TCB）与蛋白相互作用效果更弱，可 2.3 细胞毒性、溶血实验分析
能是由于多个疏水嵌段 PCL 增加了疏水组分与蛋 MTT 法 评 价 纳 米 胶 束 的 细 胞 毒 性 ，PAC
白之间的非特异性相互作用。此外，与PAC（OEG）和 （TCB）和 PEG⁃PCL 胶束作用 HeLa 细胞 48 h 后，
PEG⁃PCL胶束溶液相比，PAC（TCB）粒径最为均一， HeLa 细 胞 的 存 活 率 均 在 80% 以 上 ，说 明 PAC
说明其抗蛋白吸附能力最强，且 TCB 表面亲水能力 （TCB）与 PEG⁃PCL 胶束浓度低于 500 mg/mL 时，细

A B
PAC（TCB） 14 PAC（TCB）
14
PAC（OEG） PAC（OEG）
12
12 PEG⁃PCL PEG⁃PCL
（ % ） 10 8 PAC（TCB） （ % ） 10 8 PAC（TCB）⁃PCL
PAC（TCB）⁃PCL
Intensity 6 Intensity 6
4 4
2 2
0 0
10 100 1 000 10 100 1 000
Particle size（nm） Particle size（nm）
A：Size distribution of polymeric micelles［inset：TEM image of PAC（TCB）micelles］. B：Changes of size of polymeric micelles after incubated with
10% BSA.
图3 DLS测定聚合物胶束粒径分布和聚合物胶束的粒径变化
Figure 3 Size distribution of polymeric micelles and size changes of polymeric micelles determined by DLS

胞毒性均较低，且两组差异均无统计学意义（P＞ 性离子修饰的纳米胶束具有较强的内吞作用。流
0.05，图4A）。为了研究PAC（TCB）纳米胶束的溶血 式 细 胞 仪 定 量 结 果 显 示 肿 瘤 细 胞 HeLa 对 PAC
率，将不同浓度的纳米胶束与红细胞共孵育 4 h， （TCB）胶束的摄取能力明显强于PEG⁃PCL（图5B），
两组差异有统计学意义（P＜0.05），但两种胶束的 这一趋势与荧光显微镜的观察结果一致。由于两
溶血率均在 5%以下（图 4B），表现出良好的生物相 性离子表面密集的正电荷与细胞膜表面的负电荷
容性。 相互作用可显著促进肿瘤细胞的摄取能力，所以两

2.4 细胞摄取 性离子对肿瘤细胞的穿透力比PEG强。
荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞对纳米胶 2.5 药代动力学实验
束的摄取能力。PAC（TCB）处理后的细胞荧光强度 为了探索胶束的体内循环特性，研究了PAC（TCB）
较 PEG⁃PCL 组强（图 5A），表明肿瘤细胞 HeLa 对两 和 PEG⁃PCL 胶束在大鼠体内的药代动力学行为。