Page 40 - 南京医科大学学报自然科学版
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第44卷第3期
               ·330 ·                          南   京 医 科       大 学      学 报                        2024年3月


              降低，易被网状内皮系统清除              ［1-6］ ，极大降低纳米颗         国），紫杉醇（paclitaxel，PTX，98%，上海安耐吉试剂
              粒在肿瘤组织和肿瘤部位的有效富集。                                 公司）；甲氧基聚乙二醇（PEG，Mn=5 000，Fluka 公
                  为了解决纳米粒子体内循环时间短的问题，其                          司，美国）经甲苯共沸蒸馏除水后使用；己内酯（ε⁃
              表面修饰亲水性配体的策略应运而生。聚乙二醇                             caprolactone，ε⁃CL，98%，Fluka公司，美国）经氢化钙
             （polyethylene glycol，PEG）因其良好的水化能力和一               （CaH2 ）干燥减压蒸馏后使用；异丙醇经常压蒸馏取
              定程度的生物惰性被认为是改善纳米药物药代动                             中间段馏分。丙烯酸酯环碳酸酯单体（acryloyl cy⁃
              力学特性的“金标准”试剂，其在纳米体系中作为首                           clic carbonate，AC）、巯基化羧基甜菜碱（thiolatedcar⁃
              选载体得到了研究者的普遍关注                 ［7-9］ 。研究表明，       boxybetaine，TCB）和巯基化寡聚乙二醇［oligo（ethyl⁃
              PEG 修饰的纳米颗粒不仅表现出优异的稳定性，还                          ene glycol），OEG］根据前期研究文献合成           ［25-26］ 。
              具有良好的蛋白抗性和较长的血液循环时间等性                             1.2  方法
              能。然而，PEG 易受氧化损伤，在反复注射后容易                          1.2.1 聚合物的合成
              产生抗PEG特异性抗体，使得PEG化纳米药物在体                               称取 AC（0.50 g，2.5 mmol）和异丙醇（3.8 mg，
              内被快速清除，因此严重限制了PEG化纳米药物的                           0.063 mmol）置于 Schlenk 瓶，加入 6 mL 无水二氯甲
              临床应用    ［10-12］ 。                                 烷（dichloromethane，DCM）充分溶解原料，然后滴加
                  两性离子因其超强的亲水性和抗污性能，被作                          催化量双（双三甲基硅基）胺锌，密闭搅拌反应 12 h
              为 PEG 的替代品而受到广泛关注              ［13-17］ 。与 PEG 相   后，滴加冰醋酸终止反应，反应液置于冰乙醚中沉
              比，两性离子通过离子溶剂化作用实现了比PEG更                           淀、过滤并真空干燥后得到聚丙烯酸酯碳酸酯
              强的水合作用，不仅减少了在血液循环中与血清或                            （polyacrylate carbonate，PAC），收率为 85%。产物经
              血小板等生物介质的非特异性吸附，抵抗细菌或哺                            高分辨核磁共振谱仪（ECX 400，Bruker 公司，德国）
              乳动物细胞黏附，逃脱了机体的免疫反应，并且长                            测定核磁氢谱图（400 MHz，CDCl3 ）。接着，将 PAC
              期使用不会产生免疫抗性             ［18-22］ 。Wang 等 ［23］ 开发了  （0.10g，0.012 5 mmol）溶于N，N⁃二甲基甲酰胺（N，N⁃
              一种基于树枝状低聚赖氨酸的两性离子大分子，用                            dimethylformamide，DMF），TCB（0.23 g，1.0 mmol）
              于蛋白质的包裹与递送，两性离子表面化修饰大幅                            溶于甲醇，向上述混合体系中加入催化量三乙胺，
              度改善了蛋白质药物的血液循环时间。Yin等                     ［24］ 报  50 ℃反应过夜。反应结束后，将反应液置于甲醇中
              道了一种低氧敏感的两性离子聚乙烯亚胺纳米系                             透析8 h后浓缩至3 mL，浓缩液置于冰乙醚中沉淀、
              统用于光动力（photodynamic therapy，PDT）治疗及               离心分离并真空干燥后得到聚合物 PAC（TCB）（收
              紫杉醇的递送，基于表面甜菜碱两性离子功能化修                            率为70%）。按照PAC的聚合方法，先后投入AC和
              饰，有效延长纳米粒子的血液循环时间，进而增加                            ε⁃CL 单体，通过开环聚合得到 PAC⁃PCL 嵌段聚合
              其在肿瘤中的富集，高效抑制肿瘤生长和转移。此                            物（收率为 83%）；同时以 PEG 为大分子引发剂，成
              外，Zhao等  ［25］ 合成了基于可降解超支化聚碳酸酯的                    功得到 PEG⁃PCL 嵌段聚合物（收率为 85%）。按照
              超小两性离子纳米胶束用于紫杉醇的递送，表面甜                            PAC（TCB）Michael 加成后聚合修饰方案，成功得到
              菜碱两性离子功能化修饰延长了纳米药物的血液                             寡聚乙二醇修饰的聚合物PAC（OEG）和甜菜碱两性
              循环时间，并增加在肿瘤部位的富集，显著提高了                            离子修饰的聚合物PAC（TCB）⁃PCL。所有聚合物化
              乳腺癌的治疗效果。                                         学结构经核磁共振氢谱验证。使用凝胶渗透色谱法
                  然而，超支化两性离子聚合物的合成过程比较复                         （gel permeation chromatography，GPC）来测定聚合物
              杂，且结构表征难度较大。本研究开发了一种简易便                           的分子量与分子量分布。
              捷的实验方案，可直接通过开环聚合和Michael加成                        1.2.2 聚合物胶束的表征与稳定性测试
              后聚合修饰，简化可降解两性离子聚碳酸酯的合成过                                PAC（TCB）纳米胶束的制备采用溶剂置换法。
              程。通过自组装形成的两性离子纳米胶束可降低纳                            将PAC（TCB）聚合物充分溶解在DMF/MeOH的混合
              米药物的非特异蛋白吸附并延长体内循环时间。                             试剂（体积比1∶1）中，超声条件下，将1 mL去离子水
                                                                逐滴加入100 mL聚合物溶液中，然后经过去离子水
              1  材料和方法
                                                                透析10 h后得到PAC（TCB）胶束。PAC（OEG）、PAC
              1.1  材料                                           （TCB）⁃PCL 和 PEG⁃PCL 纳 米 胶 束 采 用 与 PAC
                  双（双三甲基硅基）胺锌（97%，Aldrich 公司，美                  （TCB）相同的制备方法得到。所有纳米胶束利用动
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