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第44卷第4期 查 洁，杨小四，李 帆，等. S100A9基因敲除对姥鲛烷诱导小鼠狼疮肾炎的影响［J］.
2024年4月 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（04）：469-474 ·471 ·

（ΔA 标准-ΔA 空白）×C 标准 （C 标准指标准品浓度）。 计学意义。
1.2.5 血清尿素氮检测
2 结 果
按照尿素氮检测试剂盒操作说明进行：取各组
小鼠血清，按照试剂盒步骤和剂量依次加入双蒸 2.1 小鼠的体重、脾脏重量和脾脏长度变化
水、10 mmol/L 尿素氮标准应用液、待测样本、缓冲酶 结果显示，4 组小鼠（B6、B6+pristane、S100A9 -/-
液，混匀，37 ℃准确水浴10 min，再加入酚显色剂和碱 B6和S100A9 B6+pristane）之间体重差异没有统计
-/-
性次氯酸钠，充分混匀，37 ℃水浴10 min，640 nm处 学意义（图1A）。与B6鼠相比，姥鲛烷诱导的B6小
测定吸光度值A。按公式计算尿素氮浓度（mmol/L）= 鼠脾脏重量显著增加（图1B）、脾脏长度也显著增加
（A 测定-A 空白）/（A 标准-A 空白）×C 标准×N（C 标准指标准品浓 （图 1C）。与姥鲛烷诱导的 B6 小鼠相比，姥鲛烷诱
度，N为样本测试前的稀释倍数）。 导的 S100A9 B6 小鼠脾脏重量和脾脏长度均减少
-/-
1.2.6 血清抗ds⁃DNA抗体和IgG检测 ［脾脏重量：（0.178±0.014）g vs.（0.140±0.005）g；脾
取小鼠血清，参照抗 ds⁃DNA 抗体、血清 IgG 检 脏长度：（2.080±0.086）cm vs.（1.840±0.044）cm］，差
测试剂盒说明书进行检测。 异均有统计学意义（图1B、C）。
1.2.7 肾脏病理学检查 2.2 各组小鼠肾脏病理情况

注射姥鲛烷 6 个月后处死小鼠，分离肾脏，4% 野生型和 S100A9 -/- B6 小鼠的肾脏形态正常。
中性甲醛固定，5 μm石蜡切片，常规脱蜡及水化，常 与野生型 B6 鼠相比，姥鲛烷诱导的 B6 小鼠肾脏出
规HE染色，制片完毕后于光镜下观察。 现明显的狼疮样改变，HE 染色下可见肾脏肾小球
1.3 统计学方法 体积增大，肾小管上皮水肿样变性、管腔狭窄。与
应用 GraphPad Prism 8.0 软件对数据进行处理 S100A9 B6 小鼠相比，姥鲛烷诱导的 S100A9 B6
-/-
-/-
分析。服从正态分布的计量资料以均数±标准差 小鼠也表现出肾小管上皮水肿样变性、管腔狭窄等
（x ± s）表示，两组间比较采用独立样本 t 检验；多组 LN 症状（图 2）。但姥鲛烷诱导的 S100A9 B6 小鼠
-/-
间比较采用单因素方差分析。P < 0.05为差异有统 肾脏病理改变比姥鲛烷诱导的B6小鼠轻。

A B C *** *
34 0.25 *** * 2.5 *
Body weight （g） 30 Spleen weight （g） 0.15 * Spleen length （cm） 2.0
0.20
32
0.10
28
26 0.05 1.5
24 0 1.0
-/- B6
B6
B6+prisatane -/- B6+prisatane B6+prisatane -/- B6+prisatane B6+prisatane -/- B6+prisatane
-/- B6
B6
-/- B6
B6
S100A9
S100A9
S100A9
S100A9 S100A9 S100A9
*
***
A：Body weight of mice in each group. B：Spleen weight of mice in each group. C：Spleen length of mice in each group. P < 0.05， P < 0.001（n=5）.
图1 各组小鼠体重、脾脏重量和脾脏长度
Figure 1 Body weight，spleen weight and spleen length of mice in each group
-/-
-/-
B6 B6+pristane S100A9 B6 S100A9 B6+pristane

图2 各组小鼠肾脏组织HE染色（×200）
Figure 2 HE staining of mouse kidney tissues in each group（×200）