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第44卷第5期
               ·644 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2024年5月


                  结肠癌是目前全球发病率和死亡率较高的恶                           组织；经病理医师确诊为结肠癌；肿瘤标本符合免
              性肿瘤之一。根据2022年癌症统计数据，结肠癌已                          疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）染色；术前
                                           ［1］
              成为导致癌症死亡的第二大原因 。近年来我国在                            未进行抗肿瘤治疗，包括手术、放化疗、免疫治疗等
              外科手术、免疫治疗和放化疗等肿瘤综合治疗方面                            综合治疗。研究中所有肿瘤标本均按照医学伦理
              取得了显著进展，然而有研究显示美国结肠癌的发                            规范取得患者同意获取、使用。本研究经医院医学
              病率和死亡率有呈逐年下降的趋势，中国结肠癌的                            伦理委员会审批通过（编号：2023⁃KY⁃217⁃01），并取
              发病率和死亡率却在持续上升 。原因在于结肠癌                            得患者知情同意。
                                         ［2］
              发病机制复杂，起病隐匿且易发生转移，导致患者的                           1.2  方法
              预后较差。铁死亡是一种铁依赖性调控细胞死亡形                            1.2.1  IHC染色
              式，参与多种病理过程，如肿瘤、缺血再灌注损伤和                                对257例结肠癌患者的肿瘤及瘤旁组织石蜡样
              神经系统疾病，其特点是铁依赖性脂质过氧化，并受                           本切片进行 IHC 染色。使用二甲苯进行切片脱蜡，
              谷胱甘肽过氧化物酶 4（glutathione peroxidase 4，             过氧化氢封闭内源性过氧化物酶；于高温高压
              GPX4）调节  ［3-4］ 。花生四烯酸12⁃脂氧合酶（arachidonate         EDTA 抗原修复液中煮沸 2 min，使用 PBS 缓冲液洗
              12⁃lipoxygenase，ALOX12）是脂氧合酶家族中具有重                涤3次后擦干。ALOX12抗体（1∶200）4 ℃孵育12 h。
              要地位的成员之一，通过代谢花生四烯酸产生具有                            室温平衡 30 min，PBS 洗涤 3 次后加入 HRP 标记通
              生物活性的类花生酸，在血管生成、炎症反应、动脉                           用二抗，室温下孵育40 min，DAB显色试剂盒显色及
              硬化、再灌注损伤、肿瘤增殖等方面发挥着重要作                            苏木素复染，中性树脂封片，显微镜下观察评估目
              用 。ALOX12是介导脂质过氧化的核心酶，并且与                         的蛋白表达情况并收集图像。本实验所用ALOX12
                ［5］
                                                         ［6］
              GPX4 显著相关，是介导细胞铁死亡的关键基因 。                         抗体、MGMT 抗体、EGFR 抗体、Her⁃2 抗体、Ki⁃67 抗
              有研究显示，ALOX12能抑制活性氧（reactive oxygen                体、MSH2抗体、MSH6抗体、PMS2抗体、MLH1抗体、
              species，ROS）诱导的铁死亡，并消除 p53 介导的肿                   VEGF抗体、VEGFR2抗体等均购自福州迈新生物技
              瘤抑制，从而促进肿瘤的进展 。有报道，在胃癌中                           术开发有限公司。EDTA 抗原修复液、DAB 显色试
                                        ［7］
              ALOX12 过表达增强了胃癌细胞的迁移和侵袭能                          剂盒、PBS缓冲液均购自北京中杉金桥有限公司。
              力，可能是通过增加Wnt/β⁃catenin 信号通路的主要                         ALOX12阳性染色定位于胞浆。染色强度评分
              下游靶点TCF1、Cyclin D1和c⁃Myc的水平来促进肿                   标准为：无染色，0分；染色较弱（浅黄色），1分；染色
              瘤细胞的上皮间充质转化（epithelial⁃mesenchymal                较深（深黄色），2分；染色强（棕黄色），3分。对于阳
              transition，EMT） 。然而 ALOX12 在结肠癌中的研                性细胞百分比的评分标准为：<10%计1分；≥10%且
                            ［8］
              究较少，且 ALOX12 与结肠癌的关系及相互作用机                        < 50%计 2 分；≥50%且<75%计 3 分；≥75 计 4 分。
              制尚不明确，本研究旨在探讨 ALOX12 在结肠癌患                        总评分为染色强度评分×阳性细胞的百分比评分
              者临床标本的表达，并分析与临床病理资料和生存                           （0~12分），0分为阴性（0），1~4分为弱阳性（+），5~8分
              预后的关系，期望为早期发现和治疗结肠癌提供新                            为阳性（++），9~12分为强阳性（+++） 。将 0/+定义
                                                                                                 ［9］
              的视角。                                              为 ALOX12 低表达，++/+++定义为 ALOX12 高表达
                                                               （图1）。
              1 对象和方法
                                                                1.2.2  随访及评价
              1.1  对象                                                通过查阅患者的病历资料、门诊复查或电话等
                  本研究纳入了 2016 年 6 月—2019 年 10 月在南               方式随访，随访截止日期为 2023 年 6 月，随访时间
              京医科大学第二附属医院接受诊治的257例结肠癌                           6~60 个月，其中死亡 165 例，存活 79 例，失访 13 例。
              患者。收集患者临床信息包括年龄、性别、肿瘤原                            随访过程用于研究分析患者的5年总生存期（overall
              发部位、病理分期及淋巴结转移等。257例患者中，                          survival，OS）变化，OS 定义为患者接受手术治疗开
              男 161 例，女 96 例；年龄 25~95 岁，中位年龄 64 岁，              始直至患者死亡或随访结束时间。
              ≤64岁132例，>64岁125例；肿瘤位于右半结肠95例，                    1.3  统计学方法
              左半结肠 162 例；病理分期Ⅰ+Ⅱ期 85 例，Ⅲ+Ⅳ期                          本研究数据均使用SPSS27.0软件包进行分析，
              172 例；有淋巴结转移 165 例，无淋巴结转移 92 例。                   并使用GraphPad Prism绘制统计图表。计数资料以
              纳入标准：首次就诊手术患者并保留手术切除肿瘤                            频数和百分比表示，数据分析采用卡方检验或Fisher
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