Page 11 - 南京医科大学自然版

第44卷第6期 徐若薇，韩一芳，周婷婷，等. 全人源抗大别班达病毒抗体的制备及功能鉴定［J］.
2024年6月 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（6）：743-752 ·747 ·

DBV⁃NP的抗体滴度都较高，但与DBV⁃Gn的结合能 2号样本分离得到的PBMC数量为1.6×10 个/mL，
7
力不如其他样本。综合血浆抗体效价和细胞活性， 磁珠富集 B 细胞数量为 5.65×10 个/mL，细胞活性
5
选取 2 号和 10 号样本进行单个 B 细胞分离和 BCR 76% ，流 式 检 测 显 示 磁 珠 富 集 后 B 细 胞 比 例 为
测序。 99.4%，分泌 IgG 抗体的 B 细胞比例为 14.1%，与
CD19⁃APC 抗体用于标记 B 细胞，IgM⁃BV 605 TM Gn⁃FITC结合的B细胞比例为1.21%。
TM 10 号样本流式检测显示磁珠富集后 B 细胞
抗体与 IgG⁃BV 421 抗体用于分选出能够分泌 IgM
和 IgG 的 B 细胞。通过 CD27⁃APC/Cyanine7 抗体和 比 例 为 77.4% ，分 泌 IgG 抗 体 的 B 细 胞 比 例 为
Gn⁃FITC抗体，间接分选出能与DBV⁃Gn结合的记忆 22.5% ，与 Gn⁃FITC 结 合 的 B 细 胞 比 例 为 0.11%
B 细胞。与健康志愿者流式细胞仪分析结果相比， （图 3）。
SFTS恢复期患者PBMC中能够分选出与DBV⁃Gn特 2.5 单个B细胞的BCR测序
异结合的B细胞。 流式细胞术共分选了21个Gn特异性单个B细

（×10 ）
4
20 10 5 10 5
Healthy control SSC⁃A 15 CD19 + IgM⁃BV605 10 4 3 IgG ，IgM - CD27⁃APC/Cy7 10 4 3 Gn ，CD27 +
+
10
99.6%
4.45%
10
10
+
5
-10 0 3 -10 0 3 0
0
3
3
3
-10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5
（×10 ） CD19⁃APC IgG⁃BV421 Gn⁃FITC
4
20 10 5 10 5
15 4 4
2 CD19 + 10 + - 10
Sample SSC⁃A 10 99.4% IgM⁃BV605 10 3 IgG ，IgM CD27⁃APC/Cy7 10 3 Gn ，CD27 +
14.1%
+
5 0 0 1.21%
-10 3 -10 3
0
3
3
3
-10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5
（×10 ） CD19⁃APC IgG⁃BV421 Gn⁃FITC
4
20 5
10 5 10
15 10 4 IgG ，IgM - 10 4
Healthy contrd SSC⁃A 10 5 CD19 + IgM⁃BV605 10 3 10.0% CD27⁃APC/Cy7 10 3
+
96.5%
+
0 0 0 Gn ，CD27 +
0.023%
-10 3 -10 3
3
3
3
-10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5
（×10 ） CD19⁃APC IgG⁃BV421 Gn⁃FITC
4
25 5
10 5 10
20
+
10 15 CD19 + 10 4 IgG ，IgM - 10 4
22.5%
Sample SSC⁃A 10 77.4% IgM⁃BV605 10 3 CD27⁃APC/Cy7 10 3 + +
0 0 Gn ，CD27
5 0.11%
-10 3 -10 3
0
3
3
3
-10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5 -10 0 10 3 10 4 10 5
CD19⁃APC IgG⁃BV421 Gn⁃FITC
图3 流式细胞仪分选Gn特异性单个B细胞
Figure 3 Flow cytometry separation of Gn specific single B cells