Page 18 - 南京医科大学自然版

第44卷第7期
·902 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年7月

expressions of interleukin⁃6（IL⁃6），monocyte chemotactic protein⁃1（MCP⁃1），and plasminogen activator inhibitor⁃1（PAI⁃1）were
significantly reduced in the O 2⁃AZM group compared to the O 2⁃Saline group（P < 0.05），while the expression of cytokine induced
neutrophil chemoattractant⁃1（CINC⁃1）showed no significant difference（P > 0.05）. ELISA analysis further confirmed a significant
reduction in IL⁃6 levels in the O2⁃AZM group compared to the O 2⁃Saline group（P < 0.05）. Immunohistochemical analysis revealed a
marked reduction in the accumulation of macrophages and neutrophils in the lung tissues of the O 2⁃AZM group，along with an increase
in pulmonary vascular density and the count of secondary alveolar septa，all of which were statistically significant. Furthermore，HE
pathological examination revealed a significantly shortened MLI in the O 2⁃AZM group compared to the O 2⁃Saline group，indicating a
statistically significant difference（P < 0.05）. Conclusion：AZM reduces the release of inflammatory factors and chemokines in lung
tissues of neonatal rats exposed to hyperoxia，inhibits the chemotaxis or recruitment of inflammatory cells，and alleviates BPD⁃like lung
injury in neonatal rats after hyperoxia exposure.
［Key words］ azithromycin；bronchopulmonary dysplasia；hyperoxia exposure；inflammation；lung development
［J Nanjing Med Univ，2024，44（07）：901⁃908］

支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia， BPD的有效性及潜在的作用机制。
BPD）是早产儿最常见的并发症之一，据报道，我国
1 材料和方法
［1］
超未成熟儿 BPD 的发生率为 74.2% ，这使得婴幼
儿死亡风险增加，并使患儿更易罹患慢性肺部疾病及 1.1 材料
心血管疾病、神经系统发育延迟及生长发育障碍 。 1.1.1 动物
［2］
但到目前为止，BPD 仍然没有有效的治疗方法。 15只健康清洁的SD孕鼠由南方医科大学实验动
BPD 的发病机制尚不明确，可能因为感染、炎症、氧 物中心提供，动物许可证号［SCXK（粤）2021⁃0041］。
中毒、机械通气以及其他因素阻碍了出生后肺的成 将动物饲养于 SPF 级实验动物房，饲养温度为
［3］
熟 。抗炎因子及促炎因子的失衡是影响肺泡生成 20~24 ℃，湿度为 50%~60%，新生 SD 大鼠作为实验
和肺血管发育的重要因素 ［4-5］ 。既往研究也发现，巨 对象。本实验通过中国科学院深圳先进技术研究
噬细胞及中性粒细胞从血管向肺组织聚集是 BPD 院实验动物管理和使用委员会批准，伦理审核批件
［6］
的一个特征性表现 。炎症对BPD的发生发展起到 编号：SFYLS［2021］019。
重要作用 ［5，7］ 。 1.1.2 试剂
研究表明，糖皮质激素可一定程度提高机械通 AZM（辉瑞公司，美国）、鼠单克隆抗α⁃平滑肌肌
气拔管成功率，但其对BPD的有效性仍不确切 ，而 动蛋白（a⁃smooth muscle actin，a⁃SMA）抗体（ A2547，
［8］
且糖皮质激素也会增加近远期严重的不良反应，如 Sigma⁃Aldrich 公司，美国）、兔多克隆抗血管性血友
高血糖、高血压、自发性肠穿孔和中枢神经系统发 病因子（von Willebrand factor，vWF）抗体（A0082，
［9］
育落后等 ，因此，临床上并未将糖皮质激素作为 Dako Cytomation公司，丹麦）、抗CD68抗体（ab31630，
BPD 的常规预防用药。阿奇霉素（azithromycin， Abcam 公司，美国）、抗髓过氧化物酶（myeloperoxi⁃
AZM）是一种大环类酯类抗生素，它兼具抗感染及 dase，MPO）抗 体（ab208670，Abcam 公 司 ，美 国）、
抗炎作用 ［10-11］ 。它可通过抑制核因子⁃κB 发挥独特 TRIzol试剂（#15596026，Invitrogen公司，美国）、HRP
的免疫调节作用来限制促炎细胞因子如白介素 标记山羊抗兔二抗（ab6728，Abcam 公司，美国）、
（interleukin，IL）⁃6 和 IL⁃8 的产生来减少肺部炎症， HRP 标记兔抗小鼠二抗（ab6721，Abcam 公司，美
它还可以抑制中性粒细胞迁移，通过改变巨噬细胞 国）、1% BSA（A1933，Sigma⁃Aldrich 公司，美国）、
的极化状态增加巨噬细胞的吞噬作用而发挥抗炎 NovaRed（K⁃4800，Vector 公司，美国）、cDNA 合成试
作用 ［12］ 。有研究显示，预防性应用 AZM 可以通过 剂盒（K1622，Thermo Scientific 公司，美国）、内源性
清除解脲脲原体（ureaplasma urealyticum，UU），并 过氧化物酶强力封闭液（上海碧云天生物技术有限
抑制肺部炎症反应，从而降低BPD的发病率和死亡 公司）、HE 染色试剂盒（北京索莱宝科技有限公
率 ［13］ ，然而，AZM 对治疗BPD 有效性仍存在争议 。 司）、大鼠白介素⁃6（interleukin⁃6，IL⁃6）ELISA Kit
［8］
本研究通过建立 BPD 新生大鼠模型，探讨 AZM 对 （#PI328，上海碧云天生物技术有限公司）、大鼠单核