Page 14 - 南京医科大学自然版

第44卷第7期
·898 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年7月

A Aggregate Monomer Merge B ROS

Young Young

Old Old

Put Put

C D E
* *** ***
5 4 *** 1.5 ** 60 ***
Aggregate/Monomer 3 2 * （μmol/L） ATP level 1.0 The relative fluorescence intensity of ROS 40

20
0.5
0 1 0 0
Young Old Put Young Old Put Young Old Put
A：JC⁃1 fluorescence signal in MⅡ⁃stage oocytes（scale bars=100 μm）. B：Representative images of ROS levels in MⅡ⁃stage oocytes（scale bars=
100 μm）. C：Statistical analysis of JC⁃1 fluorescence signal in figure 7A（n=15）. D：Statistical analysis of ATP content in MⅡ⁃stage oocytes（n=20）.
*
**
E：Quantitative analysis of ROS fluorescence signal in figure 7B（n=15）. P < 0.05，P < 0.01 and *** P < 0.001.
图7 MⅡ期卵母细胞线粒体功能
Figure 7 mitochondrial function of MⅡ⁃stage oocytes

体轴的膜间距MAM 变化反映了内质网应激机制的 过氧化处理的小鼠卵母细胞内 MAM 数量增加，
激活，从而产生Ca 超载，导致线粒体的损伤。线粒 MAM间距离缩短 ［18］ 。在此基础上，本研究使用自然
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体相关内质网膜MAM 已在骨骼肌细胞、心肌细胞、 衰老模型，验证了高龄小鼠卵母细胞中 MAM 数量
神经元、肾小管上皮细胞 ［14］ 、卵巢癌细胞等多种细 增加，和 MAM 间距离缩短。虽然组成 MAM 部分的
胞中被验证，卵母细胞中也存在 MAM。MAM 在衰 线粒体长度占比未见显著差异，可能是由于线粒体
老相关疾病，如神经退行性病变、糖尿病相关病变、 肿胀变形，周长增加导致。
心血管疾病、肿瘤以及代谢疾病中多有报道 ［15］ 。在 内质网是细胞内重要的Ca 储存仓库，也是线粒
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阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化和帕金森病等神经 体中Ca 的重要来源。内质网和线粒体间相互靠近，
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退行性病变中，MAM是其关键分子和细胞中枢。在 即在 MAM 距离范围内，形成独特的高 Ca 微域 ［19］ 。
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各种神经退行性病变中发现MAM 参与调节多种细 IP3R⁃GRP75⁃VDAC1 复合体是 MAM 界面 Ca 传输
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胞功能失调或不足的生物反应过程，包括线粒体自 的主要工具 ［11］ 。在猪卵母细胞中敲除 IP3R1，线粒
噬、Ca 转移、磷脂合成等。 体 Ca 浓度显著降低 ［20］ 。在卵巢癌细胞系中敲低
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通常以线粒体中邻近内质网部分的长度与其周 GRP75显著降低卵巢癌细胞线粒体Ca 水平，反之，
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长的比值，和内质网和线粒体间的距离作为判断 过表达GRP75显著增强了它们在MAM中的相互作
MAM 数量和内部联系程度的指标 ［16］ 。课题组前期 用，且线粒体Ca 水平升高 ［11］ 。本研究发现，高龄小
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研究已证明：小鼠卵母细胞中存在MAM 结构 ［17］ ，且 鼠 MⅡ期卵母细胞内 IP3R 和 GRP75 在基因水平的