Page 10 - 南京医科大学自然版
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第44卷第7期
·894 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年7月
Prism 8进行分析,P < 0.05为差异有统计学意义。 一极体排出率显著下降,添加腐胺后显著升高(P <
0.05,图 1B)。高龄小鼠卵母细胞受精后二细胞率
2 结 果
有下降趋势,但无显著性差异(图 1C)。高龄小鼠卵
2.1 腐胺促进高龄小鼠卵母细胞成熟 母细胞囊胚率显著下降,而腐胺组囊胚率显著提高
观察各组小鼠卵母细胞体外培养和体外受精情 (P < 0.05,图 1D),提示IVM培养液中添加腐胺能够
况(图 1A)。与年轻组比较,高龄组小鼠卵母细胞第 促进高龄小鼠卵母细胞核成熟和胚胎发育。
A MⅡ 2⁃cell Blastocyst
Young
Old
Put
B C D
(%) 100 *** ** * (%) 100 (%) 80 *** * *
Percent of PB1 extrusion 60 2⁃cell Percent of 60 Percent of blastocyst 40
80
80
60
40
40
20
20
20
0
0
0
Put
Young Old
Young Old
Young Old
Put
Put
A:Representative images of the MⅡ,2⁃cell,and blastocyst stages of oocytes(scale bars=200 μm). B-D:The percent of the PB1 extrusion(B),
**
*
2⁃cell(C),and blastocyst formation(D)in the Young,Old,and Put groups(n=20). P < 0.05,P < 0.01 and *** P < 0.001. PB1:first polar body.
图1 卵母细胞成熟和胚胎培养
Figure 1 Oocyte maturation and blastocyst formation
2.2 腐胺改善高龄小鼠卵母细胞皮质颗粒的分布 2.3 腐胺改善高龄 MⅡ期卵母细胞纺锤体组装和
使用 LCA⁃FITC 染色评估 MⅡ期卵母细胞皮质 染色体排列
颗粒(cortical granule,CG)的分布(图 2A)。在年轻 通过免疫荧光染色图像评估发现,MⅡ期的高
组MⅡ期卵母细胞中,除了染色体附近无CG结构域 龄卵母细胞中存在染色体错位和纺锤体结构紊乱
外,CG均匀分布在卵母细胞皮质下区域。但在高龄 (图 3A)。与年轻卵母细胞相比,高龄卵母细胞MⅡ
组MⅡ期卵母细胞中,CG失去正常定位(P < 0.001), 期纺锤体异常率(P < 0.001,图 3B)和染色体异常率
且荧光信号强度显著减弱(P < 0.001)。补充腐胺可 (P < 0.01,图 3C)显著提高,但在补充腐胺后均显著
显著挽救 CG 的错误定位(P < 0.01),提高 CG 的荧 下降(P < 0.05,图 3A~C)。这些结果表明腐胺可通
光信号强度(P < 0.05,图 2B~C)。这表明腐胺可促 过保持正确的纺锤体和染色体结构提高高龄小鼠
进高龄卵母细胞胞质成熟。 卵母细胞的成熟能力。