Page 10 - 南京医科大学自然版
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第44卷第7期
               ·894 ·                          南   京 医 科       大 学      学 报                        2024年7月


              Prism 8进行分析,P < 0.05为差异有统计学意义。                    一极体排出率显著下降,添加腐胺后显著升高(P <
                                                                0.05,图 1B)。高龄小鼠卵母细胞受精后二细胞率
              2 结    果
                                                                有下降趋势,但无显著性差异(图 1C)。高龄小鼠卵
              2.1  腐胺促进高龄小鼠卵母细胞成熟                               母细胞囊胚率显著下降,而腐胺组囊胚率显著提高
                  观察各组小鼠卵母细胞体外培养和体外受精情                         (P < 0.05,图 1D),提示IVM培养液中添加腐胺能够
              况(图 1A)。与年轻组比较,高龄组小鼠卵母细胞第                         促进高龄小鼠卵母细胞核成熟和胚胎发育。

                              A         MⅡ                    2⁃cell              Blastocyst



                             Young









                             Old






                             Put





                           B                        C                        D
                               (%)  100  *** **  *     (%)  100                (%)  80  ***  *  *
                               Percent of PB1 extrusion  60  2⁃cell Percent of  60  Percent of blastocyst  40
                                 80
                                                         80
                                                                                60
                                                         40
                                 40
                                                                                20
                                 20
                                                         20
                                                          0
                                 0
                                                                                 0
                                              Put
                                                            Young Old
                                    Young Old
                                                                                    Young Old
                                                                                              Put
                                                                      Put
                 A:Representative images of the MⅡ,2⁃cell,and blastocyst stages of oocytes(scale bars=200 μm). B-D:The percent of the PB1 extrusion(B),
                                                                         **
                                                                  *
              2⁃cell(C),and blastocyst formation(D)in the Young,Old,and Put groups(n=20). P < 0.05,P < 0.01 and  *** P < 0.001. PB1:first polar body.
                                                  图1 卵母细胞成熟和胚胎培养
                                         Figure 1 Oocyte maturation and blastocyst formation
              2.2  腐胺改善高龄小鼠卵母细胞皮质颗粒的分布                          2.3  腐胺改善高龄 MⅡ期卵母细胞纺锤体组装和
                  使用 LCA⁃FITC 染色评估 MⅡ期卵母细胞皮质                    染色体排列
              颗粒(cortical granule,CG)的分布(图 2A)。在年轻                  通过免疫荧光染色图像评估发现,MⅡ期的高
              组MⅡ期卵母细胞中,除了染色体附近无CG结构域                           龄卵母细胞中存在染色体错位和纺锤体结构紊乱
              外,CG均匀分布在卵母细胞皮质下区域。但在高龄                          (图 3A)。与年轻卵母细胞相比,高龄卵母细胞MⅡ
              组MⅡ期卵母细胞中,CG失去正常定位(P < 0.001),                    期纺锤体异常率(P < 0.001,图 3B)和染色体异常率
              且荧光信号强度显著减弱(P < 0.001)。补充腐胺可                     (P < 0.01,图 3C)显著提高,但在补充腐胺后均显著
              显著挽救 CG 的错误定位(P < 0.01),提高 CG 的荧                  下降(P < 0.05,图 3A~C)。这些结果表明腐胺可通
              光信号强度(P < 0.05,图 2B~C)。这表明腐胺可促                    过保持正确的纺锤体和染色体结构提高高龄小鼠
              进高龄卵母细胞胞质成熟。                                      卵母细胞的成熟能力。
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