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第44卷第8期 罗 浙,练雷栋,胡珂琦,等. CPO⁃PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞体外增殖及成骨
2024年8月 分化作用的影响[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2024,44(8):1051-1061 ·1055 ·
A B C D
3 2.0 *** 4 *** 1.5
*** 1.5 3
Relative area of ALP 2 1 * * Relative area of ALP 1.0 Relative area of ALP 2 1 *** Relative area of ALP 1.0
0.5
0.5
0 0 0 0
Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00% Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00% Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00% Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%
CPO⁃PCL CPO⁃PCL CPO⁃PCL CPO⁃PCL
A:Hypoxia and osteogenic differentiation culture(Day 14). B:Hypoxia and normal culture(Day 14). C:Normoxia and osteogenic differentiation
*
culture(Day 14). D:Normoxia and normal culture(Day 14). Compared with the control group,P < 0.05 and *** P < 0.001(n=3).
图4 ALP检测缺氧或常氧培养14 d不同浓度CPO⁃PCL对ADMSC成骨分化培养和正常培养的影响
Figure 4 The effects of different concentrations of CPO⁃PCL on ADMSC with osteogenic differentiation culture or normal
culture under hypoxia or normoxia for 14 days detected by ALP
CPO⁃PCL 微粒可促进 ADMSC 成骨分化;常氧正常 浓度增大,钙结节生成量增加,诱导分化成骨形成
培养条件下,CPO⁃PCL 微粒浓度对 ADMSC 成骨分 增加;而缺氧正常培养结果显示各浓度微粒组橘红
化没有显著影响。 色复合物形成差异无统计学意义(图5A、B)。
2.3 不同浓度CPO⁃PCL微粒对ADMSC中钙结节生 常氧成骨分化培养 7 d,随着微粒浓度的增加,
成量的影响 ADMSC 内 橘 红 色 复 合 物 形 成 增 多 ,在 0.50% 和
缺氧成骨分化培养 7 d,随着 CPO⁃PCL 微粒浓 1.00%浓度下达到显著水平(P < 0.01),显著诱导分化
度的增加,莤素红染色实验显示,ADMSC 内橘红色 成骨细胞;常氧正常培养,各浓度CPO⁃PCL微粒没有
复合物形成增多,提示钙结节生成量增加,在 CPO⁃ 诱导ADMSC向成骨细胞分化的能力(图5C、D)。
PCL 微粒 0.50%和 1.00%浓度下达到显著水平(P < 缺氧成骨分化培养 14 d,橘红色复合物随着
0.05),表明在缺氧成骨分化培养条件下,随着微粒 CPO⁃PCL浓度的增加而增加,且0.25%~1.00% CPO⁃
A B C D
15 2.5 25 2.5
*** ***
Relative area of alizarin red S 10 5 * Relative area of alizarin red S 2.0 Relative area of alizarin red S 20 ** Relative area of alizarin red S 2.0
1.5
15
1.5
10
1.0
1.0
0 0.5 0 5 0 0.5 0
Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00% Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00% Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00% Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%
CPO⁃PCL CPO⁃PCL CPO⁃PCL CPO⁃PCL
A:Hypoxia and osteogenic differentiation culture(Day 7). B:Hypoxic and normal culture(Day 7). C:Normoxia and osteogenic differentiation cul⁃
*
**
ture(Day 7). D:Normoxia and normal culture(Day 7). Compared with the control group,P < 0.05,P < 0.01 and *** P < 0.001(n=3).
图5 茜素红染色检测缺氧或正常氧培养7 d不同浓度CPO⁃PCL对ADMSC钙结节生成量的影响
Figure 5 The effects of different concentrations of CPO⁃PCL on ADMSC with osteogenic differentiation culture or normal
culture under hypoxia or normoxia for 7 days detected by alizarin red staining
PCL 微粒浓度下钙结节生成显著增加,说明在该浓 照组相比,不同浓度CPO⁃PCL微粒处理的ADMSC中
度下易诱导分化成骨形成。缺氧正常培养 14 d,与 橘红色复合物差异无统计学意义,提示并不会诱导
对照组相比,不同浓度的CPO⁃PCL微粒并不会诱导 ADMSC向成骨细胞分化(图6C、D)。
ADMSC向成骨细胞分化(图6A、B)。 综上所述,在缺氧成骨分化培养条件下,0.50%~
常氧成骨分化培养14 d,与对照组相比,随着微 1.00% CPO⁃PCL 微粒对ADMSC成骨有诱导作用;在
粒浓度的增加,ADMSC 中橘红色复合物增多,且在 缺氧正常培养条件下CPO⁃PCL 微粒对ADMSC成骨
1.00%时达到显著水平;而常氧正常培养14 d,与对 不具有诱导作用;在常氧成骨分化培养条件下,