Page 27 - 南京医科大学自然版
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第44卷第8期        罗  浙,练雷栋,胡珂琦,等. CPO⁃PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞体外增殖及成骨
                  2024年8月             分化作用的影响[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2024,44(8):1051-1061                  ·1055 ·


                A                       B                       C                        D
                   3                       2.0             ***       4             ***       1.5
                                  ***      1.5                       3
                   Relative area of ALP  2 1  *  *  Relative area of ALP  1.0  Relative area of ALP  2 1  ***  Relative area of ALP  1.0


                                                                                             0.5
                                           0.5
                   0                         0                       0                        0
                    Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%

                          CPO⁃PCL                  CPO⁃PCL                 CPO⁃PCL                   CPO⁃PCL
                   A:Hypoxia and osteogenic differentiation culture(Day 14). B:Hypoxia and normal culture(Day 14). C:Normoxia and osteogenic differentiation
                                                                           *
                culture(Day 14). D:Normoxia and normal culture(Day 14). Compared with the control group,P < 0.05 and  *** P < 0.001(n=3).
                          图4 ALP检测缺氧或常氧培养14 d不同浓度CPO⁃PCL对ADMSC成骨分化培养和正常培养的影响
                Figure 4  The effects of different concentrations of CPO⁃PCL on ADMSC with osteogenic differentiation culture or normal
                        culture under hypoxia or normoxia for 14 days detected by ALP

                CPO⁃PCL 微粒可促进 ADMSC 成骨分化;常氧正常                     浓度增大,钙结节生成量增加,诱导分化成骨形成
                培养条件下,CPO⁃PCL 微粒浓度对 ADMSC 成骨分                     增加;而缺氧正常培养结果显示各浓度微粒组橘红
                化没有显著影响。                                          色复合物形成差异无统计学意义(图5A、B)。

                2.3  不同浓度CPO⁃PCL微粒对ADMSC中钙结节生                         常氧成骨分化培养 7 d,随着微粒浓度的增加,
                成量的影响                                             ADMSC 内 橘 红 色 复 合 物 形 成 增 多 ,在 0.50% 和
                    缺氧成骨分化培养 7 d,随着 CPO⁃PCL 微粒浓                   1.00%浓度下达到显著水平(P < 0.01),显著诱导分化
                度的增加,莤素红染色实验显示,ADMSC 内橘红色                         成骨细胞;常氧正常培养,各浓度CPO⁃PCL微粒没有

                复合物形成增多,提示钙结节生成量增加,在 CPO⁃                         诱导ADMSC向成骨细胞分化的能力(图5C、D)。
                PCL 微粒 0.50%和 1.00%浓度下达到显著水平(P <                      缺氧成骨分化培养 14 d,橘红色复合物随着
                0.05),表明在缺氧成骨分化培养条件下,随着微粒                         CPO⁃PCL浓度的增加而增加,且0.25%~1.00% CPO⁃


                A                       B                       C                       D
                    15                       2.5                     25                      2.5
                                    ***                                              ***
                  Relative area of  alizarin red S  10 5  *  Relative area of  alizarin red S 2.0  Relative area of  alizarin red S 20  **  Relative area of  alizarin red S 2.0
                                                                                             1.5
                                                                     15
                                             1.5
                                                                     10
                                                                                             1.0
                                             1.0
                     0                       0.5 0                    5 0                    0.5 0
                      Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%
                            CPO⁃PCL                 CPO⁃PCL                  CPO⁃PCL                 CPO⁃PCL
                   A:Hypoxia and osteogenic differentiation culture(Day 7). B:Hypoxic and normal culture(Day 7). C:Normoxia and osteogenic differentiation cul⁃
                                                                        *
                                                                               **
                ture(Day 7). D:Normoxia and normal culture(Day 7). Compared with the control group,P < 0.05,P < 0.01 and  *** P < 0.001(n=3).
                          图5 茜素红染色检测缺氧或正常氧培养7 d不同浓度CPO⁃PCL对ADMSC钙结节生成量的影响
                Figure 5  The effects of different concentrations of CPO⁃PCL on ADMSC with osteogenic differentiation culture or normal
                        culture under hypoxia or normoxia for 7 days detected by alizarin red staining

                PCL 微粒浓度下钙结节生成显著增加,说明在该浓                          照组相比,不同浓度CPO⁃PCL微粒处理的ADMSC中
                度下易诱导分化成骨形成。缺氧正常培养 14 d,与                         橘红色复合物差异无统计学意义,提示并不会诱导
                对照组相比,不同浓度的CPO⁃PCL微粒并不会诱导                         ADMSC向成骨细胞分化(图6C、D)。
                ADMSC向成骨细胞分化(图6A、B)。                                  综上所述,在缺氧成骨分化培养条件下,0.50%~
                    常氧成骨分化培养14 d,与对照组相比,随着微                       1.00% CPO⁃PCL 微粒对ADMSC成骨有诱导作用;在
                粒浓度的增加,ADMSC 中橘红色复合物增多,且在                         缺氧正常培养条件下CPO⁃PCL 微粒对ADMSC成骨
                1.00%时达到显著水平;而常氧正常培养14 d,与对                       不具有诱导作用;在常氧成骨分化培养条件下,
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