Page 30 - 南京医科大学自然版
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第44卷第8期
               ·1058 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2024年8月


              A
                                                 CPO⁃PCL
                         Control   0.10%     0.25%    0.50%     1.00%       Normoxia and osteogenic  Normoxia and
                  Osteogenic  differentiation  culture                      30 differentiation culture  30  normal culture
                                                                                                            ***
                                                                                       ***
                RUNX2                                                    Relative fluorescence  intensity of RUNX2  20  ***  ***  Relative fluorescence  intensity of RUNX2  20  *** ***
                      Normal culture                                        0 Control 0.10% 0.25% * 0.50% 1.00%  0 Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%
                                                                                                 10
                                                                            10


                                                                                CPO⁃PCL              CPO⁃PCL
              B                                  CPO⁃PCL
                         Control   0.10%     0.25%    0.50%     1.00%       Normoxia and osteogenic  Normoxia and
                  Osteogenic  differentiation  culture                      10 8 differentiation culture  8  normal culture

                                                                                                          ***
                                                                                       ***
                                                                                                            ***
                Osteocalcin                                              Relative fluorescence intensity of Osteocalcin  6 4  ***  Relative fluorescence  intensity of Osteocalcin  6 4 2  **
                      Normal culture                                        2 0 Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  0 Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%




                                                                                CPO⁃PCL              CPO⁃PCL
              C
                                                 CPO⁃PCL
                         Control   0.10%     0.25%    0.50%     1.00%       Normoxia and osteogenic  Normoxia and
                  Osteogenic  differentiation  culture                      8 differentiation culture  20  normal culture

                                                                                       ***
                                                                                                            ***
                Osteopontin                                              Relative fluorescence intensity of Osteopotin  6 4 2  ***  Relative fluorescence  intensity of Osteopotin  15 5  **
                                                                                                 10
                      Normal culture                                        0 Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%  0 Control 0.10% 0.25% 0.50% 1.00%




                                                                                CPO⁃PCL              CPO⁃PCL
                 Effects of different concentrations of CPO⁃PCL microparticles on RUNX2(A),Osteocalcin(B)and Osteopontin(C)expression after normoxic osteo⁃
                                                                                               *
                                                                                                     **
              genic differentiation or normal culture for 7 days(Scale bars=100 μm;magnification:×200). Compared with the control group,P < 0.05,P < 0.01 and
              ***
               P < 0.001(n=3).
              图8 免疫荧光检测常氧7 d不同浓度CPO⁃PCL微粒对ADMSC成骨分化培养和正常培养中RUNX2、Osteocalcin 和 Osteopo⁃
                   tin的表达情况
              Figure 8  Expression levels of RUNX2,Osteocalcin and Osteopotin in ADMSC with osteogenic differentiation culture or
                       normal culture after treatment of different concentrations of CPO⁃PCL microparticles under normoxia for 7 days
                       detected by immunofluorescence

              复合材料也支持细胞增殖,同时保护成骨前细胞                                  目前普遍认为骨中 ALP 与骨钙化作用密切相
              免受缺氧诱导的细胞死亡。综上结果,不论是在                             关,成骨细胞中 ALP 可产生磷酸,与骨中的钙生成
              体内还是体外,CPO⁃PCL植入对机体损害较小,可以                        磷酸钙沉积于骨中         [25] ,相关生物材料研究显示,体
              促进干细胞增殖,具有良好的生物相容性。然而,有                           内植入未分化的间充质干细胞负载聚(乳酸⁃CO⁃乙
              研究表明,细胞黏附决定细胞的增殖能力,黏附斑为                           醇酸)/HA(PLGA/HA)复合材料时,ALP的mRNA 水
              细胞在材料表面定植和铺展提供支持 。Liang等                    [24]  平明显高于分化的间充质干细胞负载支架                     [26] 。细
                                               [23]
              研究证明,纳米材料通过黏附斑相关通路调控细                             胞骨分化形成的钙结节通常采用茜素红染色来观察,
              胞骨架结构。因此后续将根据这一观点继续深                              茜素红试剂的茜素磺酸钠盐与成骨细胞的钙盐螯
              入探讨 CPO⁃PCL 的生物活性作用。                              合形成橘红色复合物,橘红色复合物越多说明诱导
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